本文關(guān)鍵詞：我國近10年肺結(jié)核發(fā)病率分析及結(jié)核分枝桿菌快速檢測方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 1.以省級行政區(qū)域為研究對象，建立2004-2012年全國31個�。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）肺結(jié)核地理信息數(shù)據(jù)庫，制作肺結(jié)核發(fā)病的專題地圖，并描述我國肺結(jié)核發(fā)病在時間、地點(diǎn)、人群的“三間分布”特征，確定2004-2012年我國肺結(jié)核高發(fā)區(qū)、高發(fā)期和高危人群，為部隊肺結(jié)核防控關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)提供依據(jù)。 2.篩選結(jié)核分枝桿菌特異性的基因作為LAMP檢測的靶基因序列，設(shè)計并篩選特異性的引物，用檢測濁度法和鈣黃綠素染色法對該引物的特異性與靈敏性測試，為部隊結(jié)核病現(xiàn)場快速檢測提供一種新的檢測與判斷方法。 方法： 1.近10年肺結(jié)核發(fā)病率分析 1.1.數(shù)據(jù)收集和處理的方法 利用中國疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)，收集研究區(qū)域內(nèi)肺結(jié)核網(wǎng)絡(luò)報告數(shù)據(jù)和人口信息，利用Excel2010軟件，對數(shù)據(jù)進(jìn)行比對篩選和排序整理。 1.2利用ArcGIS9.0軟件，建立我國各省結(jié)核地理信息數(shù)據(jù)庫，從時間、空間、人群三方面，對我國結(jié)核發(fā)病分布特征進(jìn)行描述性分析。 2.結(jié)核分枝桿菌快速檢測方法研究 2.1引物篩選 通過NCBI在線數(shù)據(jù)庫的檢索，選擇結(jié)核分枝桿菌的特異性保守序列IS6110為靶序列，并針對這一序列用軟件（Primer Explorer4）設(shè)計特異性的LAMP引物，并篩選最佳引物。 2.2特異性評價 用篩選的最佳引物分別檢測結(jié)核分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌，，評價該引物檢測結(jié)核分枝桿菌的特異性。 2.3靈敏性評價 將提取的結(jié)核分枝桿菌DNA進(jìn)行10倍梯度稀釋，用該引物進(jìn)行檢測，評價其靈敏性與傳統(tǒng)PCR方法的差異。 結(jié)果： 1.近10年肺結(jié)核發(fā)病率分析 1.1全國肺結(jié)核發(fā)病概況 2004-2012年我國31個省、直轄市和自治區(qū)，共報告肺結(jié)核發(fā)病病例9663,728例，死亡26,932例，十年來我國肺結(jié)核病例報告總體呈下降趨勢。 1.2全國肺結(jié)核空間分布情況 新疆肺結(jié)核年均發(fā)病率為181.42/10萬居全國首位，貴州、海南、廣西、重慶、西藏、黑龍江六�。ㄖ陛犑�、自治區(qū)）年均發(fā)病率次之，北京、山東、上海和天津四省（直轄市）年均發(fā)病率低于50/10萬。 1.3全國肺結(jié)核時間分布情況 從2004-2012年我國肺結(jié)核月均發(fā)病率來看，一、二季度肺結(jié)核發(fā)病率較高，三、四季度肺結(jié)核發(fā)病率較低，其中，1月和3月發(fā)病率較高且相近，自3月份起發(fā)病率逐月下降，12月發(fā)病率為一年中最低。 1.4全國肺結(jié)核人間分布情況 肺結(jié)核患者中男性高于女性；從年齡分布上看，14歲以下人群年均發(fā)病率較低，老年人（60歲以后）年均發(fā)病率最高。從職業(yè)分布上看，我國肺結(jié)核發(fā)病主要以農(nóng)民為主。 2.結(jié)核分枝桿菌快速檢測方法研究 2.1最佳引物篩選 以結(jié)核分支桿菌IS6110基因序列為靶序列，設(shè)計5套LAMP引物為反應(yīng)引物，以結(jié)核分枝桿菌為模板在濁度儀中進(jìn)行LAMP反應(yīng)，結(jié)果顯示引物JH164組為最佳擴(kuò)增引物。 2.2JH164引物檢測結(jié)核分枝桿菌的特異性檢測實(shí)驗 用JH164引物對14種細(xì)菌DNA進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，JH164引物具有良好的特異性。 2.3JH164引物檢測結(jié)核分枝桿菌靈敏性實(shí)驗 用JH164引物分別用濁度法和鈣黃綠素染色法進(jìn)行檢測，檢測10倍梯度稀釋的結(jié)核分枝桿菌DNA，結(jié)果顯示，用JH164引物進(jìn)行LAMP結(jié)核分枝桿菌檢測的靈敏性是傳統(tǒng)PCR方法的10倍，最低檢測值為：101pg/μl。 結(jié)論： 1.在過去的10年，我國肺結(jié)核發(fā)病率呈總體下降趨勢，但防控形勢依然嚴(yán)峻。我國肺結(jié)核病在新疆發(fā)病率最高，提示該地區(qū)結(jié)核病防控應(yīng)作為重點(diǎn)。從發(fā)病時間來看，我國肺結(jié)核發(fā)病多集中在一、二季度，提示此時為結(jié)核病多發(fā)季節(jié)，應(yīng)做好結(jié)核病防控措施。從人群角度來看，肺結(jié)核患者多為務(wù)農(nóng)者，以男性為主，老年人發(fā)病率較高。 2.用LAMP方法檢測結(jié)核分枝桿菌具有簡單、快速、特異性高、靈敏性好的特點(diǎn)，而且反應(yīng)在恒溫狀態(tài)下即可發(fā)生，反應(yīng)成本低，是一種非常適用于基本部隊的結(jié)核分枝桿菌快速檢測技術(shù)，如果使用鈣黃綠素染色法，在其反應(yīng)結(jié)果判斷方面則更為簡單，對結(jié)核病疫情的早期控制和結(jié)核病患者的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療具有十分重要的意義。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)核分枝桿菌 發(fā)病率 LAMP 快速檢測
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R521;R446.5
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• Abstract5-8
• 摘要8-11
• 第一章 前言11-17
• 第二章 近 10 年肺結(jié)核發(fā)病率分析17-23
• 2.1 材料與方法17
• 2.2 結(jié)果17-21
• 2.3 結(jié)論21-22
• 2.4 討論22-23
• 第三章 環(huán)介導(dǎo)的恒溫擴(kuò)增法快速檢測結(jié)核分枝桿菌的研究23-39
• 3.1 材料與方法23-33
• 3.2 結(jié)果33-37
• 3.3 討論37-39
• 全文結(jié)論39-40
• 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)與不足40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 文獻(xiàn)綜述44-53
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 研究生期間發(fā)表和待發(fā)的論文53-54
• 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋克云;張如勝;歐新華;蘇良;楊秋林;;RT-LAMP快速檢測Norwalk病毒GⅡ型[J];病毒學(xué)報;2009年04期

