本文關(guān)鍵詞：吸入硫化氫對大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷的干預(yù)作用

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【摘要】：煙霧吸入性損傷是火災(zāi)后人群死亡的重要原因，火災(zāi)后超過30%的燒傷病人合并有煙霧吸入性損傷，煙霧吸入性損傷使燒傷相關(guān)病死率增加20%，使煙霧吸入/燒傷合并傷的病死率達(dá)到30-90%。煙霧吸入性損傷重者發(fā)生中毒性肺炎或肺水腫，嚴(yán)重者極易導(dǎo)致急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征(acute lung injury/acute respiratorydistress syndrome，ALI/ARDS)。因臨床尚無特異性治療方法，病死率很高，是呼吸及危重病科治療中的難題，同時也是戰(zhàn)傷研究的熱點(diǎn)之一。 近些年的研究中，內(nèi)源性硫化氫(hydrogen sulfide，H2S)一改既往“有臭雞蛋氣味的廢氣”形象，被稱為繼一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化碳(carbon monoxide，CO)之后的第三種氣體信號分子，具有抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、舒張血管、抗纖維化、參與調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及生殖系統(tǒng)功能等作用。實驗證實，低劑量的外源性H2S氣體吸入(對于小鼠有效且無副損傷的吸入方式為80ppm6h)或低劑量的H2S供體應(yīng)用于多種原因所致的肺損傷動物模型，可起到減輕肺損傷、保護(hù)肺臟的作用。但吸入H2S氣體干預(yù)煙霧吸入性肺損傷的研究尚無報道。因此本課題設(shè)計吸入H2S氣體應(yīng)用于棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，觀察其干預(yù)效果并探討相關(guān)的機(jī)制。研究目的 1、設(shè)計制作大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型。 2、觀察吸入H2S氣體80ppm6h對棉花煙霧吸入性肺損傷大鼠的干預(yù)效果，并完善相關(guān)指標(biāo)的檢測。 3、觀察吸入H2S氣體80ppm3h或6h對棉花煙霧吸入性肺損傷大鼠干預(yù)效果的差異，同時探討在這一過程中的相關(guān)分子機(jī)制。研究方法 1、參考既往文獻(xiàn)，設(shè)計制作大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型，，行血?dú)夥治�，觀察肺大體及肺組織病理學(xué)，ELISA法檢測大鼠支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid，BALF)中總蛋白、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-8(IL-8)濃度、肺組織丙二醛(malondialdehyde，MDA)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)濃度。 2、復(fù)制棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，吸入H2S氣體80ppm6h，行前述指標(biāo)檢測，同時ELISA法檢測肺組織中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase，iNOS)、核因子-κBp65片段(the p65subunit of nuclear factor kappaB，NF-κBp65)濃度，熒光定量PCR法行肺組織iNOS mRNA定量。 3、復(fù)制棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，分別吸入H2S氣體80ppm3h或6h，行前述指標(biāo)及肺濕干重比檢測，同時ELISA法檢測肺組織中NO、谷胱甘肽(glutathione，GSH）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl cysteine synthetase，γ-GCS)濃度，免疫組化檢測肺組織NF-κBp65、核因子-E2相關(guān)因子(nuclear factor-E2relatedfactor，Nrf2)并進(jìn)行半定量分析，熒光定量PCR法行肺組織γ-GCS mRNA定量。 結(jié)果 1、與正常對照組比較，大鼠棉花煙霧吸入致傷后6h肺組織可見明顯充血、水腫，表面大部分區(qū)域有鮮紅色至深紅色出血，鏡下見肺泡結(jié)構(gòu)彌漫性破壞，腔內(nèi)可見透明膜及漏出的紅細(xì)胞，肺泡間隔增厚，炎癥細(xì)胞明顯浸潤等典型的肺損傷表現(xiàn)，BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度明顯升高，肺組織MDA、MPO濃度均升高，也支持急性肺損傷的診斷。 2、煙霧吸入后立即予以80ppm H2S氣體吸入6h，大鼠肺損傷的組織病理學(xué)表現(xiàn)明顯減輕，氧合指數(shù)升高，BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度降低，肺組織中MDA、MPO、iNOS、NF-κBp65濃度、iNOS mRNA相對表達(dá)量均降低。但健康大鼠吸入80ppmH2S氣體6h有輕度的肺損傷表現(xiàn)。 3、煙霧+H2S3h組和煙霧+H2S6h組兩組大鼠的肺組織病理學(xué)、動脈血氧分壓、肺濕干重比、MDA等指標(biāo)對比無明顯差別，可認(rèn)為兩者減輕肺損傷的效果相似，并且兩組大鼠肺組織中NF-Bp65或Nrf2的累積光密度、iNOS mRNA或γ-GCS mRNA的相對表達(dá)量、NF-Bp65、iNOS、NO、GSH濃度均降低，γ-GCS濃度無明顯差異。但健康大鼠單純吸入80ppmH2S氣體3h無明顯肺損傷表現(xiàn)。 結(jié)論 1、棉花煙霧吸入可導(dǎo)致大鼠急性肺損傷，吸入致傷后6h大鼠的氧合指數(shù)、肺濕干重比、BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度、肺組織中MDA、MPO濃度等檢測指標(biāo)與人類急性肺損傷的表現(xiàn)相似。 2、吸入H2S80ppm6h可通過抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)而減輕大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷，但吸入H2S80ppm6h也可能導(dǎo)致大鼠輕度肺損傷。 3、吸入H2S減輕大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷的機(jī)制可能是吸入H2S抑制了NF-κBp65的激活，使iNOS mRNA的轉(zhuǎn)錄合成減少，減少了iNOS的表達(dá)和NO的合成，從而減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，減輕了大鼠的肺損傷。吸入80ppm H2S可減輕大鼠煙霧吸入性肺損傷，但時間不可過長，3h是適宜時間，6h可導(dǎo)致肺損傷。
【關(guān)鍵詞】：煙霧吸入性損傷 硫化氫 氧化應(yīng)激 急性肺損傷 核因子-κB
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563.8
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 英文縮略詞表11-12
• 前言12-17
• 參考文獻(xiàn)15-17
• 第一部分 大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型的建立17-31
• 一、材料與方法17-21
• 二、結(jié)果21-29
• 三、討論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-31
• 第二部分 吸入硫化氫對大鼠煙霧吸入性肺損傷的干預(yù)作用31-53
• 一、材料與方法31-34
• 二、結(jié)果34-48
• 三、討論48-50
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 第三部分 吸入硫化氫干預(yù)大鼠煙霧吸入性肺損傷中的氧化/抗氧化反應(yīng)53-75
• 一、材料與方法53-55
• 二、結(jié)果55-69
• 三、討論69-72
• 參考文獻(xiàn)72-75
• 全文總結(jié)75-76
• 綜述一 ALI/ARDS 與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)76-87
• 參考文獻(xiàn)84-87
• 綜述二 煙霧吸入性 ALI/ARDS 與細(xì)胞應(yīng)激87-95
• 參考文獻(xiàn)92-95
• 綜述三 火災(zāi)后煙霧吸入性損傷的救治95-105
• 參考文獻(xiàn)102-105
• 論文發(fā)表情況105-106
• 致謝106

