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重組腺相關(guān)病毒載體抑制哮喘大鼠T淋巴細(xì)胞表達(dá)白介素5

發(fā)布時(shí)間:2023-06-05 03:23
  第一部分IL-5反義寡核苷酸對(duì)哮喘大鼠CD4+T淋巴細(xì)胞IL-5mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的影響 目的 探討不同序列的IL-5反義寡核苷酸對(duì)哮喘大鼠CD4+T淋巴細(xì)胞IL-5mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。 方法 采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),將不同的反義寡核苷酸(AS-1:反翻譯起始部位、AS-2:反外顯子-2、AS-3:反翻譯終止部位)和空白對(duì)照導(dǎo)入經(jīng)密度梯皮法、免疫磁珠法分離的哮喘大鼠CD4+T淋巴細(xì)胞,細(xì)胞接種于6孔板,4小時(shí)后加入刀豆蛋白A(ConA),培養(yǎng)28小時(shí)后,用ELISA和半定量RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-5和細(xì)胞內(nèi)IL-5mRNA的水平。 結(jié)果 (1)相對(duì)吸光度比值A(chǔ)(IL-5/β-actin)AS-1組為0.4259±0.0468、AS-2組為0.4330±0.0847、AS-3組為0.4710±0.0823,明顯低于對(duì)照組1.0288±0.1233(P<0.01),但反義各組之間差異無(wú)顯著性意義(P>0.05); (2)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-5的含量為AS-1組5.3063±0.6151(pg/ml)、A...

【文章頁(yè)數(shù)】:92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
縮略語(yǔ)
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分:IL-5反義寡核苷酸對(duì)哮喘大鼠CD4+T淋巴細(xì)胞IL-5 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的影響制
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分:反義IL-5重組腺相關(guān)病毒真核表達(dá)載體質(zhì)粒pasIL-5/rAAV的構(gòu)建和轉(zhuǎn)染
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分:重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的反義IL-5載體構(gòu)建及其對(duì)哮喘大鼠CD4+T淋巴細(xì)胞IL-5mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
小結(jié)與展望
綜述
    白介素5和支氣管哮喘
    哮喘的基因治療
附錄
    攻讀博士學(xué)位期間論文發(fā)表情況
致謝



本文編號(hào):3831589

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