香煙煙霧誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺組織中Derlin-1的表達(dá)
本文關(guān)鍵詞:香煙煙霧誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺組織中Derlin-1的表達(dá),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:初步研究香煙煙霧誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺組織中Derlin-1的表達(dá)。 方法:研究分動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn)兩部分 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:采用本實(shí)驗(yàn)室復(fù)制的香煙煙霧誘導(dǎo)的大鼠COPD模型標(biāo)本,動(dòng)物分為4個(gè)組,分別為對(duì)照組、吸煙2個(gè)月組、吸煙4個(gè)月組和戒煙組(吸煙4個(gè)月然后戒煙1個(gè)月),收集對(duì)照組和各實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織標(biāo)本,采用逆轉(zhuǎn)錄-PCR(RT-PCR)方法檢測(cè)Derlin-1mRNA表達(dá)水平,并采用Western-blot、免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Derlin-1蛋白質(zhì)表達(dá)水平。 2.采用本實(shí)驗(yàn)室保存的分離大鼠AECII細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)并傳代至第三代用于實(shí)驗(yàn),用10%CSE對(duì)AECII細(xì)胞分別處理0h、3h、6h、12h、24h、48h并收集細(xì)胞采用RT-PCR、Western blot技術(shù)檢測(cè)Derlin-1的表達(dá)。 結(jié)果: 1.動(dòng)物試驗(yàn)部分結(jié)果 (1)肺組織病理學(xué)結(jié)果:大鼠肺組織結(jié)構(gòu)在對(duì)照組大致正常;2個(gè)月吸煙組大鼠肺結(jié)構(gòu)出現(xiàn)紊亂現(xiàn)象,部分肺泡結(jié)構(gòu)破裂;吸煙4個(gè)月組大鼠肺結(jié)構(gòu)紊亂現(xiàn)象更加明顯,肺泡壁破裂較重,肺泡腔擴(kuò)大;戒煙組大鼠肺泡的破壞有所緩解,但與吸煙4個(gè)月組無(wú)顯著改變。 (2)免疫組化結(jié)果顯示Derlin-1主要定位于肺泡上皮細(xì)胞,,血管內(nèi)皮細(xì)胞,支氣管上皮細(xì)胞的胞漿中,在吸煙2個(gè)月大鼠表達(dá)最高,戒煙組大鼠次之,吸煙4個(gè)月組表達(dá)較戒煙組大鼠明顯降低,而對(duì)照組表達(dá)最低,P均0.05。RT-PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果與免疫組化一致。 2細(xì)胞試驗(yàn)部分結(jié)果 (1)Western blot結(jié)果顯示:在AECII中,用10%CSE作用不同時(shí)間Derlin-1蛋白的表達(dá):Derlin-1的表達(dá)隨著CSE暴露時(shí)間的延長(zhǎng)呈先遞增后逐漸下降的趨勢(shì),在6h組達(dá)到高峰。隨后逐漸降低但仍高于對(duì)照組水平。RT-PCR的結(jié)果與Western blot結(jié)果一致。 結(jié)論: 1.隨著香煙煙霧暴露時(shí)間的延長(zhǎng),肺組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解蛋白Derlin-1的表達(dá)呈規(guī)律改變。 2. Derlin-1可能參與慢性阻塞性肺疾病的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】:香煙煙霧提取物 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性降解 Derlin-1 慢性阻塞性肺疾病
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R563.9
【目錄】:
- 主要縮略詞4-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 前言10-12
- 材料與方法12-20
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-22
- 討論22-25
- 結(jié)論25-26
- 參考文獻(xiàn)26-31
- 附圖31-34
- 綜述34-43
- 參考文獻(xiàn)38-43
- 碩士期間撰寫(xiě)論文43-44
- 致謝44
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本文關(guān)鍵詞:香煙煙霧誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺組織中Derlin-1的表達(dá),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):355777
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