目的探討栓鏈因子復合物亞基Sec3對中性粒細胞彈性蛋白酶（NE）誘導的氣道上皮細胞黏蛋白（MUC）分泌的影響。方法體外培養(yǎng)人氣道上皮細胞16HBE,隨機分為8組:空白對照組、表皮生長因子受體（EGFR）磷酸化抑制劑AG1487組、Sec3siRNA組、陰性siRNA對照組、NE組、NE+AG1478、NE+Sec3siRNA組、NE+陰性siRNA組。采用Western blot法檢測Sec3蛋白及pEGFR的相對含量;ELISA、RT-PCR法分析細胞培養(yǎng)上清液中MUC5AC的相對含量及細胞中MUC5AC mRNA水平。結果 Sec3siRNA轉染顯著降低Sec3蛋白表達,提示轉染成功,且加入NE對轉染效果無干擾。單純NE刺激組上清液中MUC5AC含量,細胞中MUC5AC mRNA、pEGFR水平顯著高于空白對照組（P<0.01）,AG1487可明顯抑制上述刺激作用;轉染Sec3siRNA可阻斷MUC5AC分泌（P<0.01）,但并不影響其轉錄水平表達（P>0.05）。結論在NE誘導的人氣道上皮黏液高分泌過程中,栓鏈因子復合物亞基Sec3對黏蛋白出胞有重要的介導作用... 

【文章來源】：華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2014,43(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細胞的培養(yǎng)及處理
    1.3 細胞轉染
    1.4 MTT法檢測各組細胞的活力
    1.5 Western blot分析pEGFR、Sec3蛋白含量
    1.6 ELISA法檢測培養(yǎng)上清中MUC5AC蛋白含量
    1.7 RT-PCR檢測MUC5AC mRNA水平
    1.8 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 各組細胞增殖的變化
    2.2 轉染細胞的Sec3表達及pEGFR水平測定
    2.3 NE、AG1487、Sec3siRNA對MUC5AC蛋白轉錄及分泌水平的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]依賴Ca2+的ATP過量釋放在機械牽張所致氣道上皮黏蛋白5AC高分泌中的作用[J]. 蘇暉暉,尤列·皮爾曼,維克多·科羅索夫,周向東.  華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2012(01)
[2]血紅素加氧酶-1對人氣道黏液高分泌的影響[J]. 雷蕊霞,周向東.  華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2010(03)
[3]黏蛋白MUC5AC在慢性阻塞性肺疾病患者氣道中的表達及其臨床意義[J]. 賴異,李雯.  華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2009(03)



本文編號：3454717