硫化氫對(duì)蝮蛇毒致大鼠急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響及可能機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2017-04-30 13:04
本文關(guān)鍵詞:硫化氫對(duì)蝮蛇毒致大鼠急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響及可能機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的 通過(guò)觀察增減機(jī)體內(nèi)H2S的含量對(duì)蝮蛇毒致SD大鼠急性肺損傷時(shí)肺組織細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)通路蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3表達(dá)的影響,探討H2S/CSE體系對(duì)蝮蛇毒致急性肺損傷時(shí)肺組織細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。 方法 健康清潔級(jí)SD(sprague-dawley)雄性大鼠36只,采用完全隨機(jī)分組法分6組,每組6只:生理鹽水空白對(duì)照組(N組,注射用生理鹽水2ml/kg),蛇毒組(C組,蛇毒1.50mg/kg),蛇毒+低劑量NaHS組(L組,蛇毒1.50mg/kg+NaHS0.78mg/kg),蛇毒+中劑量NaHS組(M組,蛇毒1.50mg/kg+NaHS1.56mg/kg),蛇毒+高劑量NaHS組(H組,蛇毒1.50mg/kg+NaHS3.12mg/kg),蛇毒+PPG組(P組,蛇毒1.50mg/kg+PPG30mg/kg)。按照實(shí)驗(yàn)分組分別予以腹腔內(nèi)注射生理鹽水及腹蛇毒素,3小時(shí)后按分組分別腹腔內(nèi)注射N(xiāo)aHS及PPG。于注射蝮蛇毒素6小時(shí)后處死大鼠,采集肺組織標(biāo)本。病理切片HE染色光鏡下評(píng)估肺組織病理學(xué)變化并進(jìn)行肺損傷病理評(píng)分,流式細(xì)胞術(shù)測(cè)各組肺組織細(xì)胞凋亡率,免疫組織化學(xué)法測(cè)Bcl-2和Bax蛋白分布和表達(dá),,免疫印跡法測(cè)Caspase-9和Caspase-3蛋白表達(dá)。 結(jié)果 1.肺組織病理學(xué)改變 (1)大體觀:N組肺組織顏色呈淡粉紅色,表面光滑,無(wú)出血點(diǎn),無(wú)水腫。C組可見(jiàn)肺組織明顯充血水腫,外觀呈紅色,見(jiàn)大片的暗紅色出血灶。L組、M組以及H組見(jiàn)肺組織充血水腫依次緩解。P組損傷程度較C組嚴(yán)重,肺組織外觀呈紅色,大片新鮮出血病灶,肺組織嚴(yán)重充血水腫。 (2)鏡下觀:N組肺泡無(wú)水腫及透明膜形成,肺間質(zhì)不增寬,肺泡腔及肺間質(zhì)未見(jiàn)紅細(xì)胞漏出及炎癥細(xì)胞侵潤(rùn),無(wú)肺不張。C組可見(jiàn)肺泡結(jié)構(gòu)明顯紊亂、破壞,肺泡結(jié)構(gòu)不完整,明顯肺泡水腫,大量透明膜形成,肺間質(zhì)明顯增厚,肺間質(zhì)及肺泡大量紅細(xì)胞及粒細(xì)胞侵潤(rùn),大面積肺不張,與N組比較,其肺損傷評(píng)分明顯升高(P0.01)。L組與C組比較,肺組織損傷尚未見(jiàn)明顯改善,肺損傷評(píng)分無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。M組及H組肺組織結(jié)構(gòu)較C組破壞程度明顯減輕,肺泡及肺間質(zhì)水腫減輕,紅細(xì)胞和粒細(xì)胞滲出明顯減少,透明膜減少,肺不張面積減小,肺損傷評(píng)分均明顯降低(P0.01)。P組肺組織損傷程度較C組更嚴(yán)重,表現(xiàn)為大面積肺泡水腫,大量透明膜形成,肺泡結(jié)構(gòu)大面積破壞,肺間質(zhì)增厚,大量紅細(xì)胞和粒細(xì)胞滲出,大面積肺不張,肺損傷評(píng)分明顯升高(P0.05)。 2.細(xì)胞凋亡率的變化 與N組比較,其余各處理組肺組織細(xì)胞凋亡率均明顯升高(P0.01)。與C組比較,L、M、H組細(xì)胞凋亡率均明顯下降(P0.01);P組肺組織凋亡率明顯升高(P0.01)。 3.肺組織Bax和Bcl-2蛋白的分布和表達(dá)以及Bcl-2/Bax比值的變化 Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)陽(yáng)性被染色呈棕黃色,主要表達(dá)于肺泡上皮和支氣管上皮,于血管內(nèi)皮細(xì)胞及炎癥細(xì)胞內(nèi)亦有表達(dá)。N組可見(jiàn)少量Bax和Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)。