目的:tet（A）基因變異體能夠介導替加環(huán)素低水平耐藥。本研究通過對河南地區(qū)產(chǎn)KPC-2酶肺炎克雷伯菌攜帶tet（A）基因變異體的發(fā)生率、水平傳播機制以及分子流行病學特征進行研究,為控制tet（A）基因變異體的進一步播散和臨床有效治療替加環(huán)素不敏感的產(chǎn)KPC-2酶肺炎克雷伯菌提供理論基礎(chǔ)。方法:（1）以2013年11月-2018年11月收集鄭州大學某教學醫(yī)院的459株非重復耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（Carbapenem-Resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）為研究對象,根據(jù)VITEK（?）2藥敏初篩結(jié)果,針對替加環(huán)素MIC≥0.5μg/mL的菌株進行碳青霉烯酶基因和tet（A）基因變異體的檢測。（2）篩選tet（A）基因陽性且產(chǎn)KPC-2酶的CRKP,對其攜帶的tet（A）基因全長序列進行測序并分析氨基酸差異,通過酶切克隆驗證tet（A）基因變異體介導替加環(huán)素耐藥表型的功能。（3）通過微量肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法測定目標菌株對臨床常用抗菌藥物MIC值;利用PCR篩查目標菌株攜帶的其他耐藥基因。（4）利用多位點序列分型對目標菌株進行同源性分析。（5）通過... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３?ＡｃｒＡＢ－ＴｏｌＣ結(jié)構(gòu)示意圖［８１】??

力下，介導替加環(huán)素耐??藥的／ｅｆ（Ａ）基因變異體在ＣＲＫＰ中的出現(xiàn)和流行將進一步加劇病原菌的多重耐??藥性，導致廣泛耐藥（Ｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙ?ｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，ＸＤＲ）或全耐藥（Ｐａｎｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，??ＰＤＲ）菌株的產(chǎn)生，從而使得臨床治療陷入無藥可用的困境。??基因在腸桿菌科細菌和金黃色葡萄球菌中報道較多，轉(zhuǎn)座子Ｔｎ川、??Ｔｎ／７２７和插入序列１Ｓ２５７等可移動元件攜帶化／（Ａ）基因發(fā)生水平傳播最??常見的紀／（Ａ）基因位于轉(zhuǎn)座子Ｔｎ７７２７?（如圖１．４所示）。Ｔｎ／７２／是一種Ｔｎ２７亞??家族的轉(zhuǎn)座子，其一端是／？／？及和ｍｃ／？，兩側(cè)為３８ｂｐ反向重復序列，該結(jié)??構(gòu)稱為轉(zhuǎn)座子Ｔｎ／７２２，可以單獨轉(zhuǎn)移；另一端包括四環(huán)素耐藥基因如（Ａ）和阻遏??基因如兄兩者方向相反。轉(zhuǎn)座子Ｔｎ／７２／可能是兩個位于如（Ａ）基因區(qū)域兩??側(cè)的Ｔｎ７?７２２形成復合轉(zhuǎn)座結(jié)構(gòu)內(nèi)部發(fā)生缺失進化而來。目前，完整的Ｔｎ７７２／??轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)在ＧｅｎＢａｎｋ中是罕見的，其截短形式經(jīng)常存在于革蘭氏陰性菌，四??環(huán)素耐藥基因區(qū)域是完整的，而編碼轉(zhuǎn)座功能的基因部分或完全缺失。??ＩｎＨ＇ｎ??Ｔｎ?１７２７?■??丨?ｔｎｐＡＡ?ｐｏｃＭ?，則Ａ＞?ｆ樹ＲＡ｝?ｔｎｐＲ?＾?ｍｃｐ?１??Ｔｎ１７２２、?ＴＵ?）??圖１．４完整轉(zhuǎn)座子Ｔｎ／７２／結(jié)構(gòu)［１００】??１．３結(jié)語??本課題針對替加環(huán)素不敏感的攜帶／ｅ／（Ａ）基因變異體產(chǎn)ＫＰＣ－２酶ＣＲＫＰ展??開研究，以２０１３年１１月－２０１８年１１月收集鄭州大學某教學醫(yī)院的４５９株非重??９??

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【參考文獻】：
博士論文
[1]腸桿菌科細菌替加環(huán)素耐藥機制研究[D]. 何方.浙江大學 2017



本文編號：3359539