發(fā)布時(shí)間：2021-02-22 05:06

　　目的:通過(guò)減毒活菌卡介苗干預(yù)支氣管哮喘小鼠,觀察支氣管哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量的改變以及病理切片中肺部炎癥情況,脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-γ細(xì)胞因子水平的改變,血清中IgE水平的變化,肺組織Toll樣受體4表達(dá)的變化,探討Toll樣受體4介導(dǎo)的減毒活菌卡介苗在支氣管哮喘免疫治療中的作用,為減毒活菌卡介苗的作用機(jī)制提供依據(jù)。方法:昆明小鼠以卵白蛋白致敏激發(fā)建立哮喘模型并小劑量減毒活菌卡介苗接種,最后一次抗原激發(fā)24小時(shí)內(nèi)留取所需標(biāo)本。收集支氣管肺泡灌洗液,計(jì)數(shù)支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量。肺組織病理切片觀察哮喘小鼠肺組織炎癥情況及特征性嗜酸性粒細(xì)胞。制備脾細(xì)胞懸液,ELISA法檢測(cè)脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-γ細(xì)胞因子的含量。左心室采血,ELISA法檢測(cè)血清中IgE的含量。Western Blotting、免疫組織化學(xué)、RT-PCR檢測(cè)肺組織Toll樣受體4的表達(dá)。結(jié)果:（1）卡介苗觀察組小鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)與嗜酸粒細(xì)胞數(shù)量與哮喘組小鼠相比明顯減少,肺組織病理切片顯示氣道炎癥明顯減輕。（2）EL... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

哮端組小鼠肺組織病理切片BE染色(油鏡)

4么1肺組織中TLR4蛋白表達(dá)的，陽(yáng)， ternmo川ng鑒定減毒活菌卡介苗干預(yù)后，各組小鼠肺組織中TLR4蛋白表達(dá)的WestemBlotting鑒定，由圖5可見(jiàn)，TLR4蛋白在空白對(duì)照組的肺組織中僅有微量的表達(dá)，哮喘發(fā)病組中TLR4蛋白的表達(dá)量較對(duì)照組略有升高，而B(niǎo)CG觀察組中TLR4蛋白的表達(dá)量較前兩組均有顯著的增強(qiáng)。表3可見(jiàn)，各組TLR4蛋白表達(dá)的相對(duì)總灰度值。Ant卜TLR4Anti。GAPDH為空白對(duì)照組，2為哮喘發(fā)病組，3為BCG觀察組，G舒DH蛋白為內(nèi)參照。圖5各組小鼠肺組織中Tu“蛋白表達(dá)的研怡 ternBlo咐.9鑒定表3小鼠肺組織中TLR4蛋白表達(dá)的v傀

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TLR4介導(dǎo)HSP70BCG誘導(dǎo)的小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞分泌IL-12[J]. 孫光,杜桂清,郭連英,沈潔,劉丹丹,施廣霞,錢(qián)振超.  免疫學(xué)雜志. 2006(06)
[2]BCG干預(yù)對(duì)哮喘小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞生成的影響[J]. 夏煜,張建華,季正華,李曉狄,郁志偉,劉海燕.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2006(05)
[3]Toll樣受體（TLRs）的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與免疫調(diào)節(jié)[J]. 王海坤,韓代書(shū).  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2006(09)
[4]TLR介導(dǎo)BCG和豬苓多糖激活巨噬細(xì)胞株J774 NF-κB的表達(dá)[J]. 曾星,王鎵,蔡萃,黃羽,張嫻.  免疫學(xué)雜志. 2006(05)
[5]Toll樣受體與支氣管哮喘免疫調(diào)控[J]. 蘇苗賞,李昌崇.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊(cè)). 2005(02)
[6]卡介苗誘導(dǎo)膀胱癌T24細(xì)胞表達(dá)鐘聲蛋白樣受體和產(chǎn)生細(xì)胞因子的研究[J]. 李響,龔志勇,李虹,魏強(qiáng),石明,楊宇如.  中華外科雜志. 2004(03)
[7]Tol1樣受體—一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的介導(dǎo)天然免疫的古老家族（下）[J]. 唐軍.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè)). 2001(02)



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