本文關(guān)鍵詞：MMP-9和TIMP-1在大鼠COPD合并肺間質(zhì)纖維化的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 目的:慢性阻塞性肺疾病合并肺間質(zhì)纖維化(chronic obstructive pulmonary disease combined with pulmonary interstitial fibrosis ,PIF-COPD)與特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化有明顯的不同,COPD發(fā)展過程中肺纖維化是一種極為常見的病理改變。COPD合并肺纖維化主要發(fā)生部位在支氣管各級分支,特別是VI級以下的支氣管分支周圍,病變嚴(yán)重的病例累及了呼吸性細(xì)支氣管和肺泡壁,且以Ⅲ型膠原纖維為主,最終引起持續(xù)氣道狹窄和通氣功能障礙。有人認(rèn)為肺間質(zhì)和肺泡纖維化是病變隨病程向肺組織深處發(fā)展的結(jié)果,可能是炎癥的一種修復(fù)反應(yīng),也是造成肺通氣和換氣功能障礙的原因。臨床上,人們發(fā)現(xiàn)COPD常合并一定程度的肺纖維化,但對其潛在機(jī)理尚未闡明,近年來,國內(nèi)外許多研究發(fā)現(xiàn),吸煙與反復(fù)細(xì)菌感染可以加速COPD病情惡化,這對進(jìn)一步探討本病的發(fā)病機(jī)制提供了重要依據(jù)。氣道炎癥和氣道重構(gòu)是COPD的主要病理特征。以膠原為主的細(xì)胞外基質(zhì)在氣道壁的過度沉積是引起氣道壁纖維化氣流阻塞的主要原因。基質(zhì)金屬蛋白酶可降解肺泡壁ECM和基底膜幾乎所有的蛋白成分,參與呼吸道重建。本研究旨在觀察肺組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9 ,MMP-9 )和組織型蛋白酶抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)在吸煙聯(lián)合脂多糖致大鼠PIF-COPD模型中的水平并分析其相關(guān)性,并通過比較模型組大鼠肺組織中膠原蛋白Ⅲ含量,來探討COPD合并肺纖維化的可能發(fā)病機(jī)制,為臨床提供預(yù)防、診斷及抗炎、抗纖維化治療的新思路。 方法:選取24只雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供),體重250-300g,適應(yīng)性飼養(yǎng)三天后,隨機(jī)分成正常對照組(A組)、28天模型組(B組)、42天模型組(C組)。B組和C組大鼠分別置于自制的40cm×50cm×60cm的有機(jī)玻璃吸煙箱內(nèi)吸煙,吸煙量為(5支/次,2次/每天),其中每次吸煙時間為1小時。B組于第1天,第15天氣管內(nèi)注入0.2ml含200ug的脂多糖,C組于第1天,第15天,第28天氣管內(nèi)注入0.2ml含200ug的脂多糖,氣管滴脂多糖當(dāng)日不吸煙,對照組不做任何處理,飼養(yǎng)條件相同。所有操作均在無菌條件下進(jìn)行。用10%水合氯醛(40mg/kg體重)腹腔注射麻醉,作頸正中切口,充分暴露氣管,經(jīng)環(huán)狀軟骨下氣管間隙穿刺向氣管內(nèi)緩慢注入藥液,將大鼠直立并輕輕旋轉(zhuǎn)動物,使藥液在肺內(nèi)充分、均勻。各組大鼠分別于造模后28天、42天處死,取材:左肺組織做HE、Masson染色和免疫組化方法測定肺組織中的膠原蛋白III陽性面積比,右肺經(jīng)氣管插管取支氣管肺泡灌洗液(BALF),免疫組化方法測肺組織中MMP-9和TIMP-1含量(用OD值來間接反應(yīng))。細(xì)胞沉淀懸浮于等量生理鹽水中,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和分類計數(shù)。 結(jié)果: 1 B組和C組細(xì)胞總數(shù)較對照組有明顯升高(P0.01)。B組巨噬細(xì)胞數(shù)%較對照組有明顯降低(P0.01),中性粒細(xì)胞數(shù)%(PMN%)較對照組有明顯升高(P0.01)。C組巨噬細(xì)胞數(shù)%較對照組有明顯降低(P0.01),淋巴細(xì)胞數(shù)%有明顯增高(P0.01)。 2 HE染色所見:正常對照組均未出現(xiàn)明顯的病理變化。B組肺泡腔顯著擴(kuò)大,肺泡壁斷裂,肺泡融合,可見明顯肺氣腫,肺泡間隔水腫增寬,形成嚴(yán)重肺泡炎,成纖維細(xì)胞開始增生,小氣道平滑肌增殖紊亂,血管腔狹窄。C組肺泡炎逐漸減輕,肺泡壁增厚,仍可見炎性細(xì)胞浸潤,以巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等慢性炎癥細(xì)胞為主,肺纖維組織合成增加,膠原纖維明顯增多,部分肺泡間隔明顯增寬。 3 Masson染色:正常對照組可見淡藍(lán)色的基質(zhì)膠原較少。模型組基質(zhì)膠原隨造模時間延長而明顯增多。 4肺組織中膠原蛋白Ⅲ的含量變化:免疫組化結(jié)果顯示B組和C組肺組織膠原蛋白Ⅲ含量高于正常對照組,兩組比較均有顯著性差異(P0.01),C組較B組肺組織膠原蛋白Ⅲ含量也有明顯增高,兩組比較有顯著性差異(P0.01),模型組膠原蛋白Ⅲ含量隨造模時間的延長逐漸增高。 5大鼠肺組織中MMP-9含量變化(用OD值來間接反映):B組和C組MMP-9含量分別為0.1970和0.2414較正常對照組含量增高,兩組比較均有顯著性差異(P0.01)。C組較B組肺組織中MMP-9含量增高,兩組比較有顯著性差異(P0.01),模型組MMP-9含量隨造模時間延長逐漸增高。 6大鼠肺組織中TIMP-1含量的變化(用OD值來間接反映):B組和C組含量分別為0.1265和0.2171較正常對照組增高,兩組比較均有顯著性差異(P0.01 )。C組較B組肺組織中TIMP-1含量增高,兩組比較有顯著性差異(P0.01)。模型組TIMP-1含量隨造模時間延長逐漸增高。 7各組大鼠肺功能變化:B組和C組0.3秒用力呼氣容積占用力肺活量比、呼氣峰值流速、呼氣中期流速較正常對照組降低(P0.05),B組呼氣阻力、吸氣阻力較正常對照組增高(P0.05)。C組呼氣峰值流速、呼氣中期流速較B組增高(P0.05),呼氣阻力、吸氣阻力較B組降低(P0.05)。 結(jié)論: 1用吸煙聯(lián)合脂多糖致大鼠COPD合并肺間質(zhì)纖維化的動物模型的嘗試是基本成功的。 2吸煙和反復(fù)發(fā)生的氣道慢性炎癥可能參與了COPD合并肺間質(zhì)纖維化的形成過程。 3 MMP-9和TIMP-1的表達(dá)在肺組織中隨造模時間延長而逐漸增高,說明MMP-9和TIMP-1在COPD合并肺間質(zhì)纖維化中起著重要作用。 4膠原蛋白Ⅲ含量和肺纖維化程度隨造模延長而逐漸增高。
【關(guān)鍵詞】：吸煙 脂多糖 慢性阻塞性肺疾病合并肺間質(zhì)纖維化 MMP-9 TIMP-1
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R563.9
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 研究論文 MMP-9 和 TIMP-1 在大鼠COPD 合并肺間質(zhì)纖維化的作用11-40
• 前言11-12
• 材料與方法12-16
• 結(jié)果16-19
• 附圖19-28
• 附表28-30
• 討論30-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王興勝,崔社懷;經(jīng)支氣管肺活檢結(jié)合免疫組織化學(xué)方法對肺間質(zhì)纖維化的診斷價值[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2003年18期

