本文關(guān)鍵詞：IRAK-M在哮喘中的免疫調(diào)節(jié)作用及變應(yīng)性支氣管肺曲菌病患者臨床特征分析

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【摘要】：目的：探索IRAK-M在哮喘動(dòng)物模型中對(duì)Th2炎癥的影響,及其對(duì)樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞功能作用。方法：1)哮喘模型：使用雌性IRAK-M-/-及野生型小鼠建立OVA致敏的急性及慢性持續(xù)哮喘模型；使用RT-PCR及免疫組化檢測野生型哮喘模型小鼠中IRAK-M mRNA及蛋白表達(dá)的變化；氣管插管檢測兩組哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性,ELISA檢測血清總IgE,肺病理HE染色,流式細(xì)胞術(shù)檢測BALF炎性細(xì)胞分類及多因子檢測細(xì)胞因子、肺及脾臟Th細(xì)胞亞群、肺DC及肺泡巨噬細(xì)胞表面共刺激分子等免疫指標(biāo)。2)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：免疫磁珠分離IRAK-M-/-的及野生型小鼠脾臟naive CD4+T細(xì)胞后行增殖實(shí)驗(yàn)及誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)；提取兩組小鼠骨髓細(xì)胞誘導(dǎo)分化BMDC及BMDM細(xì)胞,經(jīng)LPS及OVA刺激后檢測其表面共刺激分子變化；將IRAK-M-/-的及野生型小鼠來源的BMDC/BMDM (OVA刺激24h)與正常naive CD4+T細(xì)胞混合培養(yǎng)后檢測T細(xì)胞亞群分化。3)細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)：將IRAK-M-/-及野生型BMDC/BMDM(OVA呈遞24h)分別經(jīng)鼻滴入野生型小鼠,以觀察兩組哮喘程度。結(jié)果：1) IRAK-M在哮喘肺部顯著增高；較之野生型急性哮喘小鼠,IRAK-M-/-急性哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性、肺部炎性浸潤細(xì)胞、BALF炎性細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞百分比、IL-4、IL-13等細(xì)胞因子、Th2及Th17細(xì)胞百分比濃度顯著增高,而Treg百分比顯著降低；2) IRAK-M-/-哮喘小鼠肺中上皮來源促炎分泌細(xì)胞因子IL-33、TSLP顯著增多,而IL-25顯著變化。3)與野生型小鼠來源naive CD4+T細(xì)胞相比,IRAK-M-/-來源naive CD4+T細(xì)胞增殖無顯著差異,但更易于向Th17分化,而Treg分化減少。4) IRAK-M-/-哮喘小鼠肺DC細(xì)胞及巨噬細(xì)胞促炎共刺激分子表達(dá)增多,IRAK-M缺失可致BMDC/BMDM促炎共刺激分子上調(diào)、更易促進(jìn)naive CD4+T細(xì)胞向促炎性Th亞群分化。5) IRAK-M-/- BMDC/BMDM細(xì)胞移植哮喘小鼠較對(duì)照組哮喘炎癥更重。結(jié)論：IRAK-M表達(dá)在哮喘肺組織總顯著增高,且IRAK-M缺失可影響氣道上皮細(xì)胞、 CD4+T細(xì)胞、DC細(xì)胞及巨噬細(xì)胞多種途徑從而加重哮喘炎癥。目的：總結(jié)變應(yīng)性支氣管肺曲菌病(ABPA)患者的臨床特征,增強(qiáng)對(duì)ABPA的臨床特點(diǎn)認(rèn)識(shí),以早期診治。方法：回顧性分析了1996年1月至2015年7月北京協(xié)和醫(yī)院住院確診的77例ABPA患者的臨床資料。結(jié)果77例ABPA患者中,男38例,女39例,平均年齡(41.8±18.3)歲。74例(96%)合并支氣管哮喘,3例(4%)合并肺囊性纖維化。主要癥狀有咳嗽(100%)、咳痰(97%)、喘息(86%)、痰栓(25%)、痰中帶血(18%)、咯血(9%)、胸痛(9%)；發(fā)熱(47%)、體重下降(30%)、盜汗(12%)。實(shí)驗(yàn)檢查主要發(fā)現(xiàn)血嗜酸性粒細(xì)胞升高(87%)、抗曲菌特異性IgE升高(89%)、特異性IgG升高(57%)、曲菌抗原皮試陽性(88%)。肺功能：阻塞性通氣功能障礙(66%)、彌散功能障礙(65%)、舒張實(shí)驗(yàn)陽性(60%)。胸部CT 72例,中心型支氣管擴(kuò)張(81%)、斑片條索影(79%)、胸膜增厚(49%)、縱隔及肺門多發(fā)腫大淋巴結(jié)(35%)、結(jié)節(jié)影(25%)、痰栓征(21%)、游走斑片影(35%)。44例(58%)患者診斷ABPA前誤診為肺結(jié)核、肺炎、肺膿腫、肺癌、自身免疫性等疾病。結(jié)論：ABPA極易誤診,當(dāng)支氣管哮喘或肺囊性纖維化患者出現(xiàn)喘息、痰栓、血嗜酸性粒細(xì)胞增高、中心型支氣管擴(kuò)張、肺內(nèi)游走斑片影的應(yīng)高度警惕合并該病。
【關(guān)鍵詞】：支氣管哮喘 IRAK-M T細(xì)胞亞群 樹突狀細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 變應(yīng)性支氣管肺曲菌病 臨床特征 診斷
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R519.8;R562.25
【目錄】：

