發(fā)布時間：2017-06-01 03:07

  本文關(guān)鍵詞：ADAMTS-1對博萊霉素所致小鼠肺成纖維細胞纖維分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 研究Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶（ADAMTS-1）對博萊霉素（BLM）誘導(dǎo)的小鼠肺成纖維細胞纖維分化的影響及其機制。 方法： 1.建立肺纖維分化模型：培養(yǎng)小鼠肺成纖維細胞，24小時后在培養(yǎng)基中加入濃度為10vg/ml的博萊霉素，，作用24小時后觀察小鼠肺成纖維細胞纖維分化后的形態(tài)并成像； 2.ADAMTS-1作用小鼠肺成纖維細胞：小鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)、傳代，種植在六孔板內(nèi)，設(shè)置6組實驗：1組（對照組）；2組（博萊霉素20vg）；3組（博萊霉素20vg+ADAMTS-11vg）；4組（博萊霉素20vg+ADAMTS-12vg）；5組（博萊霉素20vg+ADAMTS-14vg）；6組（ADAMTS-14vg）。各實驗組均在無菌溫箱內(nèi)培養(yǎng)，加入不含胎牛血清的培養(yǎng)基饑餓處理細胞24小時后，1組和6組加入不含胎牛血清培養(yǎng)基2ml；其余各組均加博萊霉素（1mg/ml）20vl和不含胎牛血清培養(yǎng)基1.98ml。于無菌溫箱培養(yǎng)24小時，24小時后3組加入1vgADAMTS；4組加入2vg ADAMTS；5組加入4vg ADAMTS；6組加入4vgADAMTS。再置于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。 3.檢測方法：分別取6組實驗細胞上清液進行酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組CTGF、COL1的濃度；分別收集6組實驗細胞用實時定量PCR法檢測各組CTGF、COL1的mRNA表達量；分別收集6組實驗細胞Western Blot檢測各組CTGF、COL1的表達情況。 結(jié)果： 1.成功建立小鼠肺成纖維細胞纖維分化模型，與正常小鼠肺成纖維細胞相比，博萊霉素處理組小鼠肺成纖維細胞纖維分化程度增加。 2.酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果顯示博萊霉素組（2組）細胞培養(yǎng)基上清液中CTGF、COL1的濃度明顯高于其它各組；實驗3、4、5組隨ADAMTS-1用量的增加細胞培養(yǎng)基上清液中CTGF、COL1的濃度依次遞減；ADAMTS-1組（6組）細胞培養(yǎng)基上清液中CTGF、COL1的濃度最低（P0.05）。 3.實時定量PCR法檢測結(jié)果顯示博萊霉素組（2組）細胞中CTGF、COL1的mRNA表達量最高；實驗3、4、5組隨ADAMTS-1用量的增加細胞中CTGF、COL1的mRNA表達量依次遞減；ADAMTS-1組（6組）細胞中CTGF、COL1的mRNA表達量最低（P0.05）。 4.Western Blot檢測結(jié)果顯示博萊霉素組（2組）細胞中CTGF、COL1的蛋白表達量最高；實驗3、4、5組隨ADAMTS-1用量的增加細胞中CTGF、COL1的蛋白表達量依次遞減；ADAMTS-1組（6組）細胞中CTGF、COL1的蛋白表達量最低（P0.05）。 結(jié)論： ADAMTS-1能降低博萊霉素所致的小鼠肺成纖維細胞中COL1、CTGF的含量，其降低程度與其劑量成正比。
【關(guān)鍵詞】：肺成纖維細胞 ADAMTS-1 CTGF COL1
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563.9
【目錄】：

• 主要縮略語4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-12
• 材料12-17
• 方法17-23
• 結(jié)果23-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-45
• 參考文獻41-45
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況45-46
• 致謝46

【參考文獻】

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  本文關(guān)鍵詞：ADAMTS-1對博萊霉素所致小鼠肺成纖維細胞纖維分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：411440