發(fā)布時間：2017-08-06 04:25

  本文關(guān)鍵詞：鈾礦塵對肺成纖維細胞合成膠原蛋白影響研究

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【摘要】：目的觀察鈾礦塵對小鼠肺成纖維細胞合成膠原蛋白的影響并探討其機制。方法①取小鼠巨噬細胞RAW264.7細胞分為溶劑對照組和染塵組,分別以終濃度為0、120 mg/L的鈾礦塵混懸液處理0、2、4、8、16、24和32 h后,收集細胞上清液,采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)水平,選擇最佳染塵時間,分離制備該時間點的2組細胞上清液作為條件培養(yǎng)液(CM)進行后續(xù)實驗。②取小鼠肺成纖維細胞L929細胞分為對照組和鈾礦塵組,分別予溶劑對照組和染塵組的CM處理0、6、12、18、24、30、36 h后,采用免疫組化法檢測細胞內(nèi)α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達,ELISA法檢測細胞上清液中Ⅰ型膠原蛋白(COLⅠ)、III型膠原蛋白(COLⅢ)和羥脯氨酸(HYP)的水平。結(jié)果①染塵組RAW264.7細胞上清液中TGF-β1水平從染塵后4 h時間點起開始較溶劑對照組出現(xiàn)有統(tǒng)計學意義的升高(P0.05);在染塵后4~24 h呈隨染塵時間的增加而升高的時間-效應(yīng)關(guān)系(P0.05),至染塵后24 h達到峰值。取染塵后24 h時間點的2組細胞上清液作為CM進行后續(xù)實驗。②相較同時間點對照組,鈾礦塵組在經(jīng)相應(yīng)CM處理后18~36 h,L929細胞中α-SMA表達水平均上調(diào)(P0.05),在CM處理后12~36 h,L929細胞上清液中COLⅠ、COLⅢ和HYP的水平均升高(P0.05),且α-SMA表達水平和COLⅢ、HYP的水平均不同程度地呈現(xiàn)隨CM作用時間的增加而升高的時間-效應(yīng)關(guān)系(P0.05)。結(jié)論鈾礦塵刺激巨噬細胞后可導(dǎo)致細胞分泌TGF-β1增加,繼而作用于成纖維細胞,上調(diào)α-SMA表達,增加COLⅠ、COLⅢ和HPY合成,可能是鈾礦塵致肺纖維化的機制之一。
【作者單位】： 南華大學公共衛(wèi)生學院預(yù)防醫(yī)學系;
【關(guān)鍵詞】： 鈾礦塵 肺纖維化 成纖維細胞 巨噬細胞 轉(zhuǎn)化生長因子-β α-平滑肌肌動蛋白 膠原蛋白 羥脯氨酸
【基金】：湖南省教育廳基金(15C1198)
【分類號】：R135.2
【正文快照】： expression,and increase the ColⅠ,ColⅢand HYP synthesis.These might be the important mechanisms of lungfibrosis.鈾礦塵屬于一種混合型粉塵,其主要成分是游離二氧化硅(Si O2,水平一般為20.00%~80.00%),其次還含有天然鈾及其衰變產(chǎn)物如鐳、釙和氡等放射性核素[1]。鈾

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本文編號：628392