目的：檢測支氣管哮喘患者外周血淋巴細胞DNA損傷和血漿MPO、MDA含量,探討DNA損傷與氧化應(yīng)激的相關(guān)性,從而為哮喘的防治提供新的思路。方法：1.以支氣管哮喘患者為研究對象,20例重癥哮喘患者作為重度組,9例輕度哮喘患者作為輕度組、9例健康體檢者作為正常組。肘靜脈采血檢測淋巴細胞DNA損傷及血漿MPO、MDA含量。2.彗星實驗檢測淋巴細胞DNA損傷：枸櫞酸化的靜脈血2ml與HanK’s液2ml混勻,小心加于2ml淋巴細胞分離液的表面上,1500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘,收集分界處淋巴細胞,再次1500轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,收集新鮮的淋巴細胞沉淀20μl與0.7%低熔點凝膠75μl混勻后,鋪于預(yù)先鋪有加熱的1%正常熔點凝膠的載玻片上,加蓋玻片,40℃冷藏放置10分鐘使膠牢固。移去蓋玻片,將載玻片放入預(yù)冷的細胞裂解混懸液中,40℃下裂解至少1小時。取出載玻片用生理鹽水漂洗兩次,置入堿性電泳緩沖液中,’室溫放置20分鐘使DNA堿解旋,然后電泳（25 V/300 mA,20 min）。電泳后取出載玻片,生理鹽水漂洗兩次。溴化乙錠避光染色（70μl/玻片）10分鐘。應(yīng)用熒光顯微鏡（激發(fā)光波長515-5... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組淋巴細胞ONA的損傷

表1彗星實驗各組尾長變化(x士s)Table1TheehangeoftailIengthineaehgrouPintheCometassay組別正常組輕度組重度組F值例數(shù)(n)992O尾長印x)0.59士0.31*2.7升0.49*‘35.93士0.76▲14133.26注:▲與正常組比較，P<0.05;*與重度組比較，P<0.05

圖3彗星實驗各組尾距比較Figure3ComParisonoftailmomentineachgrouPintheCometassay2.各組病人血漿MPO含量變化(見表3)哮喘急性發(fā)作期重度組、輕度組血漿MPO含量明顯高于正常組，顯著性差異(p<0.05);隨哮喘發(fā)作程度加重，MPO含量增加，重度組輕度組比較，重度組明顯高于輕度組，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理有明顯差異(P<0.05


本文編號：2920863