2 唐小軍,周清華;基質(zhì)金屬蛋白酶與肺癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J];中國肺癌雜志;2001年02期

3 李亞清;張珍祥;徐永健;;基質(zhì)金屬蛋白酶的結(jié)構(gòu)、調(diào)控及其與慢性阻塞性肺疾病的關(guān)系[J];國際呼吸雜志;2006年03期

4 劉清敏,劉景艷;炎癥細(xì)胞與COPD發(fā)病機(jī)制的關(guān)系[J];中原醫(yī)刊;2004年19期

5 戴莉莉,秦斌斌,陳曉紅,祝捚;慢性阻塞性肺疾病合并肺間質(zhì)纖維化的臨床研究[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2004年09期

6 孔英君;孫文學(xué);霍建民;石玉枝;;慢性阻塞性肺疾病患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子與細(xì)胞黏附因子和血管內(nèi)皮黏附因子的關(guān)系研究[J];中國實用內(nèi)科雜志;2007年16期

7 李圣青,張艱,黎志東,李煥章,戚好文;小鼠肺纖維化模型中基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其抑制劑表達(dá)水平的變化[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年06期

8 郭瑞霞;張紅梅;袁雅冬;;COPD患者基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其抑制物的表達(dá)和調(diào)控[J];新醫(yī)學(xué);2008年02期

9 吳小燕;衛(wèi)小紅;;慢性阻塞性肺疾病合并肺纖維化的研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學(xué)綜述;2006年10期

10 陳遠(yuǎn)驥;王伯章;;基質(zhì)金屬蛋白酶-9與慢性阻塞性肺疾病的研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2006年11期

  本文關(guān)鍵詞：MMP-9和TIMP-1在大鼠COPD合并肺間質(zhì)纖維化的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：317881