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VitC、NAC對(duì)C 2 C 12 細(xì)胞增殖和凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-12-06 23:31
  目的:制備慢性阻塞性肺疾。–OPD)大鼠模型,觀察膈肌、趾長(zhǎng)伸肌的凋亡率以及各試驗(yàn)組血清中丙二醛的含量;以抗氧化劑VitC、N-乙酰半胱氨酸(NAC)對(duì)體外培養(yǎng)的骨骼肌成肌細(xì)胞(C2C12)進(jìn)行干預(yù),探討抗氧化劑對(duì)C2C12細(xì)胞增殖、凋亡的影響。方法:經(jīng)檢疫合格的Wistar單純雄性大鼠100只隨機(jī)分為模型組80只,對(duì)照組20只。模型組采用熏香煙加氣管內(nèi)滴入豬胰彈性蛋白酶(PPE)的方法建立COPD大鼠模型;對(duì)照組不熏香煙,在模型組氣管內(nèi)注入PPE的同時(shí)采用同一術(shù)式在氣管內(nèi)注入等量的無(wú)菌生理鹽水,其它飼養(yǎng)條件等同。模型制作成功后,以低于對(duì)照組大鼠平均體重的90%作為判斷發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn),將大鼠重新分為健康對(duì)照組、COPD模型營(yíng)養(yǎng)正常組、COPD模型營(yíng)養(yǎng)不良組共三組,行肺功能測(cè)定處死大鼠后,每組隨機(jī)選取18只大鼠取血清、膈肌以及趾長(zhǎng)伸肌標(biāo)本,進(jìn)行以下測(cè)定:1.采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法測(cè)定血清中丙二醛(MDA)的含量;2.脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)測(cè)定大鼠膈肌... 

【文章來(lái)源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2C12細(xì)胞">        1.1.2 C2C12細(xì)胞
        1.1.3 主要試劑
        1.1.4 主要儀器
    1.2 方法
        1.2.1 分組及編號(hào)
        1.2.2 溶液配置
        1.2.3 構(gòu)建COPD模型
        1.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)及干預(yù)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第二章 結(jié)果
    2.1 COPD模型判定
        2.1.1 大鼠一般情況
        2.1.2 肺組織病理改變
        2.1.3 肺功能檢測(cè)
        2.1.4 體重變化趨勢(shì)
    2.2 血清丙二醛測(cè)定
    2.3 TUNEL法測(cè)定骨骼肌凋亡
2C12生長(zhǎng)曲線">    2.4 MTT法繪制C2C12生長(zhǎng)曲線
        2.4.1 細(xì)胞干預(yù)時(shí)OD值
        2.4.2 無(wú)干預(yù)的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
        2.4.3 細(xì)胞在過(guò)氧化氫培養(yǎng)中的生長(zhǎng)曲線
        2.4.4 干預(yù)組細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線
    2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
第三章 討論
    3.1 COPD模型制備及評(píng)價(jià)
    3.2 COPD模型組氧化應(yīng)激水平和骨骼肌凋亡
    3.3 抗氮化劑對(duì)成肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄一
    附圖1 實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織病理學(xué)圖片
    附圖2 膈肌、趾長(zhǎng)伸肌凋亡圖
    附圖3 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
2C12細(xì)胞生長(zhǎng)情況">    附圖4 36h實(shí)驗(yàn)組C2C12細(xì)胞生長(zhǎng)情況
2C12細(xì)胞凋亡圖">    附圖5 C2C12細(xì)胞凋亡圖
附錄二 綜述
致謝



本文編號(hào):2902192

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