發(fā)布時(shí)間：2020-10-28 08:43

　　 目的 觀察哮喘小鼠氣道Clara細(xì)胞主要分泌蛋白CC16表達(dá)以及布地奈德和孟魯司特干預(yù)后對(duì)其的影響,探討CC16在哮喘發(fā)病中的作用。 方法 取96只BALB/C小鼠,隨機(jī)分為4組:哮喘模型組(A組),布地奈德干預(yù)組(B組),孟魯司特干預(yù)組(C組),正常對(duì)照組(D組),每組24只。除對(duì)照組外,其余3組小鼠分別在第0、7d腹腔注射卵清蛋白(OVA)混懸液0.5 mL(含OVA 100μg,氫氧化鋁凝膠400μg)致敏,第14d起以10g/L OVA溶液50mL超聲霧化激發(fā),每日30min,連續(xù)7d。孟魯司特組在霧化吸入后1小時(shí)按6 mg/kg口服孟魯司特4周;布地奈德組在霧化吸入后1小時(shí)吸入布地奈德混懸液30 min(布地奈德原液2ml+NS3ml),連續(xù)4周;正常對(duì)照組:小鼠第0和第7d腹腔注射生理鹽水0.5 mL,第14d起以生理鹽水50mL溶液超聲霧化,每天30min,連續(xù)7d。每周各組各處死6只小鼠,連續(xù)4周。4組小鼠眼球摘除采血,取血清,采用ELISA(酶聯(lián)免疫)法測分泌類蛋白(CC16)。左肺組織用10%甲醛固定后常規(guī)石蠟包埋切片,部分行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察炎癥細(xì)胞的浸潤;部分行免疫組化觀察肺組織CC16表達(dá);右肺組織RT-PCR檢測CC16mRNA表達(dá)。 結(jié)果 1、各組小鼠外周血CC16蛋白表達(dá) 第1、2、3周A、B、C三組CC16蛋白OD值均顯著低于D組(P＜0.05),第4周CC16蛋白OD值四組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05):B組、C組與A組比較僅第1周有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);A、B、C三組隨時(shí)間延長CC16蛋白OD值均顯著升高(P＜0.05),D組隨時(shí)間延長CC16蛋白OD值無顯著變化(P＞0.05)。 2、各組小鼠肺組織CC16蛋白免疫組化 第1、2、3、4周A、B、C三組CC16蛋白免疫組化灰度值均顯著高于D組(P＜0.05);B組各周灰度值均顯著低于A組(P＜0.05);C組與A組比較僅第4周有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),而C組與B組比較僅第4周無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);A、B、C三組隨時(shí)間延長CC16蛋白免疫組化灰度值均顯著降低(P＜0.05),D組隨時(shí)間延長CC16蛋白免疫組化灰度值無顯著變化(P＞0.05)。 3、各組小鼠肺組織CC16mRNA表達(dá) 第1、2、3、4周A、B、C三組CC16mRNA表達(dá)量均顯著低于D組(P＜0.05);B組各周CC16mRNA表達(dá)量均顯著高于A組(P＜0.05);C組CC16mRNA表達(dá)量僅第1、第4周顯著高于A組(P＜0.05),而C組與B組比較僅第1周無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);A、B、C三組隨時(shí)間延長CC16mRNA表達(dá)量均顯著增加(P＜0.05),D組隨時(shí)間延長CC16mRNA表達(dá)量無顯著變化(P＞0.05)。 4、小鼠外周血CC16蛋白與肺組織CC16mRNA表達(dá)總體相關(guān)性 外周血CC16蛋白與肺組織CC16mRNA表達(dá)總體呈正相關(guān)(r=0.777,p＜0.0001)。 結(jié)論 1、哮喘小鼠肺組織內(nèi)CC16mRNA表達(dá)水平和外周血CC16蛋白濃度均降低,且隨肺部炎癥細(xì)胞增多而逐漸降低,因此CC16可作為反映哮喘氣道炎癥的指標(biāo)。 2、吸入性糖皮質(zhì)激素(布地奈德)干預(yù)可以顯著增加哮喘小鼠CC16蛋白的表達(dá),且隨治療時(shí)間延長CC16表達(dá)增加更加明顯,抗哮喘氣道炎癥的作用更強(qiáng)。 3、自三烯受體拮抗劑(孟魯司特)干預(yù)4周以上可以增加CC16蛋白表達(dá)水平;起效較布地奈德慢,到4周后效果與布地奈德相似。 4、外周血CC16和肺組織CC16 mRNA表達(dá)情況呈正相關(guān),故其能反映肺組織CC16 mRNA表達(dá),可間接反映哮喘炎癥的嚴(yán)重程度。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R562.25
【部分圖文】：

圖25C組第三周(免疫組化染色x400)圖26c組第四周(免疫組化染色x400)三、各組小鼠肺組織CCI6mRNA表達(dá)情況第一周A組、B組、C組、D組小鼠肺組織CC16m丑NA表達(dá)量均數(shù)差異有學(xué)意義(F=103.3s2，P<o.0001)。A組、B組、e組ee一6mRNA表達(dá)量顯著低于。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);B組和C組均高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0但B組與C組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第二周各組小鼠肺組織ccl6lnRNA表達(dá)量均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(介6P<0.oool)。A組、B組、c組ccl6mRNA表達(dá)量顯著低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(尸<0.05);B組高于A組與C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C組與A異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。第三周各組小鼠肺組織CC16mRNA表達(dá)量均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(介50P<0.0001)。A組、B組、c組cc16mRNA表達(dá)量顯著低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

圖25C組第三周(免疫組化染色x400)圖26c組第四周(免疫組化染色x400)三、各組小鼠肺組織CCI6mRNA表達(dá)情況第一周A組、B組、C組、D組小鼠肺組織CC16m丑NA表達(dá)量均數(shù)差異有學(xué)意義(F=103.3s2，P<o.0001)。A組、B組、e組ee一6mRNA表達(dá)量顯著低于。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);B組和C組均高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0但B組與C組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第二周各組小鼠肺組織ccl6lnRNA表達(dá)量均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(介6P<0.oool)。A組、B組、c組ccl6mRNA表達(dá)量顯著低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(尸<0.05);B組高于A組與C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C組與A異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。第三周各組小鼠肺組織CC16mRNA表達(dá)量均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(介50P<0.0001)。A組、B組、c組cc16mRNA表達(dá)量顯著低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

哮喘CC16表達(dá)及糖皮質(zhì)激索和白三烯受體拮抗劑影響的實(shí)驗(yàn)褚講究結(jié)果高于第1周差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義第4周表達(dá)量最高，(尸<0.05);第2周與第3周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0.05)與第2、3周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05)。C組小鼠四周肺組織CC16mRNA表達(dá)量均數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=12.o一9尹<0.0001)。第2周表達(dá)與第1、第3周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>o.05);第3周CC16mRNA表達(dá)量顯著高于第1周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);第4周表達(dá)量最高，與第1、2、3周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05)。D組小鼠四周肺組織ccl6mRNA表達(dá)量均數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=o.176，p一0.911)。l見表IB、圖IBI
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2859856