本文關(guān)鍵詞：番茄紅素通過EGFR抑制炎癥性氣道黏液高分泌的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:以人中性粒細胞彈性蛋白酶（Human neutrophil elastase,HNE）作為刺激物刺激氣道上皮細胞，在其形成的氣道黏液高分泌模型中，探索番茄紅素對病理型黏蛋白（Mucin，MUC）5ac的治療效果及具體信號通路的相關(guān)研究。 方法：將人支氣管上皮細胞株HBE16細胞進行培養(yǎng)后，將其分成7組，分別進行如下處理，每組依次添加入濃度為0、25、50、75、100、200、400umol/L的番茄紅素，經(jīng)四甲基偶氮唑藍光吸收法（Methylthiazolyl tetrazolium，MTT）觀察各組HBE16細胞的存活率，根據(jù)細胞存活率確定番茄紅素處理濃度。將HBE16細胞分成如下5組，予以番茄紅素及表皮生長因子受體（Epidermal growth factor receptor，EGFR）抑制劑AG1478進行干預(yù)：①對照組；②HNE處理組（50nmol/L）；③HNE（50nmol/L）+番茄紅素（100umol/L）處理組；④HNE（50nmol/L）+AG1478（5umol/L）處理組；⑤HNE（50nmol/L）+番茄紅素（100umol/L）+AG1478（5umol/L）處理組。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Reverse transcription-PCR，RT-PCR）方法檢測各組細胞中MUC5ac mRNA及EGFR mRNA的表達情況；以酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測各組細胞中MUC5ac蛋白的分布情況，并運用細胞免疫激光共聚焦顯微鏡進一步觀察HNE16細胞經(jīng)番茄紅素作用前后各組細胞MUC5ac蛋白分布的差異情況；運用Western Blot方法測得各組細胞中EGFR和p-EGFR蛋白的表達情況。 結(jié)果：從MTT實驗結(jié)果中看出，番茄紅素對HBE16細胞的抑制作用呈濃度依賴性，在番茄紅素濃度不大于100umol/L時，細胞未見明顯損傷，但當(dāng)番茄紅素濃度大于100umol/L時，隨著番茄紅素濃度升高，細胞貼壁比例明顯上升，凋亡細胞顯著增多；從上述可知給予番茄紅素處理細胞濃度為100umol/L。HNE處理組中MUC5ac的mRNA和蛋白的吸光度面積積分值與對照組相比，有顯著升高，，由激光共聚焦顯像觀察的MUC5ac蛋白結(jié)果也提示其較對照組有顯著增多，EGFR mRNA、EGFR蛋白及P-EGFR蛋白表達均明顯升高。HNE+番茄紅素處理組中MUC5ac mRNA及蛋白、EGFR mRNA及蛋白、P-EGFR蛋白較HNE處理組均明顯降低，由激光共聚焦顯像觀察MUC5ac蛋白亦提示其表達有所下調(diào)；而HNE+番茄紅素+AG1478組與HNE+AG1478處理組相對比，MUC5ac mRNA及蛋白、EGFR mRNA及蛋白、P-EGFR蛋白各組指標(biāo)下調(diào)作用更明顯。以上結(jié)果均經(jīng)統(tǒng)計學(xué)方法檢測差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 結(jié)論：番茄紅素可以通過減少EGFR本身生成并且阻斷EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，從而發(fā)揮對氣道黏液高分泌的抑制作用。本實驗同時也為番茄紅素針對慢性炎癥性氣道黏液高分泌相關(guān)疾病的治療作用提出可行性。
【關(guān)鍵詞】：番茄紅素 人中性粒細胞彈性蛋白酶 表皮生長因子受體 黏蛋白
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R562
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-15
• 1 材料15-18
• 2 方法18-24
• 3 結(jié)果24-29
• 4 討論29-33
• 全文總結(jié)33-34
• 參考文獻34-36
• 文獻綜述36-45
• 綜述參考文獻42-45
• 致謝45-46
• 研究生期間發(fā)表的論文46-47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 余紅梅;周向東;;激活蛋白-1對香煙煙霧提取物誘導(dǎo)氣道黏蛋白5AC基因表達的調(diào)控作用[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年11期

2 吳小玲;周向東;;氣道黏液高分泌的信號傳導(dǎo)通路[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2008年11期

3 李琪;周向東;;中性粒細胞彈力蛋白酶引起黏蛋白5AC高表達的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

  本文關(guān)鍵詞：番茄紅素通過EGFR抑制炎癥性氣道黏液高分泌的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：430816