SARS患者臨床標本中脊髓灰質(zhì)炎病毒及呼腸病毒的研究
發(fā)布時間：2021-01-23 17:41
嚴重急性呼吸綜合征（SARS）作為一種新發(fā)傳染病,2003年4月WHO已正式宣布SARS-冠狀病毒（SARS-CoV,SARS Coronavirus）是導致SARS的病原體。然而2003年軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所卻從北京第一例確診SARS患者及其母親的咽拭子標本中分離到了呼腸病毒,在我們進一步研究呼腸病毒的基因序列時,卻意外的在標本中檢測到了脊髓灰質(zhì)炎病毒。為了進一步研究SARS的病原學,我們采用細胞培養(yǎng)法、RT-PCR、中和試驗、血清學檢測等方法對SARS患者發(fā)病時及痊愈2年后的臨床標本進行呼腸病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒的分離鑒定。 在SARS發(fā)病時,我們利用HEp-2細胞對4份確診SARS患者的咽拭子標本進行病毒分離,接種后細胞均在培養(yǎng)第3d開始出現(xiàn)細胞病變效應。采用隨機引物RT-PCR對細胞培養(yǎng)上清液進行了病毒核酸擴增,結果在4份標本中擴增出了脊髓灰質(zhì)炎病毒,3份標本中擴增到了呼腸病毒,4份咽拭子標本接種HEp-2細胞后,細胞病變均不能被呼腸病毒1、2、3型抗血清中和,但卻可以被含有1型脊髓灰質(zhì)炎病毒的混合標準抗血清中和,中和試驗結果顯示這4份咽拭子標本中均含有Ⅰ型脊髓灰質(zhì)炎...
【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市
【文章頁數(shù)】：108 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
脊髓灰質(zhì)炎病毒PcR產(chǎn)物克隆至-Taeys載體后Eocul酶切產(chǎn)物的電泳圖譜
了逆轉錄PcR擴增病毒核酸，擴增產(chǎn)物經(jīng)克隆至Taeys載:在4份標本中均擴增出了脊髓灰質(zhì)炎病毒基因片段，在3D、YU)中擴增出了呼腸病毒基因片段。髓灰質(zhì)炎病毒PcR產(chǎn)物克隆至-Taeys載體后Eocul酶切產(chǎn)物的電
圖5.脊髓灰質(zhì)炎病毒突變位點的測序結果及圖譜(2)新分離呼腸病毒52、S3、54、L3片段的序列測定及分析:隨機引物錨定PCR法擴增新分離呼腸病毒基因組并克隆至-Taesy載體后測序，結果顯示:所擴增的部分呼腸病毒核普酸序列與GneeBakn中己知的呼腸病毒1、2、3型的核昔酸序列具有高度同源性，新分離呼腸病毒52、S3、54、L3片段的全基因組核普酸序列，與GneeBakn中呼腸病毒1、2、3型核普酸序列的同源性分別為83%一92%、74%一79%和85%一9k20r;根據(jù)其核普酸序列推定的相應氨基酸序列與呼腸病毒1、2、3型的同源性分別為95%一99%、85%一96%和95%一99%，詳細結果見表6。表7.52、53、54、L3序列與呼腸病毒l、2、3型同源性比較核營酸同源性(%)氨基酸同源性(%)R3一98959599R2一9585%90只︸︸、︸︸、︶，ng9Q聲Q了R3一858785R292一79777674﹃氣了j︸I口，‘O八O八O八QRx一5352L3S4
【參考文獻】：
期刊論文
[1]新分離呼腸病毒的致病性及其與SARS相關性的實驗動物研究[J]. 朱虹,何君,何誠,甘永華,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2004(03)
[2]中國急性弛緩性麻痹（AFP）病例中脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗株VP1區(qū)基因變異的研究[J]. 張勇,祝雙利,趙蓉,李杰,陳立,侯曉輝,王東艷,張禮璧,許文波. 病毒學報. 2004(01)
[3]SARS患者雙份血清中抗呼腸病毒和冠狀病毒中和抗體的測定[J]. 朱虹,貌盼勇,何君,馬靜,胡燕,朱雷,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2004(01)
[4]新分離呼腸病毒BYD1株實驗感染食蟹猴動物模型的初步建立[J]. 朱虹,左庭婷,何君,甘永華,檀華,張浩杰,宋立華,黃如統(tǒng),周育森,端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(05)
[5]再次從SARS患者肺組織中分離與檢出呼腸病毒[J]. 楊怡,李衛(wèi)華,端青,朱虹,郎振為,孟忻,張德添,何昆,周濤,張颯,陳德蕙. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(04)
[6]從SARS患者標本中分離的呼腸病毒的分純及鑒定[J]. 左庭婷,檀華,何君,朱虹,張浩杰,宋立華,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(04)
