發(fā)布時(shí)間：2017-04-15 23:25

  本文關(guān)鍵詞：矽肺動(dòng)物模型建立及矽肺免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制的探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 背景:矽肺的發(fā)病機(jī)制中,一般認(rèn)為肺巨噬細(xì)胞與石英(SiO2)相互作用而產(chǎn)生的諸多因子在矽肺發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到關(guān)鍵性作用。在呼吸道中,致密的黏膜上皮細(xì)胞被認(rèn)為具有重要的機(jī)械屏障作用,然而越來(lái)越多的證據(jù)證實(shí)呼吸道黏膜上皮細(xì)胞在感染和過(guò)敏原刺激中發(fā)揮關(guān)鍵性主動(dòng)防御作用。矽肺病人中普遍存在慢性炎癥反應(yīng)和機(jī)體免疫功能的紊亂。同時(shí),肺上皮細(xì)胞和肺巨噬細(xì)胞對(duì)矽肺發(fā)生發(fā)展起到不可忽視的地位。然而,SiO2在肺上皮細(xì)胞和肺巨噬細(xì)胞免疫應(yīng)答中的確切機(jī)制至今尚未清楚。 目的:闡明呼吸道上皮細(xì)胞和肺巨噬細(xì)胞在矽肺形成過(guò)程中所起的作用并初步探討其分子作用機(jī)制;初步探討CCAAT-增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-β(CCAAT-Enhancer-Binding Protein-beta, C/EBPβ)在實(shí)驗(yàn)性矽肺大鼠肺組織和人肺腺癌上皮細(xì)胞源細(xì)胞株(human pulmonary epithelial-derived cell line, A549)中的表達(dá)及其意義。探討了不同濃度石英刺激后,在人急性單核細(xì)胞性細(xì)胞株(Human acute monocytic leukemia cell line, THP-1)中人類(lèi)白細(xì)胞抗原(humam leucocyte antigen, HLA)-1, 2類(lèi)分子的表達(dá)。并試圖從炎癥和免疫兩個(gè)方面探討了矽肺的發(fā)病機(jī)制。 方法:建立大鼠矽肺模型,分別在染塵后第1、8、15、22、29、36、43、50、57和64d(天)各處死3只試驗(yàn)組和1只對(duì)照組大鼠。免疫組化SABC法檢測(cè)C/EBPβ在30例實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠和10例正常大鼠肺組織中的表達(dá),對(duì)C/EBPβ陽(yáng)性細(xì)胞的類(lèi)型、分布進(jìn)行分析。常規(guī)體外培養(yǎng)A549細(xì)胞,在細(xì)胞生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期傳代24h后加入石英生理鹽水混懸液,進(jìn)行不同濃度或時(shí)間的誘導(dǎo);運(yùn)用半定量逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcriptional polymerase chain reaction, RT-PCR)法檢測(cè)其細(xì)胞中IL-6, CRP和C/EBPβmRNA水平。常規(guī)體外培養(yǎng)THP-1細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,傳代24h后加入石英生理鹽水混懸液,進(jìn)行不同濃度或時(shí)間的誘導(dǎo);運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其細(xì)胞表面中HLA-Ⅰ,HLA-DR水平。 結(jié)果:C/EBPβ在大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺肺組織中表達(dá)較正常大鼠明顯增強(qiáng)(P0.01)。在染塵1-29天(以塵細(xì)胞灶和細(xì)胞性結(jié)節(jié)為主)和36-64天(以結(jié)節(jié)中成纖維細(xì)胞明顯增生為主)的大鼠矽肺組織中,C/EBPβ表達(dá)的程度明顯不同,差異有顯著性。培養(yǎng)的A549細(xì)胞在不同濃度和不同時(shí)間的SiO2誘導(dǎo)下,進(jìn)行IL-6、CRP、C/EBPβmRNA表達(dá)的測(cè)定,其表達(dá)呈濃度和時(shí)間的依賴(lài)性;與對(duì)照組相比,差異均有顯著性(P0.05)。培養(yǎng)的THP-1細(xì)胞在不同濃度和不同時(shí)間SiO2的誘導(dǎo)下,流式細(xì)胞儀檢測(cè)HLA-DR表達(dá)隨SiO2濃度的增加而增加。 結(jié)論:SiO2可能通過(guò)直接或間接活化巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞內(nèi)C/EBPβ,通過(guò)調(diào)控眾多下游靶基因的表達(dá)等多種途徑參與了矽肺纖維化的形成和發(fā)展。免疫組化法證實(shí)C/EBPβ在大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺肺組織內(nèi)的上皮細(xì)胞和多種炎性細(xì)胞中明顯表達(dá),提示C/EBPβ在局部的炎癥中可能起著重要作用。炎癥因子IL-6和CRP mRNA的明顯表達(dá)能客觀反應(yīng)炎癥反應(yīng)的程度。另一方面,石英可通過(guò)刺激巨噬細(xì)胞釋放相關(guān)細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞和體液免疫。綜上所述,矽肺的發(fā)生機(jī)制是一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜的過(guò)程,但炎癥反應(yīng)也即固有性免疫和適應(yīng)性免疫功能的紊亂可能對(duì)其發(fā)生和發(fā)展起到極為重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：CCAAT-增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-β 矽肺 炎癥 免疫 HLA-DR
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R135.2;R-332
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 實(shí)驗(yàn)流程14-15
• 第一部分:固有性免疫-C/EBPβ 在實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠炎癥發(fā)生和在細(xì)胞株 A549 中的表達(dá)及其意義15-39
• 3 材料與方法15-26
• 實(shí)驗(yàn)材料15-19
• 實(shí)驗(yàn)方法19-26
• 4 結(jié)果26-39
• 第二部分:適應(yīng)性免疫-HLA-Ⅰ和 HLA-DR 類(lèi)分子在體外單核細(xì)胞株 THP-1 中的表達(dá)及其意義39-46
• 3 材料與方法40-44
• 實(shí)驗(yàn)材料40-41
• 實(shí)驗(yàn)方法41-44
• 4 結(jié)果44-46
• 討論46-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-55
• 附錄55-57
• 致謝57-58
• 綜述58-71
• 參考文獻(xiàn)68-71

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張萍;;護(hù)理干預(yù)對(duì)矽肺患者生命質(zhì)量的影響[J];當(dāng)代護(hù)士(專(zhuān)科版);2011年05期

  本文關(guān)鍵詞：矽肺動(dòng)物模型建立及矽肺免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制的探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：309520