目的:探索細胞療法暨內(nèi)皮祖細胞（EPCs）移植法對急性肺損傷的治療作用,比較體外移植內(nèi)皮祖細胞、使用阿托伐他汀提高循環(huán)中內(nèi)皮祖細胞數(shù)量和活性以及二者聯(lián)合應用三種方法的療效。方法:取人臍帶血分離內(nèi)皮祖細胞,經(jīng)一周培養(yǎng);用脂多糖（LPS）造大鼠急性肺損傷（ALI）模型,分別口服給予阿托伐他汀、尾靜脈注入BrdU標記的內(nèi)皮祖細胞及兩者聯(lián)合給藥。2日后評估其肺損傷的程度、肺血管誘生型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表達及免疫組化法追蹤移植內(nèi)皮祖細胞修復血管內(nèi)皮的情況。結(jié)果:EPCs移植組和聯(lián)合治療組中,免疫組化可檢測到肺血管內(nèi)皮BrdU呈陽性的移植EPCs;大鼠肺動脈中iNOS表達較LPS模型組受到抑制;肺實質(zhì)中,中性粒細胞（PMN）明顯減少,肺水含量、透明膜形成及肺出血均減少。而他汀治療組與LPS模型組未見明顯差異。結(jié)論:EPCs體外移植對ALI大鼠模型的肺血管內(nèi)皮有保護作用,同時也維持了肺泡毛細血管屏障的完整性。而阿托伐他汀對移植EPCs有協(xié)同作用,聯(lián)合應用將會取得更好的療效。而單獨的他汀藥物治療未見明顯療效。 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

EPCs體外培養(yǎng)第4天（x100）

結(jié) 果1.內(nèi)皮祖細胞的鑒定細胞形態(tài)學觀察見：從新鮮臍血中分離到的單個核細胞呈小圓形(圖1），分離培養(yǎng)48小時后貼壁，4、5d生長速度最快，出現(xiàn)大量的梭形貼壁細胞（圖2）。約6d，可見大量的細胞團形成，細胞首尾相連，有時還可見兩排細胞平行排列成管樣結(jié)構(gòu)，約7d可見細胞呈簇狀分布，并見片狀融合，類似鋪路石（圖3）。免疫熒光法鑒定：內(nèi)皮祖細胞表面 標記物vWF、CD133免疫熒光檢測呈陽性，熒光顯微鏡下細胞膜和胞漿中可見黃綠色熒光（圖4、5）。流式細胞儀檢測EPC表面標志物CD34呈陽性

類似鋪路石（圖3）。免疫熒光法鑒定：內(nèi)皮祖細胞表面 標記物vWF、CD133免疫熒光檢測呈陽性，熒光顯微鏡下細胞膜和胞漿中可見黃綠色熒光（圖4、5）。流式細胞儀檢測EPC表面標志物CD34呈陽性，約為26％（圖6)。圖1：臍血提取的單個核細胞 第1天 （x100）圖2：EPCs體外培養(yǎng) 第4天 （x100）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]臍血內(nèi)皮祖細胞移植改善肢體缺血的研究[J]. 楊晨,張志華,盧士紅,楊仁池,錢冠清,韓忠朝.  中華醫(yī)學雜志. 2003(16)



本文編號：3292863