本文關(guān)鍵詞：IL-10通過P38MAPK信號通路介導(dǎo)IL-1β對肺成纖維細胞ICAM-1的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本研究以大鼠胚肺成纖維細胞為研究對象，通過對其ICAM-1表達水平及P38MAPK磷酸化水平的觀察，探究IL-1β通過P38MAPK信號通路對ICAM-1表達水平的影響及IL-10對該影響作用的干預(yù)，進一步了解肺纖維化的部分發(fā)病機制，，為臨床治療新思路提供依據(jù)。 方法：采用組織切塊培養(yǎng)技術(shù)對Wistar鼠胚肺成纖維細胞進行培養(yǎng)：將臨產(chǎn)Wistar孕鼠吸入乙醚麻醉后，立刻取出胎鼠，將胎鼠肺組織取出后修剪為1mm3左右的小塊并加入含胎牛血清（20%）的DMEM培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件：恒溫37℃，95%空氣及5%CO2混合氣體，濕度飽和，培養(yǎng)4至6小時，一周左右后開始傳代，至5-6代后待所培養(yǎng)的肺成纖維細胞貼壁生長且結(jié)構(gòu)特征、外部形態(tài)及生長狀態(tài)基本一致遂進行下一步實驗。 首先將實驗用肺成纖維細胞以1×105/ml在預(yù)先放置有6mm×22mm蓋玻片（已消毒）的6孔板中進行接種；之后置于細胞培養(yǎng)箱中孵育至達到細胞80%-100%融合，棄掉原培養(yǎng)液并加入新培養(yǎng)液（不含胎牛血清），進一步培養(yǎng)12小時，待G0期細胞基本同步化時，將實驗細胞分為三組，每組6復(fù)孔。分組情況：(1)對照組：單純加入DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)鼠胚肺成纖維細胞，共6小時；(2)IL-1β干預(yù)組：加入含IL-1β15ng/ml的培養(yǎng)液培養(yǎng)鼠胚肺成纖維細胞，共6小時；(3) IL-10+IL-1β干預(yù)組:加入IL-10l0ng/ml及IL-lβ15ng/ml共同刺激肺成纖維細胞6小時。 以RT-PCR法檢測肺成纖維細胞ICAM-1mRNA表達水平，以Western-Blot法檢測肺成纖維細胞P38MAPK磷酸化水平。 結(jié)果： 1對Wistar胎鼠的原代肺成纖維細胞培養(yǎng)成功 實驗以組織切塊培養(yǎng)法進行Wistar胎鼠的肺成纖維細胞培養(yǎng)，最后得到比較理想的生長狀況較好的肺成纖維細胞實驗?zāi)Ｐ�，其細胞間形態(tài)較為一致，胞質(zhì)均勻，胞體豐滿，核仁及核分裂相清晰可見。 2RT-PCR法對肺成纖維細胞中ICAM-1mRNA表達水平的測定 ICAM-1mRNA電泳條帶的光密度掃描顯示：對照組的肺成纖維細胞中ICAM-1mRNA有一定量的基礎(chǔ)表達，但其表達量較低，為（0.361±0.045）； IL-1β干預(yù)組的ICAM-1mRNA的表達量為（0.848±0.039），與對照組相比明顯升高（P0.01）； IL-10+IL-1β聯(lián)合干預(yù)組ICAM-1mRNA的表達量為（0.740±0.026），明顯低于IL-1β干預(yù)組的表達量（P0.01），但與對照組相比其表達量有所升高（P0.01）。 3WesternBlot法測定肺成纖維細胞P-P38蛋白表達水平的變化 磷酸化P38(P-P38)蛋白在肺成纖維細胞中存在基礎(chǔ)表達,對照組為(0.581±0.034)；IL-lβ干預(yù)組P-P38蛋白表達為(1.196±0.038),明顯高于對照組(P0.01)；IL-10+IL-lβ聯(lián)合干預(yù)組P-P38蛋白表達為(0.780±0.028),明顯低于IL-1β干預(yù)組(P 0.01),但高于對照組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.01)。 結(jié)論： 1正常的肺成纖維細胞中ICAM-1表達量較低； 2IL-1β可以上調(diào)肺成纖維細胞ICAM-1的表達，使其顯著上升，這種作用可能通過對P38MAPK通路的上調(diào)實現(xiàn)； 3IL-10可能通過抑制IL-1β對P38MAPK的上調(diào)作用而抑制其對肺成纖維細胞ICAM-1的表達的刺激。
【關(guān)鍵詞】：肺成纖維細胞 IL-10 IL-1β ICAM-1 P38MAPK
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-20
• 結(jié)果20-21
• 附圖21-22
• 附表22-23
• 討論23-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻28-33
• 綜述 白細胞介素－10 與呼吸系統(tǒng)疾病33-49
• 參考文獻41-49
• 致謝49-50
• 個人簡歷50

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1 鄧小玲;許銘炎;傅玉才;;探討肺纖維化時表達單核細胞趨化蛋白-1的主要效應(yīng)細胞[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年07期

2 程真順;王佐兵;楊炯;葉燕青;;肥大細胞對肺成纖維細胞生長及膠原合成的影響[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

3 趙彪;杜欣穎;王蘇;侯煒;;射線對肺成纖維細胞影響的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年09期

4 楊汀;王辰;龐寶森;代華平;何培英;;透明質(zhì)酸對人胚胎肺成纖維細胞膠原凝膠的作用及其途徑[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年04期

5 王穎;萬躍;譚兵;蔣勇;白玉;吳永忠;;霉酚酸酯抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β在肺成纖維細胞中的表達及應(yīng)用價值[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年13期

