發(fā)布時(shí)間：2017-05-26 16:16

  本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)博萊霉素致肺纖維化小鼠干預(yù)效應(yīng)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)移植對(duì)博萊霉素致肺纖維化小鼠的干預(yù)效應(yīng)并探討其治療肺纖維化的作用機(jī)制。 方法：體外分離及培養(yǎng)6-8周齡雄性ICR小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。150只6-8周齡雌性ICR小鼠隨機(jī)分為如下3組，即：陰性對(duì)照組(NC組)，陽(yáng)性對(duì)照組(PC組)，BMSCs干預(yù)組。NC組于氣管內(nèi)注入PBS50ul，PC組及BMSCs干預(yù)組按6ug/g劑量經(jīng)鼻氣管內(nèi)滴入博萊霉素50ul一次性給藥制備肺纖維化模型，BMSCs組于造模后24小時(shí)經(jīng)尾靜脈注射MSC1×107/ml，200ul。各組小鼠分別于造模后第3、7、14、28天處死5只小鼠，處死前稱取小鼠體重，處死后稱取肺組織濕重并留取肺組織行HE、MASSON染色及羥脯氨酸含量測(cè)定；提取肺組織的DNA檢測(cè)雄鼠的性別決定基因(Sry基因)；提取肺組織RNA以檢測(cè)SP-CmRNA、AQP5mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果：1、肺系數(shù)：PC組及BMSCs組各時(shí)間點(diǎn)肺系數(shù)均較NC組稍高，但除第3天外，BMSCs組較PC組明顯降低。2、肺組織病理：BMSCs組在第7天以后肺泡炎較PC組明顯減輕，第14天以后肺纖維化程度較PC組明顯減輕。3、HYP含量：第3、7天三組HYP含量無(wú)明顯差異，14天、28天時(shí)PC組與BMSCs干預(yù)組均較NC組升高，但BMSCs干預(yù)組低于PC組。4、sry基因檢測(cè)：BMSCs干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)均可以檢測(cè)到雄性小鼠的sry基因。5、肺組織SP-C mRNA表達(dá)情況：PC組及BMSCs干預(yù)組在各時(shí)間點(diǎn)的SP-C mRNA表達(dá)均低于NC組，除第7天外，BMSCs干預(yù)組SP-C mRNA表達(dá)量相對(duì)PC組更高。6、肺組織AQP5mRNA表達(dá)情況：PC組及BMSCs干預(yù)組在各時(shí)間點(diǎn)的AQP5mRNA表達(dá)均低于NC組,與PC組相比，BMSCs干預(yù)組在各時(shí)間點(diǎn)的AQP5mRNA表達(dá)均較PC組高。 結(jié)論：1、經(jīng)尾靜脈注射的外源性BMSCs可以到達(dá)博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化小鼠的肺組織并在局部定植，，且能在局部發(fā)揮抗炎、抗纖維化的干預(yù)作用；2、外源性BMSCs發(fā)揮抗炎、抗纖維化的機(jī)制可能是通過(guò)在局部分化成為肺泡上皮細(xì)胞并增加SP-C、AQP5的表達(dá)量從而達(dá)到恢復(fù)肺干細(xì)胞庫(kù)、修復(fù)肺損傷的目的。
【關(guān)鍵詞】：特發(fā)性肺纖維化 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 羥脯氨酸 小鼠性別決定基因 肺泡表面活性蛋白-C 水通道蛋白5
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R563.9
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 前言9-11
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器11
• 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑11-12
• 2.4 常用耗材12-13
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法與步驟13-22
• 3.1 器材的滅菌、去 RNA 酶處理13
• 3.2 體外分離培養(yǎng) BMSCs 及其鑒定13-15
• 3.2.1 分離培養(yǎng)13
• 3.2.2 細(xì)胞傳代13-14
• 3.2.3 細(xì)胞鑒定14-15
• 3.3 BMSCs 移植入博萊霉素肺損傷小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)15-21
• 3.3.1 動(dòng)物模型的制備15
• 3.3.2 實(shí)驗(yàn)分組15-16
• 3.3.3 小鼠一般情況的記錄及標(biāo)本收集16
• 3.3.4 肺組織病理學(xué)檢測(cè)16-17
• 3.3.5 肺組織羥脯氨酸測(cè)定17-18
• 3.3.6 肺組織總 RNA 的提取及 SP-C、AQP 5 轉(zhuǎn)錄水平熒光定量 PCR 檢測(cè)18-19
• 3.3.7 肺組織 DNA 的提取及小鼠肺組織細(xì)胞來(lái)源檢測(cè)19-21
• 3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21-22
• 第4章 結(jié)果22-31
• 4.1 小鼠 BMSCs 生長(zhǎng)特點(diǎn)及鑒定結(jié)果22-24
• 4.2 BMSCs 移植入博萊霉素肺損傷小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)情況24-31
• 4.2.1 各實(shí)驗(yàn)組小鼠一般情況、死亡情況及肺系數(shù)變化24-25
• 4.2.2 肺組織病理學(xué)檢查25-28
• 4.2.3 肺組織羥脯氨酸含量測(cè)定28
• 4.2.4 小鼠 Y 染色體性別決定區(qū) Sry 基因的檢測(cè)28-29
• 4.2.5 SP-C mRNA 表達(dá)變化情況29-30
• 4.2.6 AQP5 mRNA 表達(dá)變化情況30-31
• 第5章 討論31-37
• 第6章 結(jié)論與展望37-38
• 6.1 結(jié)論37
• 6.2 展望37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果42-43
• 綜述43-48
• 參考文獻(xiàn)47-48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 李魯生;張涵;王成俊;程洪斌;安沂華;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法和生物學(xué)特性[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年10期

2 花少棟;杜江;劉秀香;唐雯;楊麗華;封志純;;新生兔機(jī)械通氣肺損傷肺超微結(jié)構(gòu)的改變[J];中國(guó)新生兒科雜志;2007年01期

3 蔡后榮;;2011年特發(fā)性肺纖維化診斷和治療循證新指南解讀[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2011年04期

4 崔璦;代華平;戴建武;龐寶森;牛淑潔;呂月平;王辰;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化形成的影響[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2007年09期

5 宋明臣,何冰,邱忠民,湯秀英;博萊霉素致肺纖維化大鼠肺組織表面活性物質(zhì)蛋白A B C mRNA的表達(dá)[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1998年07期

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本文編號(hào)：397415