肺炎克雷伯菌作為醫(yī)院感染病原菌檢出率逐年增高,由于抗生素的廣泛應用甚至濫用,使其耐藥率亦逐年增高。其中產ESBLs是KPn重要的耐藥機制之一,同時產ESBLs較非產ESBLs菌株對其他幾類抗生素耐藥率高,而產ESBLs菌株對其他類抗生素交叉耐藥機制,目前國內外尚無系統(tǒng)的研究。 目的: 1.建立產ESBLs和非產ESBLs肺炎克雷伯菌環(huán)丙沙星耐藥模型,了解誘導耐藥菌對幾類常見抗生素的耐藥性特點。 2.探明應用外排泵抑制劑后兩組耐藥菌外排泵陽性率的差異。 3.探明兩組誘導耐藥菌誘導前后外膜蛋白表達差異。 4.探討兩組誘導耐藥菌gyrA和parC基因堿基突變位點的差異。 方法: 1.對收集的KPn臨床菌株按要求進行篩選,分為三類:敏感株(20株)、耐藥株(10株)、產ESBLs敏感株(9株)。用環(huán)丙沙星對敏感株組和產ESBLs敏感株組菌株進行體外多步法誘導耐藥。采用CLSI(2009)推薦的紙片擴散法對敏感株組誘導耐藥菌株進行多種抗生素的藥敏實驗及ESBLs初篩和表型確證試驗。 2.應用瓊脂二倍稀釋法測定兩組誘導耐藥菌對環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的MIC,以及應用外排...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1誘導菌株在128mg/L含藥MH平板上生長可見S16、S19、S20誘導株呈針尖樣菌落形態(tài)，而KP8誘導株菌落形態(tài)正常

結果耐藥菌株組20株有17株成功誘導為環(huán)丙沙星高度耐藥株，3株導時間為32.76±3.05天，誘導成功率為85%。KPn產E成功誘導為高度耐藥株，誘導時間為27.78±1.86天，誘導菌株在誘導時間上的差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。另外，菌落形態(tài)明顯....

圖3敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白SDS-PAGE電泳圖

0*#第2組相比，*P<0.05；與第1組相比，#P<0.05；第2組與第1組相比，△P>0.05。敏感株組；2組為耐藥株組；3組為產ESBLs敏感株組。膜蛋白檢測敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白進行SDS-PAGE電泳（見圖3、4），以看出....

圖4敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白SDS-PAGE電泳圖

圖4敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白SDS-PAGE電泳圖泳道1～6分別為S2、S2-R、S9、S9-R、S11、S11-R，M為蛋白marker(KD)。M12345697.466.2453121

圖5產ESBLs敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白SDS-PAGE電泳圖

45312114.4圖4敏感株組菌株誘導前后外膜蛋白SDS-PAGE電泳圖泳道1～6分別為S2、S2-R、S9、S9-R、S11、S11-R，M為蛋白marker(KD)。M12345697.4

本文編號：4031933