• 縮寫詞6-8
• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-16
• 第一部分：IRAK-M在哮喘中的免疫調(diào)節(jié)作用16-87
• 一. 引言16-17
• 二、實(shí)驗(yàn)方法材料17-54
• 1 材料17-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 1.2 主要試劑17-18
• 1.3 主要儀器18-19
• 1.4 主要溶液配置19
• 2 實(shí)驗(yàn)方法19-52
• 2.1 哮喘模型20-44
• 2.1.1 哮喘模型的建立20-21
• 2.1.2 氣道反應(yīng)性測定21-22
• 2.1.3 支氣管肺泡灌洗收集及計(jì)數(shù)染色22
• 2.1.4 標(biāo)本收集22-23
• 2.1.5 支氣管肺泡灌洗多因子檢測23-31
• 2.1.6 血清ELISA檢測31
• 2.1.7 肺組織病理31-34
• 2.1.8 肺組織免疫組化34-36
• 2.1.9 縱隔淋巴細(xì)胞及計(jì)數(shù)36
• 2.1.10 肺單個(gè)核細(xì)胞獲取及計(jì)數(shù)36-37
• 2.1.11 脾單個(gè)核細(xì)胞獲取37-38
• 2.1.12 流式細(xì)胞術(shù)檢測及分析38-41
• 2.1.13 RT-PCR41-44
• 2.1.14 肺組織勻漿上清提取44
• 2.2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)44-51
• 2.2.1 磁珠分離naive CD4+T細(xì)胞44-45
• 2.2.2 naive CD4+T細(xì)胞及脾細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)45-46
• 2.2.3 naive CD4+T細(xì)胞誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)46-48
• 2.2.4 骨髓來源樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)48
• 2.2.5 磁珠純化骨髓來源樹突狀細(xì)胞48-50
• 2.2.6 骨髓來源樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)50
• 2.2.7 巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)50-51
• 2.2.8 混合培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)51
• 2.3 巨噬細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)51-52
• 2.3.1 哮喘模型建立51-52
• 2.3.2. 樣本收集及檢測52
• 2.4 DC細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)52
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析52-54
• 三、結(jié)果54-80
• 四、討論80-83
• 五、總結(jié)83-84
• 參考文獻(xiàn)84-87
• 第二部分：變應(yīng)性支氣管肺曲菌病患者臨床特征分析87-104
• 一. 引言87-88
• 二、資料方法88-90
• 三、結(jié)果90-100
• 四、討論100-102
• 五、總結(jié)102-103
• 參考文獻(xiàn)103-104
• 綜述一104-113
• 參考文獻(xiàn)110-113
• 綜述二113-121
• 參考文獻(xiàn)119-121
• 致謝121-122

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張明強(qiáng);IRAK-M在哮喘中的免疫調(diào)節(jié)作用及變應(yīng)性支氣管肺曲菌病患者臨床特征分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

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本文編號(hào)：831745