目的:通過減毒活菌卡介苗干預(yù)支氣管哮喘小鼠,觀察支氣管哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞數(shù)量的改變以及病理切片中肺部炎癥情況,脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-γ細胞因子水平的改變,血清中IgE水平的變化,肺組織Toll樣受體4表達的變化,探討Toll樣受體4介導(dǎo)的減毒活菌卡介苗在支氣管哮喘免疫治療中的作用,為減毒活菌卡介苗的作用機制提供依據(jù)。方法:昆明小鼠以卵白蛋白致敏激發(fā)建立哮喘模型并小劑量減毒活菌卡介苗接種,最后一次抗原激發(fā)24小時內(nèi)留取所需標(biāo)本。收集支氣管肺泡灌洗液,計數(shù)支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞的數(shù)量。肺組織病理切片觀察哮喘小鼠肺組織炎癥情況及特征性嗜酸性粒細胞。制備脾細胞懸液,ELISA法檢測脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-γ細胞因子的含量。左心室采血,ELISA法檢測血清中IgE的含量。Western Blotting、免疫組織化學(xué)、RT-PCR檢測肺組織Toll樣受體4的表達。結(jié)果:（1）卡介苗觀察組小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)與嗜酸粒細胞數(shù)量與哮喘組小鼠相比明顯減少,肺組織病理切片顯示氣道炎癥明顯減輕。（2）EL... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

哮端組小鼠肺組織病理切片BE染色(油鏡)

4么1肺組織中TLR4蛋白表達的，陽， ternmo川ng鑒定減毒活菌卡介苗干預(yù)后，各組小鼠肺組織中TLR4蛋白表達的WestemBlotting鑒定，由圖5可見，TLR4蛋白在空白對照組的肺組織中僅有微量的表達，哮喘發(fā)病組中TLR4蛋白的表達量較對照組略有升高，而BCG觀察組中TLR4蛋白的表達量較前兩組均有顯著的增強。表3可見，各組TLR4蛋白表達的相對總灰度值。Ant卜TLR4Anti。GAPDH為空白對照組，2為哮喘發(fā)病組，3為BCG觀察組，G舒DH蛋白為內(nèi)參照。圖5各組小鼠肺組織中Tu“蛋白表達的研怡 ternBlo咐.9鑒定表3小鼠肺組織中TLR4蛋白表達的v傀

【參考文獻】：
期刊論文
[1]TLR4介導(dǎo)HSP70BCG誘導(dǎo)的小鼠骨髓樹突狀細胞分泌IL-12[J]. 孫光,杜桂清,郭連英,沈潔,劉丹丹,施廣霞,錢振超.  免疫學(xué)雜志. 2006(06)
[2]BCG干預(yù)對哮喘小鼠調(diào)節(jié)性T細胞生成的影響[J]. 夏煜,張建華,季正華,李曉狄,郁志偉,劉海燕.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2006(05)
[3]Toll樣受體（TLRs）的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與免疫調(diào)節(jié)[J]. 王海坤,韓代書.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2006(09)
[4]TLR介導(dǎo)BCG和豬苓多糖激活巨噬細胞株J774 NF-κB的表達[J]. 曾星,王鎵,蔡萃,黃羽,張嫻.  免疫學(xué)雜志. 2006(05)
[5]Toll樣受體與支氣管哮喘免疫調(diào)控[J]. 蘇苗賞,李昌崇.  國外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊). 2005(02)
[6]卡介苗誘導(dǎo)膀胱癌T24細胞表達鐘聲蛋白樣受體和產(chǎn)生細胞因子的研究[J]. 李響,龔志勇,李虹,魏強,石明,楊宇如.  中華外科雜志. 2004(03)
[7]Tol1樣受體—一個新發(fā)現(xiàn)的介導(dǎo)天然免疫的古老家族（下）[J]. 唐軍.  國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊). 2001(02)



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