6 莫平征;葉燕青;韓曉;;泛素-蛋白酶體抑制劑對大鼠肺成纖維細胞凋亡和增殖的影響[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年05期

7 崔恩海;華鋒;林勇;;缺氧對肺成纖維細胞表達結(jié)締組織生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的影響[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2007年04期

8 楊汀;王辰;龐寶森;代華平;何培英;;透明質(zhì)酸對大鼠肺泡巨噬細胞和肺成纖維細胞分泌蛋白酶的影響[J];中國病理生理雜志;2009年03期

9 趙洪文,呂長俊,侯顯明,于潤江;肺纖維化的肺成纖維細胞生物學(xué)特征的實驗研究[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1997年04期

10 吳浩,許祖德,張月娥,張錦生,陳琦;血小板源性生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子-β_1對大鼠肺成纖維細胞整合素α_5β_1表達的影響[J];上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1998年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 程真順;楊炯;葉燕青;;肥大細胞通過細胞緊密接觸影響肺成纖維細胞的增殖、轉(zhuǎn)化[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

2 李婷;李旭;余常輝;李維;陳燕;蔡紹曦;孟瑩;;血管緊張素Ⅱ?qū)υ纬衫w維細胞遷移和纖維化相關(guān)因子表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

3 丁輝;周鳳秋;蔡后榮;周乙華;孟凡青;;轉(zhuǎn)換生長因子-β1對肺成纖維細胞窖蛋白-1與細胞外基質(zhì)表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 陳曉紅;曹智臻;楊子峰;Lily L;鐘南山;;二丙酸倍氯米松與布地奈德對白細胞介素-13激活肺成纖維細胞的影響[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

5 孫麗;宋良文;;中國人γ-IFN對放射所致人肺成纖維細胞異常增殖的抑制作用[A];第六屆全國生物醫(yī)學(xué)體視學(xué)學(xué)術(shù)會議暨第九屆全軍軍事病理學(xué)學(xué)術(shù)會議、第五屆全軍定量病理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 陳曉紅;;IL-13刺激肺成纖維細胞及布地奈德的干預(yù)效應(yīng)[A];轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研討會論文集[C];2010年

7 陳曉紅;李怡然;;糖皮質(zhì)激素對IL—13刺激肺成纖維細胞的影響[A];全國第十二屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

8 丁輝;曹敏;蔡后榮;;CSD肽對肺成纖維細胞的細胞外基質(zhì)表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

9 劉乾;陳琦;蔣濤;王震;閆明霞;許祖德;;瞬時轉(zhuǎn)染SARS-Cov M基因?qū)Υ笫蠓纬衫w維細胞生長及功能的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2005年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

10 王菲菲;鄭燦軍;郭新彪;;沙塵與非沙塵PM_(2.5)對人肺成纖維細胞縫隙連接通訊的影響[A];中國毒理學(xué)會第四屆全國學(xué)術(shù)會議論文（摘要）集[C];2005年

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1 肖偉;特發(fā)性肺纖維化的藥物治療[N];中國醫(yī)藥報;2008年

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1 程義局;粘著斑激酶通過整合素β1對肺成纖維細胞遷移的影響機制[D];蘇州大學(xué);2016年

2 皋源;脂多糖誘導(dǎo)肺成纖維細胞表型轉(zhuǎn)變及異常增殖的機制研究[D];蘇州大學(xué);2013年

3 郝淑玲;腎上腺髓質(zhì)素及其受體在肺成纖維細胞中的表達及抗纖維化作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 Muhammad Zaffar Hashmi;多氯聯(lián)苯對人肺成纖維細胞的雙相劑量效應(yīng)研究[D];浙江大學(xué);2015年

5 周生余;凝血酶促人肺成纖維細胞增殖及其機制的研究[D];山東大學(xué);2011年

6 張靜;COPD人肺成纖維細胞IL-6、IL-8、彈性蛋白的生成及其炎癥調(diào)節(jié)的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

7 劉丹;胰島素樣生長因子系統(tǒng)在CLD中的作用及其機制的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

8 郭子建;MEKK2參與和調(diào)制T淋巴細胞受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及皮質(zhì)激素對人肺成纖維細胞MAPK的作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

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1 劉亮;百草枯對肺成纖維細胞過氧化損傷影響及5-氨基水楊酸干預(yù)作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 朱玉鳳;外源性硫化氫對TGF-β_1誘導(dǎo)人胚肺成纖維細胞轉(zhuǎn)化的影響及其可能機制[D];南華大學(xué);2015年

3 張曉月;HCMV對人肺成纖維細胞致纖維化介質(zhì)表達、上皮細胞A549轉(zhuǎn)分化的影響及有關(guān)信號機制[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2015年

4 李達根;JNK和Akt細胞內(nèi)信號通路調(diào)控TNF-α誘導(dǎo)人肺成纖維細胞表達IL-32:肺臟炎癥反應(yīng)的一種潛在機制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 曹述任;泛素—蛋白酶體抑制劑MG132對TGF-β1誘導(dǎo)人肺成纖維細胞活化的影響及分子機制研究[D];暨南大學(xué);2015年

6 丁浩;鼠肺成纖維細胞在細胞外基質(zhì)支架中生長特性的實驗研究[D];江蘇大學(xué);2009年

7 趙彪;養(yǎng)陰清肺方對鈷60照射后肺成纖維細胞影響的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

8 張亞娟;β-catenin蛋白敲除對肺成纖維細胞活性影響的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

9 于芳;血管活性腸肽對巨噬細胞和成纖維細胞在肺損傷修復(fù)中的作用探討[D];中南大學(xué);2008年

10 解宏權(quán);Rho-Rock在肺成纖維細胞—肌成纖維細胞表型轉(zhuǎn)化中的作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

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