本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷調(diào)控氣道上皮細胞表達MAL及STAT6的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討三氧化二砷調(diào)控氣道上皮細胞表達T細胞成熟相關(guān)蛋白(MAL)及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)的干預(yù)作用及分子機制。方法:將32只雄性SD大鼠分為正常對照組、哮喘組及三氧化二砷組,制備正常血清、哮喘血清及三氧化二砷含藥血清,將大鼠氣道上皮細胞(Rat Trachea Epithelial,RTE)分為正常對照組、哮喘組三氧化二砷組、抑制劑AG490組(以下簡稱AG490組)、砷劑+哮喘血清組。分別與RTE共培養(yǎng),以免疫蛋白印跡法(Western-blot,WB)檢測:信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6),嗜酸性粒細胞趨化因子(Eotaxin)和MAL在RTE中的表達;半定量RT-PCR檢測RTE中STAT6,Eotaxin,MAL的m RNA的表達。結(jié)果:HE染色顯示:正常大鼠氣道及肺泡周圍無炎性細胞浸潤;哮喘大鼠支氣管及肺泡間質(zhì)周圍有大量嗜酸性細胞、淋巴細胞浸潤,部分氣道上皮脫落,氣道平滑肌增厚,基底膜增厚,氣道壁增厚,氣道管腔狹窄。免疫印跡法蛋白定量分析結(jié)果:STAT6蛋白的OD值哮喘組明顯高于正常對照組差異有顯著性(f=315.74,p=0.004);AG490組STAT6蛋白的OD值最低,明顯低于其他4組差異有顯著性(f=3245.67,p=0.001);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組STAT6蛋白的OD值較哮喘組明顯降低,差異有顯著性(f=152.91,p=0.006);三氧化二砷組較正常對照組STAT6蛋白的OD值,差異有顯著性(F=110.66,P=0.007)各組STAT6的OD值分別為:正常對照組0.57±0.02、哮喘組0.73±0.01、三氧化二砷組0.46±0.03、AG490組0.06±0.01、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.64±0.02。Eotaxin蛋白的OD值哮喘組較正常對照組明顯增高,差異有顯著性(f=3164.05,p=0.001);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組Eotaxin蛋白的OD值較哮喘組明顯降低,差異有顯著性(f=1224.65,p=0.003);其余兩組Eotaxin蛋白的OD值相似,差異無顯著性(f=7.35,p=0.06)。各組Eotaxin的OD值分別為:正常對照組0.26±0.02、哮喘組1.15±0.03、三氧化二砷組0.92±0.01、AG490組0.93±0.03、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.67±0.02。MAL蛋白的OD值哮喘組較正常組明顯降低,差異有顯著性(f=953.93,p=0.003);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組MAL蛋白的OD值較哮喘組明顯升高,差異有顯著性(f=177.96,p=0.006);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組MAL蛋白的OD值較正常對照組稍降低,差異有顯著性(F=162.58P=0.006)。各組MAL蛋白的OD值分別為:正常對照組1.08±0.06、哮喘組0.24±0.03、三氧化二砷組0.20±0.03、AG490組0.84±0.05、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.46±0.03。RT-PCR半定量分析:STAT6的m RNA相對灰度值測定:哮喘組STAT6 m RNA的相對灰度值較正常對照組明顯增高,差異有顯著性(f=374.56,p=0.005);哮喘組STAT6 m RNA的相對灰度值較AG490組明顯增高,差異有顯著性(f=109.25,p=0.007);哮喘組STAT6m RNA的相對灰度值較三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組明顯增高,差異有顯著性(f=76.71,p=0.008)。各組STAT6的m RNA相對灰度值分別為:正常對照組:0.40±0.07、哮喘組:0.95±0.08、三氧化二砷含藥血清組0.48±0.06、AG490組0.54±0.06、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.78±0.08。Eotaxin的m RNA相對灰度值測定結(jié)果:哮喘組Eotaxin m RNA的相對灰度值較正常對照組明顯增高,差異有顯著性(f=325.87,p=0.005);哮喘組與三氧化二砷組相比較Eotaxin m RNA的相對灰度值明顯升高,差異有顯著性(f=321.476,p=0.005);哮喘組與三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組相比較Eotaxin m RNA的相對灰度值明顯升高,差異有顯著性(f=35.54,p=0.008);正常對照組與三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組相比較差異有顯著性(f=230.70,p=0.005)。各組Eotaxin的m RNA相對灰度值分別為:正常對照組:0.44±0.06、哮喘組:0.87±0.07、三氧化二砷含藥血清組0.61±0.17、AG490組0.53±0.15、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.52±0.12。MAL的m RNA相對灰度值測定結(jié)果:哮喘組MAL的m RNA相對灰度值較正常對照組明顯降低,差異有顯著性(f=300.26,p=0.004);三氧化二砷組MAL的m RAN相對灰度值較正常對照組差異無顯著性(f=1155.61,p=0.003);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組m RNA相對灰度值較哮喘組明顯升高,差異有顯著性(f=158.05,p=0.007);三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組m RNA相對灰度值較正常對照組差異無顯著性(f=2.12,p=0.92)。各組MAL的m RNA相對灰度值分別為:正常對照組:0.82±0.07、哮喘組:0.53±0.10、三氧化二砷含藥血清組0.51±0.05、AG490組0.79±0.17、三氧化二砷含藥血清+哮喘血清組0.78±0.06。結(jié)論:1.哮喘血清能誘導(dǎo)氣道上皮細胞Eotaxin和STAT6高表達,MAL低表達。2.三氧化二砷可抑制氣道上皮細胞對Eotaxin的表達,上調(diào)MAL的表達,其作用機制可能與抑制JAK-STAT6信號通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：哮喘血清 三氧化二砷含藥血清 Eotaxin STAT6 MAL
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 主要縮略語中英文索引5-7
• 摘要7-11
• Abstract11-16
• 第1章 前言16-18
• 第2章 實驗材料18-21
• 第3章 實驗方法21-29
• 第4章 實驗結(jié)果29-36
• 第5章 討論36-40
• 第6章 結(jié)論40-42
• 參考文獻42-46
• 綜述46-52
• 參考文獻50-52
• 碩士期間發(fā)表論文及參與課題52
• 課題資助情況52-53
• 致謝53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孫金鈴;鄧駿杰;陳穎毅;;信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3:非多肽類小分子抑制劑[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年02期

  本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷調(diào)控氣道上皮細胞表達MAL及STAT6的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：411431