本文關(guān)鍵詞：哮喘大鼠差異表達(dá)基因篩選及柴樸湯的干預(yù)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 利用基因芯片技術(shù)篩選哮喘大鼠及應(yīng)用柴樸湯干預(yù)治療后不同時(shí)段肺組織中異常表達(dá)的基因，闡明哮喘的發(fā)病機(jī)制及柴樸湯作用的靶基因。 方法 健康SD大鼠(體重150~200g)42只，，隨機(jī)表隨機(jī)分為正常對照組與哮喘模型組及柴樸湯干預(yù)組。用卵蛋白（OVA）致敏激發(fā)建立大鼠哮喘模型。分別于2、4、8周處死大鼠收集肺泡灌洗液行炎性細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，取肺組織行HE染色、病理圖像分析，提取肺組織RNA行基因芯片篩選，以基因表達(dá)倍數(shù)值2.0和基因表達(dá)倍數(shù)值－2.0為閾值來確定差異表達(dá)基因，然后用GO及Pathway分析對差異表達(dá)基因進(jìn)行功能分類分析。并對基因芯片結(jié)果進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證。 結(jié)果 1.各組大鼠肺泡灌洗液中炎性細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 對照組肺泡灌洗液中炎性細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)均明顯低于哮喘模型組，差異有顯著性（P 0.01）；隨著激發(fā)時(shí)間的延長，哮喘模型組及柴樸湯干預(yù)組中炎性細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)逐漸增加，差異有顯著性（P 0.01）；炎性細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)在柴樸湯干預(yù)組中比哮喘模型組中均有所減少，差異有顯著性（P 0.01）。 2.哮喘大鼠氣道重塑的改變 大鼠哮喘激發(fā)后二周開始出現(xiàn)支氣管壁周圍有大量炎癥細(xì)胞浸潤,氣道平滑肌增厚,杯狀細(xì)胞增生,伴黏液高分泌,膠原過度沉積，基底膜增厚；哮喘四周組與二周組相比，氣道平滑肌明顯增厚,氣道壁更厚，差異有顯著性（P 0.01）；哮喘八周組與四周組相比，氣道平滑肌明顯增厚,管腔更狹窄，差異有顯著性（P 0.01）。 3.各組大鼠基因芯片篩選及實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證 從24358條表達(dá)基因譜中，篩選出在哮喘疾病的進(jìn)展過程中及柴樸湯的治療過程中持續(xù)性差異表達(dá)2倍以上的基因有13條，它們涉及哮喘的防御反應(yīng)、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)調(diào)節(jié)等功能有關(guān)。其中發(fā)現(xiàn)Mal、TPD52L1等新基因參與哮喘疾病過程。對Mal、TPD52L1基因進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證，結(jié)果顯示這兩個(gè)基因在不同組大鼠標(biāo)本中均有異常表達(dá)，且與基因芯片篩選結(jié)果表達(dá)方向一致，驗(yàn)證了基因芯片結(jié)果。 結(jié)論 1.Mal、TPD52L1基因在肺組織中異常表達(dá)，影響哮喘的病程進(jìn)展。 2.柴樸湯能通過上調(diào)Mal及下調(diào)TPD52L1在肺組織中的表達(dá)，從而減輕哮喘的氣道炎癥和重塑進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：哮喘 基因芯片 柴樸湯 Mal TPD52L1
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 英文縮略語索引4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法12-20
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-39
• 討論39-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 綜述50-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 一、碩士期間發(fā)表論文58
• 二、課題資助情況58-59
• 致謝59

【共引文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：哮喘大鼠差異表達(dá)基因篩選及柴樸湯的干預(yù)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：380099