骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在染矽塵大鼠體內(nèi)示蹤研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-25 16:28
本文關(guān)鍵詞:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在染矽塵大鼠體內(nèi)示蹤研究
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【摘要】:目的了解骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSC)在染矽塵大鼠體內(nèi)的分布情況。方法取7只無特定病原體級(jí)健康雄性SD大鼠采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)BMMSC,經(jīng)慢病毒載體介導(dǎo)的增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(LV-e GFP)轉(zhuǎn)染后,采用臺(tái)盼藍(lán)染色和CCK-8法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的活力及增殖能力。取同批大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和染塵組,每組4只。染塵組以1.0mL質(zhì)量濃度為40 g/L的矽塵混懸液氣管內(nèi)注入染塵,對(duì)照組氣管內(nèi)注入1.0mL生理氯化鈉溶液。以轉(zhuǎn)染后的BMMSC經(jīng)尾靜脈注入2組大鼠體內(nèi),分別于移植后第1、2、3和4周取肺、肝、脾、心、腎臟和腦組織冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染LV-e GFP的BMMSC植入后在上述臟器組織的熒光分布,采用Image-pro plus 6.0圖像分析軟件計(jì)算組織熒光強(qiáng)度。結(jié)果感染復(fù)數(shù)為50時(shí),BMMSC轉(zhuǎn)染率達(dá)80.00%,綠色熒光表達(dá)強(qiáng)烈、持續(xù),轉(zhuǎn)染后BMMSC形態(tài)無改變;轉(zhuǎn)染與未轉(zhuǎn)染LV-e GFP的BMMSC的細(xì)胞存活率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(97.67±0.60)%vs(98.03±0.56)%,P0.05]。BMMSC增殖能力在LV-e GFP轉(zhuǎn)染處理的主效應(yīng)上無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。植入轉(zhuǎn)染LV-e GFP的BMMSC后第1周,2組大鼠各臟器組織切片鏡下均可見熒光分布,其中染塵組大鼠肺臟組織切片各視野均可見較強(qiáng)熒光,持續(xù)至植入后第4周,以氣管、血管及其周圍組織熒光明顯,肺泡及肺間質(zhì)熒光也分布較多。植入轉(zhuǎn)染LV-e GFP的BMMSC后,染塵組大鼠肺臟組織4個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)熒光強(qiáng)度均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.01),且隨觀察時(shí)間的延長(zhǎng)而減弱(P0.01);染塵組大鼠肝臟和心臟組織4個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)以及腎臟組織第2、3和4周的熒光強(qiáng)度均低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.01);染塵組大鼠脾臟組織第1和2周的熒光強(qiáng)度均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.01),第3和4周的熒光強(qiáng)度均低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.01);染塵組大鼠腦組織第1周的熒光強(qiáng)度高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.01)。染塵組大鼠肺臟組織第1和2周熒光強(qiáng)度均高于同組同時(shí)間點(diǎn)肝臟、腎臟和腦組織(P0.01),低于脾臟組織(P0.01);但第3和4周熒光強(qiáng)度均高于同組同時(shí)間點(diǎn)其余5種器官組織(P0.01)。結(jié)論 BMMSC進(jìn)入染矽塵大鼠體內(nèi)后可歸巢并定植到受損肺部。
【作者單位】: 貴陽醫(yī)學(xué)院;廣東省職業(yè)病防治院廣東省職業(yè)病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 矽肺 綠色熒光蛋白 轉(zhuǎn)染 示蹤 歸巢
【基金】:國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2014BAI12B01) 國(guó)家自然科學(xué)基金(81302396) 廣東省職業(yè)病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(2012A061400007)
【分類號(hào)】:R135.2
【正文快照】: 矽肺是我國(guó)常見的職業(yè)病之一,其所致肺損傷進(jìn)展快、致殘率高,嚴(yán)重危害人體健康,降低其勞動(dòng)能力和生活質(zhì)量,給社會(huì)和國(guó)家造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。臨床現(xiàn)有的治療方法很難完全阻斷矽肺的發(fā)展進(jìn)程,尋找安全、可靠的治療措施成為矽肺研究中亟待解決的問題[1]。間充質(zhì)干細(xì)胞是一類來源
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條
1 王賢;曾玉蘭;彭紅星;楊榮時(shí);;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞抑制大鼠肺纖維化的作用機(jī)制[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年03期
2 金善豐;陳志耀;黃鶴光;;綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞干預(yù)重癥急性胰腺炎大鼠后在多臟器的分布[J];中國(guó)組織工程研究;2012年10期
3 張紅珊;方建培;蘇浩彬;楊e,
本文編號(hào):572225
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