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 王敦,馮中明,劉旭盛,黎鰲,楊宗城,姜坤元,魏鉅菊,傅瓊芳,劉明政,王振國;大鼠煙霧吸入性損傷模型[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1989年05期

2 周敏,姚斌,嚴(yán)尚學(xué),李濤,朱捷,王偉,郝建;爆炸及火藥燃燒致吸入性肺損傷大鼠實驗?zāi)Ｐ偷慕J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2005年08期

3 劉一凡;唐紅衛(wèi);吳小利;謝尹晶;張洪瑞;段晉燕;向代軍;蘭曉梅;李綿洋;王成彬;李登清;;黑火藥煙霧致吸入性肺損傷大鼠模型的建立與評價[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2013年08期

4 謝爾凡，楊宗城，王孰，傅瓊芳，魏鉅菊;大鼠煙霧吸入性損傷模型的制作[J];中國實驗動物學(xué)雜志;1994年04期

5 劉小龍;查天建;;淺談突發(fā)性成批燒傷患者的救治策略[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2010年06期

6 馬曉春;王辰;方強(qiáng);劉大為;邱海波;秦英智;席修明;黎毅敏;;急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征診斷和治療指南(2006)[J];中國危重病急救醫(yī)學(xué);2006年12期

7 孫磊;李代波;曹佳;;急性煙霧吸入性肺損傷藥物治療的研究進(jìn)展[J];中華哮喘雜志(電子版);2011年04期

本文編號：787008