本文關(guān)鍵詞：香煙煙霧對大鼠肺組織及Ⅱ型肺泡上皮細胞親環(huán)素A表達的影響

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【摘要】：【目的】 初步研究親環(huán)素A(CyclophilinA,CypA)在被動吸煙大鼠肺組織中的表達；以及在香煙煙霧提取物處理的大鼠II型肺泡上皮細胞（AECII）內(nèi)的表達及其與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激性凋亡（ERSIA）的關(guān)系。 【方法】 本研究分為動物實驗部分以及體外細胞實驗部分： 1.動物實驗部分：40只SD-大鼠分為對照組、被動吸煙2個月組（2個月組）、被動吸煙4個月組（4個月組）、被動吸煙4個月后停止吸煙1個月組（戒煙組），檢測各組大鼠肺功能，提取各組大鼠肺組織標本，用HE染色法檢測造模情況，分別采用反轉(zhuǎn)錄-PCR（RT-PCR）、Western blot、免疫組織化學（IHC）方法檢測CypA的表達。 2.體外細胞實驗部分：體外培養(yǎng)AECII；制備10%的CSE；用CSE分別處理AECII0h、3h、6h、12h、24h；采用RT-PCR、Western blot、細胞免疫熒光染色方法檢測CypA、Caspase12、JNK、P-JNK、CHOP的表達。 【結(jié)果】 1.動物實驗部分 （1）大鼠肺組織病理學結(jié)果顯示:2個月組與對照組相比肺泡腔有所擴大，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺泡間質(zhì)有斷裂，4個月組肺泡腔擴大更明顯，肺泡壁變薄，肺泡結(jié)構(gòu)嚴重斷裂，戒煙組與4個月組差異不明顯。 （2）Western blot結(jié)果顯示：CypA在對照組、吸煙2個月組、4個月組、戒煙組的蛋白表達量分別為：0.63±0.02、1.02±0.27、1.32±0.16、0.84±0.01。吸煙4個月組大鼠肺組織中表達最高，其次是吸煙2個月組、戒煙組，表達最低的為正常對照組大鼠肺組織。RT-PCR、IHC結(jié)果與Western blot結(jié)果一致。 2.細胞實驗部分 （1）RT-PCR結(jié)果顯示：CypA在0h、3h、6h、12h、24h的mRNA表達量分別為：0.64±0.24、0.86±0.01、0.88±0.09、1.11±0.09、1.02±0.01。隨著CSE作用時間的延長，CypA的表達呈現(xiàn)一個遞增的趨勢，在12H表達最高。 （2）Westernblot結(jié)果顯示:CypA在0h、3h、6h、12h、24h的蛋白表達量分別為：0.08±0.02、0.15±0.03、0.24±0.03、0.31±0.02、0.46±0.03。隨著CSE作用時間延長CypA蛋白的表達呈現(xiàn)遞增趨勢，于24H表達最高。總JNK、P-JNK、Caspase12、CHOP在0h、3h、6h、12h、24h的蛋白表達量分別為1.52±0.22、1.13±0.24、1.50±0.21、1.21±0.55、1.04±0.24；0.16±0.05、0.29±0.03、0.38±0.03、0.48±0.06、0.69±0.01；0.12±0.05、0.25±0.04、0.39±0.02、0.58±0.05、0.49±0.02；0.00、0.35±0.09、0.48±0.04、0.66±0.06、0.81±0.08。在總JNK的表達與對照組相比，10％的CSE作用不同時間點均無顯著差異（P＞0.5），，P-JNK的表達隨著CSE作用時間的延長呈遞增趨勢。Caspase12的表達隨著CSE暴露時間的延長不斷增加。CHOP蛋白的表達隨著CSE暴露時間的延長也呈現(xiàn)遞增趨勢。 【結(jié)論】 被動吸煙大鼠肺組織CypA表達增高，香煙煙霧提取物處理RLE-6TN上調(diào)CypA表達水平并激活ERSIA相關(guān)通路。研究結(jié)果提示CypA對香煙煙霧（提取物）誘導的ERS可能具有保護作用。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 細胞凋亡 親環(huán)素A 慢性阻塞性肺疾病 香煙煙霧
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R563.9
【目錄】：

• 主要縮略詞簡表4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-19
• 結(jié)果19-23
• 討論23-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻27-30
• 附圖30-34
• 綜述：親環(huán)素 A 在呼吸系統(tǒng)疾病中的研究進展34-44
• 參考文獻40-44
• 碩士期間撰寫論文44-45
• 致謝45

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本文編號：840958