本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞在染矽塵大鼠體內示蹤研究

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【摘要】：目的了解骨髓間充質干細胞(BMMSC)在染矽塵大鼠體內的分布情況。方法取7只無特定病原體級健康雄性SD大鼠采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)BMMSC,經慢病毒載體介導的增強型綠色熒光蛋白(LV-e GFP)轉染后,采用臺盼藍染色和CCK-8法檢測轉染前后細胞的活力及增殖能力。取同批大鼠隨機分為對照組和染塵組,每組4只。染塵組以1.0mL質量濃度為40 g/L的矽塵混懸液氣管內注入染塵,對照組氣管內注入1.0mL生理氯化鈉溶液。以轉染后的BMMSC經尾靜脈注入2組大鼠體內,分別于移植后第1、2、3和4周取肺、肝、脾、心、腎臟和腦組織冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察轉染LV-e GFP的BMMSC植入后在上述臟器組織的熒光分布,采用Image-pro plus 6.0圖像分析軟件計算組織熒光強度。結果感染復數為50時,BMMSC轉染率達80.00%,綠色熒光表達強烈、持續(xù),轉染后BMMSC形態(tài)無改變;轉染與未轉染LV-e GFP的BMMSC的細胞存活率差異無統(tǒng)計學意義[(97.67±0.60)%vs(98.03±0.56)%,P0.05]。BMMSC增殖能力在LV-e GFP轉染處理的主效應上無統(tǒng)計學意義(P0.05)。植入轉染LV-e GFP的BMMSC后第1周,2組大鼠各臟器組織切片鏡下均可見熒光分布,其中染塵組大鼠肺臟組織切片各視野均可見較強熒光,持續(xù)至植入后第4周,以氣管、血管及其周圍組織熒光明顯,肺泡及肺間質熒光也分布較多。植入轉染LV-e GFP的BMMSC后,染塵組大鼠肺臟組織4個觀察時間點熒光強度均高于同時間點對照組(P0.01),且隨觀察時間的延長而減弱(P0.01);染塵組大鼠肝臟和心臟組織4個觀察時間點以及腎臟組織第2、3和4周的熒光強度均低于同時間點對照組(P0.01);染塵組大鼠脾臟組織第1和2周的熒光強度均高于同時間點對照組(P0.01),第3和4周的熒光強度均低于同時間點對照組(P0.01);染塵組大鼠腦組織第1周的熒光強度高于同時間點對照組(P0.01)。染塵組大鼠肺臟組織第1和2周熒光強度均高于同組同時間點肝臟、腎臟和腦組織(P0.01),低于脾臟組織(P0.01);但第3和4周熒光強度均高于同組同時間點其余5種器官組織(P0.01)。結論 BMMSC進入染矽塵大鼠體內后可歸巢并定植到受損肺部。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學院;廣東省職業(yè)病防治院廣東省職業(yè)病防治重點實驗室;
【關鍵詞】： 骨髓間充質干細胞 矽肺 綠色熒光蛋白 轉染 示蹤 歸巢
【基金】：國家科技支撐計劃項目(2014BAI12B01) 國家自然科學基金(81302396) 廣東省職業(yè)病防治重點實驗室(2012A061400007)
【分類號】：R135.2
【正文快照】： 矽肺是我國常見的職業(yè)病之一,其所致肺損傷進展快、致殘率高,嚴重危害人體健康,降低其勞動能力和生活質量,給社會和國家造成巨大的經濟損失。臨床現有的治療方法很難完全阻斷矽肺的發(fā)展進程,尋找安全、可靠的治療措施成為矽肺研究中亟待解決的問題[1]。間充質干細胞是一類來源

【參考文獻】

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1 王賢;曾玉蘭;彭紅星;楊榮時;;骨髓間充質干細胞抑制大鼠肺纖維化的作用機制[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2014年03期

2 金善豐;陳志耀;黃鶴光;;綠色熒光蛋白轉基因小鼠骨髓間充質干細胞干預重癥急性胰腺炎大鼠后在多臟器的分布[J];中國組織工程研究;2012年10期

3 張紅珊;方建培;蘇浩彬;楊e，

本文編號：572225