目的目前矽肺發(fā)病機(jī)制尚未闡明,其預(yù)防和控制是中國(guó)職業(yè)病防治工作的重要任務(wù)之一。普遍認(rèn)為,在矽塵等多種因素作用下,肺泡Ⅲ型上皮細(xì)胞通過(guò)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細(xì)胞,大量增殖并分泌膠原等相關(guān)蛋白,是肺纖維化發(fā)生發(fā)展中重要的生物學(xué)事件。以往研究表明,miR-34a-5p 及其靶基因 SMAD4（drosophila mothers against decapentaplegichomolog4）共同參與了腫瘤和肝纖維化等疾病的EMT過(guò)程中,可能是EMT過(guò)程的重要環(huán)節(jié)和潛在干預(yù)靶點(diǎn)。然而,其在矽肺相關(guān)EMT過(guò)程中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,構(gòu)建SiO2粉塵誘導(dǎo)的小鼠矽肺模型和體外肺上皮細(xì)胞EMT模型,觀察miR-34a-5p和SMAD4在其中的存在狀況和變化情況,并采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)對(duì)miR-34a-5p和SMAD4進(jìn)行干預(yù)以進(jìn)一步研究其在EMT中的生物學(xué)作用,為深入探索矽肺發(fā)病機(jī)制提供新的思路和參考依據(jù)。方法1.矽肺小鼠EMT過(guò)程中miR-34a-5p存在狀況實(shí)驗(yàn)觀察C57BL6/N品系小鼠隨機(jī)分成不同時(shí)間點(diǎn)（包括... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１不同時(shí)間段小鼠肺組織ＨＥ、Ｍａｓｓｏｎ染色結(jié)果（ｘ２００）??

????３．１．２小鼠肺組織中ＥＭＴ相關(guān)基因表達(dá)情況??ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測(cè)了上皮標(biāo)志物Ｅ－ｃａｄ及間充質(zhì)標(biāo)志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ的??ｍＲＮＡ相對(duì)表達(dá)水平，結(jié)果見(jiàn)圖３．２和表３．１。結(jié)果顯示：與生理鹽水對(duì)照組相??比，在Ｓｉ０２處理的第５６天小鼠肺組織中上皮標(biāo)志物Ｅ－ｃａｄ?ｍＲＮＡ表達(dá)下調(diào)??（尸＜０．０５）；間質(zhì)標(biāo)志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ?ｍＲＮＡ表達(dá)升高（ＰＯ．０５）。??〇?２〇＂｜?■Ｓａｌｉｎｅ??？５??￡?？?ｃ?＊?＊?Ｄ?Ｓｉｌｉｃａ??ａ１－５＇?Ｔ?工??ＩＭＩ??Ｅ－ｃａｄ?Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?ａ－ＳＭＡ??圖３．２小鼠肺組織中ＥＭＴ相關(guān)基因ｍＲＮＡ表達(dá)情況??注：＊表示與對(duì)照組相比，尸＜０．０５。??表３．１小鼠肺組織中ＥＭＴ相關(guān)基因ｍＲＮＡ表達(dá)情況（??基因?Ｓａｌｉｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｔ?Ｐ??Ｅ－ｃａｄ?１．００±０．０７?０．７７士０．１３＊?５．９０３?０．０２３??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?１．００±０．１０?１．３７?士０．１２＊?－３．９００?０．０１８??ａ－ＳＭＡ?１．００?士?０．１１?１．３４?士?０．０５＊?－４．８０６?０．００９??注：＊表示與對(duì)照組相比，??ＷＢ檢測(cè)了上皮標(biāo)志物Ｅ－ｃａｄ及間充質(zhì)標(biāo)志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ的蛋白相??對(duì)表達(dá)水平，結(jié)果見(jiàn)圖３．３和表３．２。結(jié)果顯示：與生理鹽水對(duì)照組相比，在Ｓｉ０２??處理的第５６天小鼠肺組織中上皮標(biāo)志物Ｅ－ｃａｄ蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（Ｐ＜０．０５）；??間質(zhì)標(biāo)志物ａ－ＳＭＡ蛋白表達(dá)升高（Ｐ＜０．０５）。此外，免疫熒光法檢測(cè)了上皮標(biāo)??２５??

?＾???志物Ｅ－ｃａｄ表達(dá)水平，結(jié)果見(jiàn)圖３．４。結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠肺??組織中Ｅ－ｃａｄ表達(dá)降低。這與Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果相一致。??｜?２０?■Ｓａｌｉｎｅ??ＳａＭｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｌ１＇５＇?自?Ｄ?■??Ｅ－ｃａｄ?—?一細(xì)一?｜?�。常担耄�?｜?１〇＿?■?？?■??ａ－ＳＭＡ?｜咖》］?４２ｋＤａ?｜?０．５－?■?＇?Ｋ?；??Ｐ－ａｃｔｉｎ?ｉ?ｉ?？?４２ｋＤａ?ｉ?〇?〇．?＿ＩＴ?９＿ＪＨｔ?９?＿??Ｅ－ｃａｄ?ｕ－ＳＭＡ??圖３．３小鼠肺組織中ＥＭＴ相關(guān)基因蛋白表達(dá)情況??注：＊表示與對(duì)照組相比，／＞＜〇．〇５。??表３．２小鼠肺組織中ＥＭＴ相關(guān)基因蛋白表達(dá)情況（Ｓｂ，ｎ＝３）??基因?Ｓａｌｉｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｔ?Ｐ??Ｅ－ｃａｄ?１．００?土０．０２?０．７１土０．０３＊?１９．１８８?＜０．００１???ａ－ＳＭＡ?１．００?士?０．０３?１．５０?士?０．０５＊?－１６．２６３?＜０．００１??注：＊表示與對(duì)照組相比，Ｐ＜０．０５。??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?ＤＡＰｌ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｕｍ??？■??圖３．４小鼠肺組織中Ｅ－ｃａｄ表達(dá)??２６??

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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