目的 隨著分子生物學(xué)理論和重組DNA技術(shù)，特別是轉(zhuǎn)基因技術(shù)的飛速發(fā)展，將外源基因轉(zhuǎn)入移植肺，從而改善移植物的功能和總的生存率來預(yù)防或減輕移植術(shù)后的并發(fā)癥諸如缺血-再灌注損傷、免疫排斥反應(yīng)和感染等，以減少使用免疫抑制劑，成為研究的熱點。本實驗試圖通過體外途徑的脂質(zhì)體介導(dǎo)將報告基因（Lac-Z基因）轉(zhuǎn)入移植肺并表達，來證明將外源基因轉(zhuǎn)入移植肺進行基因治療的可行性。 方法 首先建立大鼠同種異體左肺原位移植模型和經(jīng)肺血管系統(tǒng)（靜脈逆行）灌注技術(shù)。然后將18只SD大鼠隨機分為轉(zhuǎn)基因組、脂質(zhì)體組和空白對照組，每組各6只。轉(zhuǎn)基因組經(jīng)肺靜脈將質(zhì)粒載體DNA（PSV-β-gal）／脂質(zhì)體Lipofectin^（R）（DOTMA／DOPE）復(fù)合物灌注入移植肺；脂質(zhì)體組和空白對照組則分別灌注脂質(zhì)體和0.9％生理鹽水。手術(shù)1天以后獲取肺臟，冰凍切片，經(jīng)X-gal組織化學(xué)染色檢測Lac-Z基因的轉(zhuǎn)染和表達情況。 結(jié)果 轉(zhuǎn)基因組3例都檢測到Lac-Z基因的表達。其表達位于氣管上皮細胞和肺泡上皮細胞內(nèi)，呈點片狀蘭斑。而脂質(zhì)體組和空白對照組則均未檢測到Lac-Z基因的表達。 結(jié)論... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 論文
    前言
    第一部分 大鼠同種異體左肺原位移植模型的建立
        1、1 材料與方法
        1、2 結(jié)果
        1、3 討論
    第二部分 報告基因經(jīng)肺血管系統(tǒng)轉(zhuǎn)基因后在移植肺中的表達
        2、1 材料與方法
        2、2 結(jié)果
        2、3 討論
    結(jié)論
    參考文獻
四、 綜述 轉(zhuǎn)基因技術(shù)和基因治療在肺移植中的應(yīng)用
    參考文獻
五、 致謝
六、 在讀期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]肺移植研究進展[J]. 孟輝,陳鋼.  第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2001(03)
[2]CTLA4 Ig在誘導(dǎo)小鼠心臟移植免疫耐受中的作用[J]. 姜慶,方玉華,吳軍,靳鳳爍,李黔生,易紹萱,羅高興.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2000(11)
[3]一種改良的兔異位心肺移植模型建立的體會[J]. 張大發(fā),尤顥,陳廣明.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2000(04)
[4]大鼠同種異體左肺原位移植模型的建立[J]. 蔣志華,楊辰垣.  中華實驗外科雜志. 1999(02)
[5]三袖套管法大鼠肺移植[J]. 潘鐵文,呂隨峰,孫耀昌.  中華器官移植雜志. 1998(02)



本文編號：3155746