硒代蛋氨酸對哮喘大鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞因子水平的影響
本文關(guān)鍵詞:硒代蛋氨酸對哮喘大鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞因子水平的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的哮喘是一種由多種細(xì)胞及細(xì)胞組分參與的慢性氣道炎癥反應(yīng)性疾病,免疫調(diào)節(jié)在哮喘發(fā)病過程中有重要作用,硒代蛋氨酸在免疫調(diào)節(jié)中的作用越來越受到重視,本實(shí)驗(yàn)通過硒代蛋氨酸對哮喘大鼠模型進(jìn)行干預(yù),比較各組大鼠肺泡灌洗液中白介素4(interleukin-4,IL-4)和干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)含量、細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類,肺組織中細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達(dá),探討硒代蛋氨酸在哮喘大鼠的抗炎作用及其可能機(jī)制。方法按隨機(jī)分組的原則,將50只SPF級雄性大鼠隨機(jī)分為5組,每組10只:分別為模型組、對照組、地塞米松組、硒代蛋氨酸低劑量組和高劑量組;(1)模型組:在第1、8、15天分別給大鼠1ml致敏液(含卵清蛋白1mg、氫氧化鋁100mg)腹腔注射致敏。從第16天開始將已致敏大鼠放在自制霧化箱內(nèi),每天30分鐘,連續(xù)7天予1%卵清蛋白霧化激發(fā),如大鼠表現(xiàn)為撓鼻、咳嗽、腹肌痙攣、反應(yīng)遲鈍、二便失禁等,表明造模成功。(2)對照組:致敏和激發(fā)均用生理鹽水代替。(3)地塞米松組:在每日激發(fā)前30分鐘給大鼠腹腔注射1mg/kg地塞米松。(4)硒代蛋氨酸低、高劑量組:在每日激發(fā)前30分鐘給分別給大鼠腹腔注射0.1mg/kg、2.5 mg/kg的硒代蛋氨酸。在最后一次激發(fā)后的24小時(shí)內(nèi)將大鼠處死,收集肺泡灌洗液(BALF)和肺組織,分別分離細(xì)胞沉淀、上清,并制成標(biāo)本切片。運(yùn)用ELISA方法對BALF上清液IL-4、IFN-γ水平進(jìn)行測定。運(yùn)用改良牛氏計(jì)數(shù)臺對BALF沉淀細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并將沉淀細(xì)胞涂片染色后進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。運(yùn)用免疫組化方法對大鼠肺組織中細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)的表達(dá)進(jìn)行測定。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果1.與哮喘組比較,地塞米松組及硒代蛋氨酸低、高劑量組大鼠BALF中IL-4含量均明顯降低(P0.05);與正常對照組比較,余各組大鼠BALF中IL-4含量均明顯升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高劑量組比較,兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.與哮喘組比較,地塞米松組及硒代蛋氨酸低、高劑量組大鼠BALF中IFN-γ含量明顯升高(P0.05);與正常對照組比較,余各組大鼠BALF中IFN-γ含量均明顯升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高劑量組比較,兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.與哮喘組比較,地塞米松組及硒代蛋氨酸低、高劑量組大鼠BALF中細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯下降(P0.05);與正常對照組比較,余各組大鼠BALF中細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高劑量組比較,兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.與哮喘組比較,地塞米松組及硒代蛋氨酸低、高劑量組大鼠肺組織ICAM-1表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與正常對照組比較,余各組大鼠肺組織ICAM-1表達(dá)明顯升高(P0.05);硒代蛋氨酸低、高劑量組比較,兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論硒代蛋氨酸和地塞米松均能使哮喘大鼠BALF中IL-4的含量降低、IFN-γ的含量增加,肺組織中ICAM-1的表達(dá)降低,減少氣道炎癥細(xì)胞浸潤,減輕哮喘氣道炎癥反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】:硒代蛋氨酸 哮喘 IL-4 IFN-γ ICAM-1 大鼠
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R562.25
【目錄】:
- 英文縮寫一覽表6-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-12
- 1 前言12-13
- 2 實(shí)驗(yàn)材料13-15
- 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
- 2.2 藥物和試劑制備13-14
- 2.3 主要設(shè)備和儀器14-15
- 3 實(shí)驗(yàn)方法15-21
- 3.1 實(shí)驗(yàn)分組15
- 3.2 SD大鼠哮喘模型建立15-16
- 3.3 標(biāo)本的留取與保存16
- 3.4 采用 ELISA 方法測 BALF 上清中 IL-4 含量16-17
- 3.5 采用 ELISA 方法測 BALF 上清中 IFN-γ 含量17-18
- 3.6 大鼠BALF細(xì)胞沉淀的計(jì)數(shù)與分類18-19
- 3.7 制作肺組織石蠟切片19-20
- 3.8 肺組織中 ICAM-1 的測定20-21
- 3.9 統(tǒng)計(jì)分析方法21
- 4 結(jié)果21-27
- 4.1 大鼠BALF上清中IL-4 含量比較21-22
- 4.2 大鼠BALF上清中IFN-γ 含量的比較22-23
- 4.3 大鼠BALF細(xì)胞沉淀分類與計(jì)數(shù)23-24
- 4.4 大鼠肺組織中ICAM-1 的表達(dá)24-27
- 5 討論27-31
- 6 結(jié)論31-32
- 參考文獻(xiàn)32-37
- 附錄37-38
- 致謝38-39
- 綜述39-48
- 參考文獻(xiàn)45-48
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,本文編號:389402
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