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CXXC5表達(dá)通過(guò)CD40/CD40L通路對(duì)博來(lái)霉素小鼠肺纖維化的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-10-10 21:11
  研究目的:1.明確博來(lái)霉素(bleomycin,BLM)誘導(dǎo)肺纖維化小鼠(C57BL)肺組織中CXXC5表達(dá)情況及在CD4/CD40L通路中的表達(dá)情況。2.探討CXXC5過(guò)表達(dá)對(duì)BLM誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠肺纖維化及CD4/CD40L通路的影響。3.探討B(tài)LM誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠中,CXXC5是否經(jīng)CD40/CD40L通路來(lái)抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)來(lái)抑制肺纖維化。研究方法:1.構(gòu)建含綠色螢光蛋白(Greenfluorescenceprotein,GFP)的CXXC5過(guò)表達(dá)的腺病毒表達(dá)載體。2.分組:隨機(jī)將小鼠分為6組:生理鹽水組(M組)、纖維化組(B組)、生理鹽水+Ad-GFP組(M+Ad-GFP組)、生理鹽水+Ad-CXXC5組(N+Ad-CXXC5組)、纖維化+Ad-GFP組(B+Ad-GFP組)、纖維化+Ad-CXXC5組(B+Ad-CXXC5組),構(gòu)建肺纖維化小鼠模型,并于造模后第7、14、28天脫頸處死小鼠,留取肺組織標(biāo)本供實(shí)驗(yàn)用。3.肺組織進(jìn)行HE染色和Masson染色,顯微鏡下觀察纖維化程度,進(jìn)一步行Ashcroft纖維化評(píng)分并測(cè)定羥脯氨酸含量。4.對(duì)各組小鼠肺組織進(jìn)... 

【文章來(lái)源】:青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料
    1.實(shí)驗(yàn)試劑
    2.實(shí)驗(yàn)儀器
    3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
第二章 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
    1.過(guò)表達(dá)CXXC5 重組腺病毒表達(dá)載體的構(gòu)建
    2.纖維化小鼠模型的制備
    3.肺泡灌洗液分類、計(jì)數(shù)
    4.小鼠肺組織HE染色、Masson染色
    5.各組小鼠肺組織羥脯氨酸含量測(cè)定
    6.Western Blot測(cè)各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達(dá)
    7.RT-qPCR測(cè) CXXC5、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達(dá)
    8.ELISA檢測(cè)各組肺組織中CollaI、Colla III的表達(dá)
    9.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 構(gòu)建CXXC5 過(guò)表達(dá)的腺病毒載體
    2 小鼠肺組織的結(jié)構(gòu)變化
    3 肺泡灌洗液中細(xì)胞分類和計(jì)數(shù)
    4 Western Blot測(cè)各組肺組織CXXC5、CD40、CD40L、Fibronectin、Keratin-14的表達(dá)
    5 RT-qPCR測(cè) CXXC5mRNA、CollaImRNA、CollaIIImRNA表達(dá)
    6 ELISA檢測(cè)各組肺組織中CollaI、Colla III的表達(dá)
討論
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胰高血糖素樣肽-1對(duì)博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化的作用及機(jī)制探討[J]. 劉美,茍思,陳海濤,陳重華.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(04)



本文編號(hào):3429161

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