目的:通過博來霉素構建大鼠肺纖維化模型,觀察MG132對肺纖維化的治療作用,同時研究MG132的抗纖維化作用機制及其對TGF-β1/Smad信號通路的調控機制。方法:1、肺纖維化模型的建立及實驗分組:選取120只SD大鼠,隨機分為肺纖維化模型組（90只）和生理鹽水對照組（NS組,30只）。模型組給予氣管內注射博來霉素（0.3ml,5mg/kg）,對照組氣管內注射0.3ml生理鹽水。造模后第一天將模型組隨機分為3組:博來霉素組（BLM組）,二甲基亞砜組（DMSO組）,MG132組,每組30只。MG132組每日予以腹腔注射MG132（0.3ml,0.1mg/kg.d）,DMSO組每日腹腔注射0.3ml二甲基亞砜溶液,BLM組和NS組分別每日腹腔注射生理鹽水0.3ml。2、觀察并記錄大鼠在各時間點的一般情況。各組大鼠分別在第7、14、28天隨機處死10只,取出肺組織,觀察肺組織大體結構變化及炎癥反應。3、肺組織病理學檢測:取出的肺組織行石蠟包埋、切片、Masson染色、HE染色,Ashcroft評分評估纖維化程度。4、分子機制研究:Western blot及免疫組化檢測CD31、α-SMA、... 

【文章來源】：成都醫(yī)學院四川省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠肺組織HE染色(100×）

19圖 2 大鼠肺組織 Masson 染色(200×）Fig.2 Masson staining of rats lung tissue(200×）注：(1)A1、A2、A3 分別為 NS 組第 7、14、28 天肺組織 Masson 染色；(2)B1、B2、B3 分別為 BLM 組第 7、14、28 天肺組織 Masson 染色；(3)C1、C2、C3 分別為 DMSO 組第 7、14、28 天肺組織 Masson 染色；(4)D1、D2、D3 分別為 MG132 組第 7、14、28 天肺組織 Masson 染色。

圖 3 大鼠肺組織 SnoN 免疫組化染色(400×）Fig.3 The immunohistochemistry of SnoN in rats lung tissue(400×）注：（1）A1、A2、A3 分別為 NS 組第 7、14、28 天肺組織 SnoN 免疫組化；（2）B1、B2、B3 分別為 BLM 組第 7、14、28 天肺組織 SnoN 免疫組化；（3）C1、C2、C3 分別為 DMSO 組第 7、14、28 天肺組織 SnoN 免疫組化；（4）D1、D2、D3 分別為 MG132 組第 7、14、28 天肺組織 SnoN 免疫組化。表 3 大鼠肺組織 SnoN 免疫組化結果（平均積分光密度， x s）Tab.3 The expression of SnoN in rats lung tissue（MIOD， x s）分組 第 7 天 第 14 天 第 28 天NS 組 4.34 0.03(n=10) 4.43 0.16(n=10) 4.42 0.08(n=10)BLM 組 2.08 0.23a(n=9) 1.07 0.12*a(n=10) 0.45 0.07*#a(n=10)DMSO 組 2.13 0.03ab(n=10) 1.02 0.01*ab(n=10) 0.47 0.04*#ab(n=9)MG132 組 3.12 0.01ac(n=9) 2.14 0.09*ac(n=10) 1.23 0.05*#ac(n=10)注：a 表示與 NS 組比較 P<0.05；b 表示與 BLM 組比較 P>0.05；c 表示與 BLM 組比較

【參考文獻】：
期刊論文
[1]蛋白酶體抑制劑MG132抑制糖尿病腎臟疾病機制的研究[J]. 王圓圓,張小歡,毛彥穩(wěn),劉玲伶,彭偉,劉慧銘,石明雋,肖瑛,張瑩瑩,郭兵.  中國糖尿病雜志. 2018(02)
[2]TGF-β1-Smad2/3信號轉導通路在百草枯中毒致肺纖維化中的作用[J]. 王亞鵬,楊惠芳,蔡倩,朱玲勤,劉賀榮,黃敏.  工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病. 2016(03)
[3]MG132抑制TGF-β1誘導的人肺成纖維細胞活化[J]. 曹述任,楊俊俠,張敏.  基礎醫(yī)學與臨床. 2016(02)
[4]Smad泛素化調節(jié)因子2在轉化生長因子β1誘導人肺成纖維細胞活化中的作用及其分子機制[J]. 楊俊俠,曹述任,張敏.  吉林大學學報(醫(yī)學版). 2015(05)
[5]轉化生長因子β1及相關細胞因子在肺纖維化發(fā)生中的作用[J]. 芮煒瑋,易祥華.  同濟大學學報(醫(yī)學版). 2010(03)

碩士論文
[1]蛋白酶體抑制劑MG132對大鼠肺纖維化的抑制作用及機制初探[D]. 代文靜.成都醫(yī)學院 2018
[2]TGF-β1/Smad3在博來霉素肺纖維化大鼠EndMT中作用及機制研究[D]. 邱靜.成都醫(yī)學院 2017
[3]Arkadia對肝纖維化SnoN蛋白降解作用的體內外實驗研究[D]. 劉曉亞.首都醫(yī)科大學 2016



本文編號：3360322