發(fā)布時(shí)間：2021-06-16 22:08

　　目的：根據(jù)DNA分子堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理和不同來(lái)源、具有互補(bǔ)序列的單鏈DNA在一定條件下可以形成異源雙鏈DNA的特性，建立了一種利用病原菌特異長(zhǎng)鏈DNA探針直接檢測(cè)生物素標(biāo)記細(xì)菌DNA的斑點(diǎn)雜交技術(shù)，以快速檢測(cè)下呼吸道感染的常見(jiàn)致病菌。并將該方法應(yīng)用于臨床痰樣本的檢測(cè)，同時(shí)與痰培養(yǎng)和聚合酶鏈反應(yīng)方法進(jìn)行比較，探討該方法在下呼吸道感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法：1．選擇肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌、甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌、甲氧西林耐藥表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸埃希菌、嗜肺軍團(tuán)菌這10種下呼吸道感染最常見(jiàn)的病原菌，作為檢測(cè)菌株。在這10種病原菌高度特異的基因序列內(nèi)利用聚合酶鏈反應(yīng)合成上述10種細(xì)菌特異的長(zhǎng)鏈DNA探針，并將合成的特異探針固定在硝酸纖維素膜上，與用長(zhǎng)臂光敏生物素標(biāo)記后的模板DNA進(jìn)行斑點(diǎn)雜交反應(yīng)，通過(guò)觀察雜交信號(hào)判斷存在何種細(xì)菌感染，同時(shí)研究該方法的敏感性和特異性。2．利用上述斑點(diǎn)雜交方法檢測(cè)100份社區(qū)獲得性肺炎患者、150份醫(yī)院獲得性肺炎患者和50份非下呼吸道感染患者的痰標(biāo)本，觀察其檢測(cè)結(jié)果，并與培養(yǎng)法... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞對(duì)照表（Abbreviation Index）
中文摘要（Abstract in Chinese）
英文摘要（Abstract in English）
前言（Introduction）
第一部分 斑點(diǎn)雜交的實(shí)驗(yàn)研究
    材料（Materials）
    方法（Methods）
    結(jié)果（Results）
第二部分 斑點(diǎn)雜交的臨床應(yīng)用研究
    材料（Materials）
    方法（Methods）
    結(jié)果（Results）
討論（Discussion）
結(jié)論（Conclusion）
研究意義和展望（Significance and Prospects）
參考文獻(xiàn)（References）
綜述（Review）
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文（Published paper）
致謝（Acknowledgements）


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3233879