本文關鍵詞：調節(jié)性樹突狀細胞對哮喘小鼠氣道炎癥及IL-12、IgE分泌的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：樹突狀細胞（dendritic cells，DC）是已知的體內功能最強的抗原遞呈細胞（antigen presenting cells，APC），它可以活化T細胞，啟動免疫應答，還可以調節(jié)免疫應答的反應強度，誘導免疫耐受。我們前期的實驗證實，在肺臟基質細胞的微環(huán)境中，成熟樹突狀細胞（mature dendritic cells，mDC）可被誘導為一種免疫表型為CD11clowIalowCD11bhigh的調節(jié)性樹突狀細胞（DCreg，rDC）。這種rDC缺乏活化T細胞的重要信號（Ia、IL-12p70），，但高分泌可以抑制未成熟DC發(fā)育成熟的Th2型細胞因子IL-10。而且我們發(fā)現(xiàn)，通過MTT檢測，相對于mDC組，這種DCreg誘導同種異體T細胞的增殖能力明顯降低。結合以上DCreg的表型、細胞因子分泌及功能特點，我們推測這種DCreg可以誘導免疫耐受。支氣管哮喘是一種常見的呼吸系統(tǒng)慢性炎性疾病，它由多種細胞組分（包括嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞、中性粒細胞和肥大細胞等）及其炎癥相關因子參與。其發(fā)病機制與效應性T（CD4＋T）細胞活化，并分泌多種細胞因子，導致Th1型和Th2型細胞因子失衡有關。本實驗證實了這種DCreg對哮喘小鼠氣道炎癥的緩解作用及對IL-12、IgE分泌的影響。我們的研究證明，經誘導產生的DCreg對哮喘小鼠氣道炎癥有治療的作用，DCreg應用于哮喘治療具有良好的前景。 研究目的 觀察體外培養(yǎng)的DCreg能否在體內發(fā)揮緩解哮喘小鼠炎癥的作用及對IL-12、IgE分泌的影響，并探討其緩解炎癥的可能機制。 實驗方法 第一部分，調節(jié)性樹突狀細胞（DCreg）的獲得。用體外培養(yǎng)的小鼠肺臟基質細胞（MPSC）的上清液來模擬體內的肺臟基質微環(huán)境。用小鼠重組細胞因子白介素-4(rmIL-4)、重組巨噬細胞粒細胞集落刺激因子(rmGM-CSF)，誘導骨髓造血干細胞（HSC）向DC分化，并用脂多糖（LPS）誘導其成熟，模擬體內的mDC群。將mDC與MPSC上清液共培養(yǎng)一周后，得到一種新型的DC亞群，流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)這是一群表型穩(wěn)定在CDllc~(low)CDIa~(low)CDllb~(high)的調節(jié)性DC。 第二部分，調節(jié)性樹突狀細胞對哮喘小鼠氣道炎癥及IL-12、IgE分泌的影響。除正常組小鼠外，其余各組均誘導哮喘樣癥狀。經卵白蛋白（OVA）的初次致敏、加強致敏及霧化攻擊后，如果小鼠出現(xiàn)呼吸深快，活動減少，頭面部瘙癢，背部弓起、抬高，二便失禁為陽性反應，表明哮喘模型建立成功。 動物分組及rDC的免疫如下：將40只C57小鼠隨機分成四組，每組10只。第一組：正常組，分別在Day0、Day7、Day14，按100μl/只的量腹腔注射磷酸鹽緩沖液(PBS)。第二組：mDC組，分別在Day0、Day7、Day14，按5×10~6/鼠的細胞量腹腔注射mDC。第三組：rDC組，分別在Day0、Day7、Day14，按5×10~6/鼠的細胞量腹腔注射rDC。第四組：OVA組，未做處理的哮喘組。末次激發(fā)的24h后，經小鼠眼球采血。利用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法測定血清的IL-12及IgE水平。常規(guī)留取小鼠右肺中葉，經蘇木素-伊紅（HE）染色后行病理學觀察。利用ELISA法測定支氣管肺泡灌洗液(BALF)中IL-12的分泌水平。并對BALF行白細胞計數(shù)并將細胞分為巨噬細胞，淋巴細胞，中性粒和嗜酸性粒細胞。 結果 通過研究發(fā)現(xiàn)，體內回輸調節(jié)性DC能有效地抑制小鼠肺泡灌洗液和肺實質中的中性細胞及嗜酸性粒細胞的浸潤，BALF和血清中IL-12的分泌均增多，血清IgE分泌下降。而回輸成熟DC的小鼠上述指標與OVA組小鼠無明顯差異。 結論 體外培養(yǎng)的肺臟基質細胞的上清液可誘導成熟DC分化成為一群具有免疫抑制功能的調節(jié)性DC。其不但在體外可以抑制T細胞的增殖，過繼回輸哮喘小鼠體內，上調肺泡灌洗液和血清中IL-12的表達，下調血清IgE的表達，糾正哮喘小鼠細胞因子的失衡，緩解T細胞介導的氣道過敏性炎癥反應。
【關鍵詞】：肺臟基質細胞 調節(jié)性樹突狀細胞 免疫耐受 過敏性哮喘 IL-12
【學位授予單位】：泰山醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 符號說明9-10
• 前言10-13
• 第一部分13-26
• 材料與方法14-21
• 結果21-23
• 討論23-26
• 第二部分26-38
• 材料與方法28-32
• 結果32-34
• 討論34-38
• 結論38-39
• 附圖39-44
• 參考文獻44-47
• 綜述47-55
• 參考文獻51-55
• 致謝55-56
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 王耀麗;錢桂生;李樹鈞;程曉明;;肺臟樹突狀細胞表面共刺激分子在小鼠哮喘模型中的表達[J];免疫學雜志;2007年02期

2 劉超;孫宗全;陳家軍;蘇剛;史嘉瑋;劉金平;鄧勇志;;負載滋養(yǎng)層細胞抗原對小鼠樹突狀細胞表型及功能的影響[J];免疫學雜志;2008年01期

3 何浩;宋文剛;;調節(jié)性DC與調節(jié)性T細胞的相互作用[J];免疫學雜志;2010年06期

4 田秀君;史娟;烏姍娜;趙高潮;谷俊朝;;腫瘤調節(jié)性T細胞與腫瘤免疫[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2010年11期

5 朱蓉;白沖;;樹突狀細胞與支氣管哮喘研究進展[J];中華哮喘雜志(電子版);2009年01期

  本文關鍵詞：調節(jié)性樹突狀細胞對哮喘小鼠氣道炎癥及IL-12、IgE分泌的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：378766