發(fā)布時(shí)間：2021-10-24 05:58

　　目的探討栓鏈因子復(fù)合物亞基Sec3對(duì)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（NE）誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞黏蛋白（MUC）分泌的影響。方法體外培養(yǎng)人氣道上皮細(xì)胞16HBE,隨機(jī)分為8組:空白對(duì)照組、表皮生長因子受體（EGFR）磷酸化抑制劑AG1487組、Sec3siRNA組、陰性siRNA對(duì)照組、NE組、NE+AG1478、NE+Sec3siRNA組、NE+陰性siRNA組。采用Western blot法檢測(cè)Sec3蛋白及pEGFR的相對(duì)含量;ELISA、RT-PCR法分析細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MUC5AC的相對(duì)含量及細(xì)胞中MUC5AC mRNA水平。結(jié)果 Sec3siRNA轉(zhuǎn)染顯著降低Sec3蛋白表達(dá),提示轉(zhuǎn)染成功,且加入NE對(duì)轉(zhuǎn)染效果無干擾。單純NE刺激組上清液中MUC5AC含量,細(xì)胞中MUC5AC mRNA、pEGFR水平顯著高于空白對(duì)照組（P<0.01）,AG1487可明顯抑制上述刺激作用;轉(zhuǎn)染Sec3siRNA可阻斷MUC5AC分泌（P<0.01）,但并不影響其轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)（P>0.05）。結(jié)論在NE誘導(dǎo)的人氣道上皮黏液高分泌過程中,栓鏈因子復(fù)合物亞基Sec3對(duì)黏蛋白出胞有重要的介導(dǎo)作用... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014,43(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞的培養(yǎng)及處理
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的活力
    1.5 Western blot分析pEGFR、Sec3蛋白含量
    1.6 ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中MUC5AC蛋白含量
    1.7 RT-PCR檢測(cè)MUC5AC mRNA水平
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 各組細(xì)胞增殖的變化
    2.2 轉(zhuǎn)染細(xì)胞的Sec3表達(dá)及pEGFR水平測(cè)定
    2.3 NE、AG1487、Sec3siRNA對(duì)MUC5AC蛋白轉(zhuǎn)錄及分泌水平的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]依賴Ca2+的ATP過量釋放在機(jī)械牽張所致氣道上皮黏蛋白5AC高分泌中的作用[J]. 蘇暉暉,尤列·皮爾曼,維克多·科羅索夫,周向東.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(01)
[2]血紅素加氧酶-1對(duì)人氣道黏液高分泌的影響[J]. 雷蕊霞,周向東.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(03)
[3]黏蛋白MUC5AC在慢性阻塞性肺疾病患者氣道中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 賴異,李雯.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(03)



本文編號(hào)：3454717