隨著人口老年化、腫瘤發(fā)病率升高、ICU患者的增多、免疫抑制藥物的廣泛使用,侵襲性真菌肺炎（invasive fungal pneumonia,IFP）的發(fā)病率逐漸升高。念珠菌是引起真菌性肺炎最常見的病原菌。然而各種真菌性肺炎患者的臨床特征均可以表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、喘息等而沒有特異性,影像學(xué)也無法區(qū)分出是何種病原菌造成的真菌性肺炎。確診念珠菌性肺炎需要無菌體液和組織病理學(xué),然而真菌性肺炎患者通常一般情況差,難以行有創(chuàng)檢查獲得病理組織,痰液及支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）等標(biāo)本相對(duì)容易獲得,但檢驗(yàn)結(jié)果無法確定是感染還是定植,且診斷時(shí)間均較長(zhǎng)。因此,現(xiàn)有檢測(cè)方法無法滿足臨床對(duì)于真菌性肺炎的診斷需求。測(cè)定血或者肺泡灌洗液中的1,3-β-D-葡聚糖是目前比較常用的真菌性肺炎快速檢測(cè)方法,但1,3-β-D-葡聚糖也存在于曲霉菌中,檢測(cè)其并不能區(qū)分是何種類型的真菌感染。念珠菌特異性抗體、特異性抗原檢測(cè)是值得探索的檢測(cè)方法,但目前很少有用于臨床的研究。膠體金免疫層析（colloidal gold immunochromatograhic assay... 

【文章來源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

膠體金免疫層析法檢測(cè)白色念珠菌抗原試劑實(shí)驗(yàn)原理示意圖

軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第12頁(yè)圖2白色念珠菌抗體蛋白含量圖3QuantityOne4.5掃描分析白色念珠菌抗體純度1.2.4膠體金的制備膠體金是氯金酸的水溶液，在堿性環(huán)境中帶有負(fù)電荷可與蛋白等大分子因靜電而形成非公價(jià)結(jié)合。膠體金有多種制備方法，其中檸檬酸三鈉法制備得到的膠體金溶液儲(chǔ)存穩(wěn)定性好，本研究采用的是檸檬酸三鈉法制備膠體金。①精確稱取氯金酸1.5g，加入三蒸水150ml溶解，使用0.22μm的微孔膜進(jìn)行過濾，配置成0.01%的水溶液，倒入一個(gè)清潔硅化燒瓶中，將燒瓶放在磁力攪拌加熱器上，在旋轉(zhuǎn)狀態(tài)下，小火加熱15分鐘。②在磁轉(zhuǎn)子的攪拌下用移液器吸取1.5ml的1%檸檬酸三鈉水溶液加入硅化燒瓶中，液體的顏色由金色變?yōu)榱良t色，提示著膠體金顆粒分散形成。③繼續(xù)煮10分鐘，達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)，溶液逐漸穩(wěn)定成透明的葡萄酒樣紅色，關(guān)掉加熱旋鈕。放在28℃溫度下冷卻，即為25nm大小的膠體金顆粒。倒入玻璃瓶中密封，放置在4℃的冰箱中備用。1.2.5膠體金標(biāo)記白色念珠菌抗體的最佳pH膠體金與白色念珠菌抗體結(jié)合受PH的影響。一個(gè)膠體金顆粒會(huì)結(jié)合多個(gè)白色

軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第12頁(yè)圖2白色念珠菌抗體蛋白含量圖3QuantityOne4.5掃描分析白色念珠菌抗體純度1.2.4膠體金的制備膠體金是氯金酸的水溶液，在堿性環(huán)境中帶有負(fù)電荷可與蛋白等大分子因靜電而形成非公價(jià)結(jié)合。膠體金有多種制備方法，其中檸檬酸三鈉法制備得到的膠體金溶液儲(chǔ)存穩(wěn)定性好，本研究采用的是檸檬酸三鈉法制備膠體金。①精確稱取氯金酸1.5g，加入三蒸水150ml溶解，使用0.22μm的微孔膜進(jìn)行過濾，配置成0.01%的水溶液，倒入一個(gè)清潔硅化燒瓶中，將燒瓶放在磁力攪拌加熱器上，在旋轉(zhuǎn)狀態(tài)下，小火加熱15分鐘。②在磁轉(zhuǎn)子的攪拌下用移液器吸取1.5ml的1%檸檬酸三鈉水溶液加入硅化燒瓶中，液體的顏色由金色變?yōu)榱良t色，提示著膠體金顆粒分散形成。③繼續(xù)煮10分鐘，達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)，溶液逐漸穩(wěn)定成透明的葡萄酒樣紅色，關(guān)掉加熱旋鈕。放在28℃溫度下冷卻，即為25nm大小的膠體金顆粒。倒入玻璃瓶中密封，放置在4℃的冰箱中備用。1.2.5膠體金標(biāo)記白色念珠菌抗體的最佳pH膠體金與白色念珠菌抗體結(jié)合受PH的影響。一個(gè)膠體金顆粒會(huì)結(jié)合多個(gè)白色

【參考文獻(xiàn)】：
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