[7]呼腸病毒,在SARS患者中分離與初步鑒定[J]. 端青,朱虹,楊怡,李衛(wèi)華,周育森,何君,何昆,張浩杰,周濤,宋立華,甘永華,檀華,靳寶鋒,李慧艷,左庭婷,陳德蕙,張學敏. 科學通報. 2003(13)
[8]初步實行計劃免疫地區(qū)健康人群脊髓灰質(zhì)炎病毒攜帶狀況研究[J]. 方正杰,邱炳光,程賢,陳鴻就,吳志雄,王彬. 廣東衛(wèi)生防疫. 1998(02)
[9]河北省健康人群脊髓灰質(zhì)炎中和抗體水平和腸道病毒攜帶狀況監(jiān)測[J]. 張振國,宋慧軍,陳玫,劉蘭芬,郭彧. 疾病監(jiān)測. 1995(05)
本文編號：2995633
【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市
【文章頁數(shù)】：108 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
脊髓灰質(zhì)炎病毒PcR產(chǎn)物克隆至-Taeys載體后Eocul酶切產(chǎn)物的電泳圖譜
了逆轉錄PcR擴增病毒核酸，擴增產(chǎn)物經(jīng)克隆至Taeys載:在4份標本中均擴增出了脊髓灰質(zhì)炎病毒基因片段，在3D、YU)中擴增出了呼腸病毒基因片段。髓灰質(zhì)炎病毒PcR產(chǎn)物克隆至-Taeys載體后Eocul酶切產(chǎn)物的電
圖5.脊髓灰質(zhì)炎病毒突變位點的測序結果及圖譜(2)新分離呼腸病毒52、S3、54、L3片段的序列測定及分析:隨機引物錨定PCR法擴增新分離呼腸病毒基因組并克隆至-Taesy載體后測序，結果顯示:所擴增的部分呼腸病毒核普酸序列與GneeBakn中己知的呼腸病毒1、2、3型的核昔酸序列具有高度同源性，新分離呼腸病毒52、S3、54、L3片段的全基因組核普酸序列，與GneeBakn中呼腸病毒1、2、3型核普酸序列的同源性分別為83%一92%、74%一79%和85%一9k20r;根據(jù)其核普酸序列推定的相應氨基酸序列與呼腸病毒1、2、3型的同源性分別為95%一99%、85%一96%和95%一99%，詳細結果見表6。表7.52、53、54、L3序列與呼腸病毒l、2、3型同源性比較核營酸同源性(%)氨基酸同源性(%)R3一98959599R2一9585%90只︸︸、︸︸、︶，ng9Q聲Q了R3一858785R292一79777674﹃氣了j︸I口，‘O八O八O八QRx一5352L3S4
【參考文獻】：
期刊論文
[1]新分離呼腸病毒的致病性及其與SARS相關性的實驗動物研究[J]. 朱虹,何君,何誠,甘永華,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2004(03)
[2]中國急性弛緩性麻痹（AFP）病例中脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗株VP1區(qū)基因變異的研究[J]. 張勇,祝雙利,趙蓉,李杰,陳立,侯曉輝,王東艷,張禮璧,許文波. 病毒學報. 2004(01)
[3]SARS患者雙份血清中抗呼腸病毒和冠狀病毒中和抗體的測定[J]. 朱虹,貌盼勇,何君,馬靜,胡燕,朱雷,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2004(01)
[4]新分離呼腸病毒BYD1株實驗感染食蟹猴動物模型的初步建立[J]. 朱虹,左庭婷,何君,甘永華,檀華,張浩杰,宋立華,黃如統(tǒng),周育森,端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(05)
[5]再次從SARS患者肺組織中分離與檢出呼腸病毒[J]. 楊怡,李衛(wèi)華,端青,朱虹,郎振為,孟忻,張德添,何昆,周濤,張颯,陳德蕙. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(04)
[6]從SARS患者標本中分離的呼腸病毒的分純及鑒定[J]. 左庭婷,檀華,何君,朱虹,張浩杰,宋立華,黃如統(tǒng),端青. 軍事醫(yī)學科學院院刊. 2003(04)
[7]呼腸病毒,在SARS患者中分離與初步鑒定[J]. 端青,朱虹,楊怡,李衛(wèi)華,周育森,何君,何昆,張浩杰,周濤,宋立華,甘永華,檀華,靳寶鋒,李慧艷,左庭婷,陳德蕙,張學敏. 科學通報. 2003(13)
[8]初步實行計劃免疫地區(qū)健康人群脊髓灰質(zhì)炎病毒攜帶狀況研究[J]. 方正杰,邱炳光,程賢,陳鴻就,吳志雄,王彬. 廣東衛(wèi)生防疫. 1998(02)
[9]河北省健康人群脊髓灰質(zhì)炎中和抗體水平和腸道病毒攜帶狀況監(jiān)測[J]. 張振國,宋慧軍,陳玫,劉蘭芬,郭彧. 疾病監(jiān)測. 1995(05)
本文編號：2995633
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