CXXC5表達通過CD40/CD40L通路對博來霉素小鼠肺纖維化的影響
發(fā)布時間:2021-10-10 21:11
研究目的:1.明確博來霉素(bleomycin,BLM)誘導肺纖維化小鼠(C57BL)肺組織中CXXC5表達情況及在CD4/CD40L通路中的表達情況。2.探討CXXC5過表達對BLM誘導的C57BL/6小鼠肺纖維化及CD4/CD40L通路的影響。3.探討B(tài)LM誘導的肺纖維化小鼠中,CXXC5是否經(jīng)CD40/CD40L通路來抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)來抑制肺纖維化。研究方法:1.構建含綠色螢光蛋白(Greenfluorescenceprotein,GFP)的CXXC5過表達的腺病毒表達載體。2.分組:隨機將小鼠分為6組:生理鹽水組(M組)、纖維化組(B組)、生理鹽水+Ad-GFP組(M+Ad-GFP組)、生理鹽水+Ad-CXXC5組(N+Ad-CXXC5組)、纖維化+Ad-GFP組(B+Ad-GFP組)、纖維化+Ad-CXXC5組(B+Ad-CXXC5組),構建肺纖維化小鼠模型,并于造模后第7、14、28天脫頸處死小鼠,留取肺組織標本供實驗用。3.肺組織進行HE染色和Masson染色,顯微鏡下觀察纖維化程度,進一步行Ashcroft纖維化評分并測定羥脯氨酸含量。4.對各組小鼠肺組織進...
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 實驗材料
1.實驗試劑
2.實驗儀器
3.實驗動物
第二章 實驗方法及步驟
1.過表達CXXC5 重組腺病毒表達載體的構建
2.纖維化小鼠模型的制備
3.肺泡灌洗液分類、計數(shù)
4.小鼠肺組織HE染色、Masson染色
5.各組小鼠肺組織羥脯氨酸含量測定
6.Western Blot測各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達
7.RT-qPCR測 CXXC5、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達
8.ELISA檢測各組肺組織中CollaI、Colla III的表達
9.統(tǒng)計學方法
第三章 實驗結(jié)果
1 構建CXXC5 過表達的腺病毒載體
2 小鼠肺組織的結(jié)構變化
3 肺泡灌洗液中細胞分類和計數(shù)
4 Western Blot測各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達
5 RT-qPCR測 CXXC5mRNA、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達
6 ELISA檢測各組肺組織中CollaI、Colla III的表達
討論
實驗結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胰高血糖素樣肽-1對博萊霉素誘導的小鼠肺纖維化的作用及機制探討[J]. 劉美,茍思,陳海濤,陳重華. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2017(04)
本文編號:3429161
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 實驗材料
1.實驗試劑
2.實驗儀器
3.實驗動物
第二章 實驗方法及步驟
1.過表達CXXC5 重組腺病毒表達載體的構建
2.纖維化小鼠模型的制備
3.肺泡灌洗液分類、計數(shù)
4.小鼠肺組織HE染色、Masson染色
5.各組小鼠肺組織羥脯氨酸含量測定
6.Western Blot測各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達
7.RT-qPCR測 CXXC5、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達
8.ELISA檢測各組肺組織中CollaI、Colla III的表達
9.統(tǒng)計學方法
第三章 實驗結(jié)果
1 構建CXXC5 過表達的腺病毒載體
2 小鼠肺組織的結(jié)構變化
3 肺泡灌洗液中細胞分類和計數(shù)
4 Western Blot測各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達
5 RT-qPCR測 CXXC5mRNA、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達
6 ELISA檢測各組肺組織中CollaI、Colla III的表達
討論
實驗結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胰高血糖素樣肽-1對博萊霉素誘導的小鼠肺纖維化的作用及機制探討[J]. 劉美,茍思,陳海濤,陳重華. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2017(04)
本文編號:3429161
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