2 張周云;熊國亮;;探討ELISA法檢測血清結(jié)核桿菌抗原對肺結(jié)核病的診斷價值[J];實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué);2010年06期

3 顏京瑞;;檢測結(jié)核抗體對結(jié)核病的臨床診斷價值[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2010年02期

4 韓躍飛;張治國;楊小薇;;免疫印跡法檢測結(jié)核抗體的臨床應(yīng)用體會[J];臨床肺科雜志;2007年06期

5 朱麗;霍貴成;;環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增法快速檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌[J];食品科學(xué);2011年16期

6 閆伯強(qiáng),胡天勇,楊宜平;聯(lián)合檢測腫瘤壞死因子和抗結(jié)核桿菌抗體對結(jié)核病的臨床意義[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2005年05期

7 徐荒;朱紅;;結(jié)核菌快速檢測技術(shù)進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2012年03期

8 蘭國偉;萬康林;陳創(chuàng)夫;;結(jié)核分枝桿菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展[J];中國防癆雜志;2007年03期

9 吳守芝,宋俊峰;結(jié)核分支桿菌致病機(jī)制與免疫[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2003年02期

10 吳雪瓊;;耐藥性結(jié)核分枝桿菌的分子生物學(xué)研究現(xiàn)狀[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2006年12期

  本文關(guān)鍵詞：我國近10年肺結(jié)核發(fā)病率分析及結(jié)核分枝桿菌快速檢測方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：325406