特發(fā)性肺纖維化是一種慢性且不可逆的致命性肺部疾病。IPF的主要病理特征為纖維灶的形成,細胞外基質(zhì)沉積以及肺泡結(jié)構(gòu)破壞,導致病人呼吸衰竭死亡。IPF多發(fā)于中老年群體中,預后差,患者的五年生存率低于30%,生存期中位數(shù)只有三年。因為病因不明,所以缺乏針對IPF的有效治療手段,關(guān)于IPF發(fā)病機制的研究一直是基礎(chǔ)研究的難點和熱點。因此,探究IPF的發(fā)病機制具有重要的意義。普遍認為,肺纖維化是由異常的損傷修復造成的,巨噬細胞作為一種可塑性極強的免疫細胞,可以通過自身活化在肺纖維化發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用。在不同的刺激下,巨噬細胞可以活化成為兩種亞型,即經(jīng)典活化型(Classically activated macrophage,M1)和替代活化型(Alternatively activated macrophage,M2),M1型的巨噬細胞自身可以分泌各種炎癥因子,包括TNFα,IL-1β,IL-6等加劇炎性環(huán)境,M2型的巨噬細胞能夠抑制炎癥反應,促進成纖維細胞分化為肌成纖維細胞,促進組織的修復過程。Neddylation是一類新型蛋白質(zhì)翻譯后修飾,是由多種蛋白質(zhì)大分子構(gòu)成的具有高維度的、復雜的蛋...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
1. 引言
2. 材料和試劑
    2.1 主要儀器
    2.2 主要試劑耗材
    2.3 實驗室用小鼠,細胞和質(zhì)粒
    2.4 試劑配置
3. 實驗方法
    3.1 小鼠基因型鑒定
    3.2 質(zhì)粒提取
    3.3 免疫印跡實驗(Western blot)
    3.4 實時熒光定量PCR (qPCR)
    3.5 小鼠肺纖維化模型建立
    3.6 小鼠幾丁質(zhì)模型建立
    3.7 提取并誘導小鼠骨髓巨噬細胞(BMDM)
    3.8 流式細胞術(shù)
    3.9 細菌吞噬實驗
    3.10 細胞免疫熒光
    3.11 免疫共沉淀
    3.12 組織切片HE染色
    3.13 免疫組化染色
    3.14 BCA法測蛋白濃度
    3.15 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞
    3.16 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞
4. 實驗結(jié)果
    4.1 Ubc12在IPF肺組織中高表達
    4.2 Neddylation參與巨噬細胞M2活化過程
    4.3 巨噬細胞Ubc12敲除小鼠構(gòu)建成功
    4.4 巨噬細胞中Ubc12敲除促進幾丁質(zhì)誘導的M2活化
    4.5 Ubc12敲除對巨噬細胞的吞噬能力沒有顯著影響
    4.6 Ubc12敲除加重博來霉素誘導的肺纖維化
    4.7 Ubc12參與調(diào)控IL-4介導的AKT信號通路
    4.8 SHP2和Nedd8,Cul1存在相互作用
5. 討論
6. 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡歷



本文編號：3929317