TGF-β1/Notch-1/eIF3a信號通路在肺纖維化肺泡上皮細(xì)胞EMT進程中的作用機制研究
發(fā)布時間：2021-03-27 19:09
目的:闡明TGF-β1/Notch1/eIF3a信號通路是否參與了肺纖維化肺泡上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化（EMT）的進程,為肺纖維化（PF）發(fā)病機制提供新的理論依據(jù),并為研發(fā)治療肺纖維化的藥物提供新思路。方法:1.動物實驗雄性SD大鼠30只,隨機分為正常對照（CON）組和博萊霉素（BLM）組,每組15只。通過氣管內(nèi)注射博萊霉素（7500 U/kg）的方法來建立大鼠的肺纖維化模型。CON組在相同環(huán)境下氣管內(nèi)注射相等體積（0.15ml/100g）生理鹽水,造模后28天處死動物。10%中性福爾馬林固定左肺,石蠟包埋,進行HE、Masson染色。提取右肺組織RNA或蛋白,real-time PCR和（或）Western Blot檢測I型膠原（collagen I）、III型膠原（collagen III）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、E鈣粘蛋白（E-Cadherin）、緊密連接蛋白-1（ZO-1）、波形蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、Jagged-1、Notch-1、HES-1、真核翻譯起始因子3a（eIF3a）的表達。2.細(xì)胞實驗第一部分:Notch1抑制劑DAP...
【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】：100 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
博萊霉素對大鼠肺組織形態(tài)學(xué)的影響（HE染色，200×）
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文.26圖2博萊霉素對大鼠肺組織膠原變化的影響（Masson染色，200×）（A、B、C為對照組，D、E、F為模型組）1.3博萊霉素上調(diào)大鼠肺組織中collagenⅢ的表達RealtimePCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠肺組織中collagenⅢmRNA表達水平由CON組的（1.0890.504）上調(diào)至BLM組的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲線發(fā)現(xiàn)collagenⅢ只有一個擴增產(chǎn)物峰，說明在此條件下，collagenⅢ基因擴增具有特異性（圖3，圖4）。另外WesternBlot結(jié)果發(fā)現(xiàn)collagenⅢ蛋白表達水平由CON組的（0.6050.026）明顯上調(diào)至BLM組的（0.9970.055）（P<0.01）（圖5）。表明肺纖維化大鼠肺組織中collagenⅢ的表達明顯升高。圖3博萊霉素對大鼠肺組織中collagenIIImRNA表達的影響（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文.26圖2博萊霉素對大鼠肺組織膠原變化的影響（Masson染色，200×）（A、B、C為對照組，D、E、F為模型組）1.3博萊霉素上調(diào)大鼠肺組織中collagenⅢ的表達RealtimePCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠肺組織中collagenⅢmRNA表達水平由CON組的（1.0890.504）上調(diào)至BLM組的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲線發(fā)現(xiàn)collagenⅢ只有一個擴增產(chǎn)物峰，說明在此條件下，collagenⅢ基因擴增具有特異性（圖3，圖4）。另外WesternBlot結(jié)果發(fā)現(xiàn)collagenⅢ蛋白表達水平由CON組的（0.6050.026）明顯上調(diào)至BLM組的（0.9970.055）（P<0.01）（圖5）。表明肺纖維化大鼠肺組織中collagenⅢ的表達明顯升高。圖3博萊霉素對大鼠肺組織中collagenIIImRNA表達的影響（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]吳茱萸次堿通過抑制Notch1/eIF3a信號通路保護博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化[J]. 高云星,蔣莉莉,張倩,左東澤,李先偉. 中國中藥雜志. 2018(17)
[2]新風(fēng)膠囊通過調(diào)節(jié)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞Notch/Jagged-HES軸改善佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠肺功能[J]. 萬磊,劉健,黃傳兵,張皖東,齊亞軍,張曉軍. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(07)
[3]Notch signaling mediated by TGF-β/Smad pathway in concanavalin A-induced liver fibrosis in rats[J]. Yi Wang,Ruo-Wu Shen,Bing Han,Zhen Li,Le Xiong,Feng-Yu Zhang,Bei-Bei Cong,Bei Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2017(13)
[4]The Notch-Hes pathway in mammalian neural development[J]. KAGEYAMA RYOICHIRO; TOSHIYUKI OHTSUKA(Institute for Virus Research, Kyoto University, Sakyo-ku,Kyoto 606-8507 Japan). Cell Research. 1999(03)
本文編號：3104050
【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】：100 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
博萊霉素對大鼠肺組織形態(tài)學(xué)的影響（HE染色，200×）
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文.26圖2博萊霉素對大鼠肺組織膠原變化的影響（Masson染色，200×）（A、B、C為對照組，D、E、F為模型組）1.3博萊霉素上調(diào)大鼠肺組織中collagenⅢ的表達RealtimePCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠肺組織中collagenⅢmRNA表達水平由CON組的（1.0890.504）上調(diào)至BLM組的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲線發(fā)現(xiàn)collagenⅢ只有一個擴增產(chǎn)物峰，說明在此條件下，collagenⅢ基因擴增具有特異性（圖3，圖4）。另外WesternBlot結(jié)果發(fā)現(xiàn)collagenⅢ蛋白表達水平由CON組的（0.6050.026）明顯上調(diào)至BLM組的（0.9970.055）（P<0.01）（圖5）。表明肺纖維化大鼠肺組織中collagenⅢ的表達明顯升高。圖3博萊霉素對大鼠肺組織中collagenIIImRNA表達的影響（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文.26圖2博萊霉素對大鼠肺組織膠原變化的影響（Masson染色，200×）（A、B、C為對照組，D、E、F為模型組）1.3博萊霉素上調(diào)大鼠肺組織中collagenⅢ的表達RealtimePCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠肺組織中collagenⅢmRNA表達水平由CON組的（1.0890.504）上調(diào)至BLM組的（5.5360.746）（P<0.01），且分析熔解曲線發(fā)現(xiàn)collagenⅢ只有一個擴增產(chǎn)物峰，說明在此條件下，collagenⅢ基因擴增具有特異性（圖3，圖4）。另外WesternBlot結(jié)果發(fā)現(xiàn)collagenⅢ蛋白表達水平由CON組的（0.6050.026）明顯上調(diào)至BLM組的（0.9970.055）（P<0.01）（圖5）。表明肺纖維化大鼠肺組織中collagenⅢ的表達明顯升高。圖3博萊霉素對大鼠肺組織中collagenIIImRNA表達的影響（sx,n=8.**P<0.01vs.CON）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]吳茱萸次堿通過抑制Notch1/eIF3a信號通路保護博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化[J]. 高云星,蔣莉莉,張倩,左東澤,李先偉. 中國中藥雜志. 2018(17)
[2]新風(fēng)膠囊通過調(diào)節(jié)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞Notch/Jagged-HES軸改善佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠肺功能[J]. 萬磊,劉健,黃傳兵,張皖東,齊亞軍,張曉軍. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(07)
[3]Notch signaling mediated by TGF-β/Smad pathway in concanavalin A-induced liver fibrosis in rats[J]. Yi Wang,Ruo-Wu Shen,Bing Han,Zhen Li,Le Xiong,Feng-Yu Zhang,Bei-Bei Cong,Bei Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2017(13)
[4]The Notch-Hes pathway in mammalian neural development[J]. KAGEYAMA RYOICHIRO; TOSHIYUKI OHTSUKA(Institute for Virus Research, Kyoto University, Sakyo-ku,Kyoto 606-8507 Japan). Cell Research. 1999(03)
本文編號：3104050
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