與N組比較,C組Bcl-2蛋白的表達(dá)增強(qiáng)(P0.01),Bax蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)(P0.01),Bcl-2/Bax比值明顯降低(P0.01)。與C組比較, L、M、H組Bcl-2蛋白表達(dá)均明顯增強(qiáng)(P0.01);而M、H組Bax蛋白表達(dá)則明顯減少(P0.01);L、M、H組Bcl-2/Bax比值明顯升高(P0.01或P0.05)。與C組比較,P組Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減弱(P0.05),Bax蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),Bcl-2/Bax比值明顯下降(P0.05)。 4.肺組織Caspase-3及Caspase-9蛋白表達(dá)的變化 N組有Caspase-3及Caspase-9蛋白表達(dá)。與N組比較,C組Caspase-3及Caspase-9蛋白表達(dá)明顯增加(P0.01)。與C組比較,L、M、H組Caspase-3蛋白表達(dá)均明顯減弱(P0.01),M、H組Caspase-9蛋白表達(dá)亦明顯減弱(P0.01);P組Caspase-3和Caspase-9蛋白表達(dá)均明顯增強(qiáng)(P0.01或P0.05)。 結(jié)論 1.蝮蛇毒可以導(dǎo)致SD大鼠產(chǎn)生急性肺損傷。 2.蝮蛇毒致SD大鼠急性肺損傷時(shí),肺組織細(xì)胞凋亡率明顯上升。 3. H2S可以抑制蝮蛇毒致SD大鼠急性肺損傷時(shí)肺組織細(xì)胞凋亡,對(duì)急性肺損傷起到保護(hù)作用。其機(jī)制可能與上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá),下調(diào)Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:急性肺損傷 蝮蛇毒 細(xì)胞凋亡 硫化氫
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R563
【目錄】:
- 英文縮略詞表4-5
- 中文摘要5-8
- Abstract8-11
- 前言11-13
- 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法13-20
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料13-14
- 2. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及建模14-15
- 3. 檢測(cè)指標(biāo)及方法15-19
- 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
- 結(jié)果20-29
- 1. 實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織病理學(xué)變化20-22
- 2. 各組肺組織細(xì)胞凋亡率的變化22-24
- 3. 各組肺組織 Bax 和 Bcl-2 蛋白的分布和表達(dá)的變化24-27
- 4. 各組肺組織 Caspase-3 及 Caspase-9 蛋白表達(dá)的變化27-29
- 討論29-35
- 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-40
- 綜述40-50
- 參考文獻(xiàn)46-50
- 研究生期間論文發(fā)表及獲獎(jiǎng)情況50-51
- 致謝51
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 呂晨光;K_ATP通道阻斷劑格列苯脲對(duì)失血性休克大鼠肺損傷的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年
2 高廣榮;低溫復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠肺組織PPAR-γ及相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年
3 崔紅;密閉艙室大鼠爆炸傷合并失血性休克特點(diǎn)與容量復(fù)蘇的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年
本文關(guān)鍵詞:硫化氫對(duì)蝮蛇毒致大鼠急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響及可能機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):336880
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