發(fā)布時間：2020-10-15 20:53

　　 目的:觀察急性肺損傷(acute lung injury,ALI)患者血清誘導(dǎo)的人Ⅱ型肺泡上皮細胞(typeⅡalveolar epithelial cells,ATⅡ細胞)間隙連接蛋白Connexin43(Cx43)及其mRNA表達的變化;研究連續(xù)性血液凈化(continuous blood purification,CBP)對其表達Cx43及其mRNA的影響和可能機制。 方法:①分別用健康志愿者清晨空腹血清及重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)伴ALI患者行CBP治療前、治療6 h、治療20 h時的血清于體外誘導(dǎo)培養(yǎng)人ATⅡ細胞(A549細胞)48 h,采用免疫熒光法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)半定量法檢測四組細胞Cx43及其mRNA的表達;②采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測健康志愿者清晨空腹血清及患者CBP治療不同時間點血清的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平,探討其與該血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43 mRNA表達的相關(guān)性。 結(jié)果:①倒置顯微鏡顯示患者CBP治療前血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞生長緩慢,呈衰老征象;免疫熒光法及RT-PCR顯示ALI患者行CBP治療前的血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43及其mRNA的表達明顯少于健康對照組(P0.01);②倒置顯微鏡顯示隨患者行CBP治療時間的延長,患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞生長逐漸加快,形態(tài)逐漸恢復(fù)至接近健康對照組。免疫熒光法及RT-PCR顯示CBP治療6 h及20 h時患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43及其mRNA的表達明顯多于治療前組(P0.01);CBP治療20 h時患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43 mRNA的表達明顯多于治療6 h組(P0.01);③ELISA顯示CBP治療前后患者各時間點血清TNF-α水平均高于健康對照組,CBP治療6 h及20 h時患者血清TNF-α水平明顯低于治療前組(P0.01);CBP治療20 h時患者血清TNF-α水平明顯低于治療6 h組(P0.01);患者血清TNF-α水平與其誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43 mRNA的表達呈直線負相關(guān)(r=-0.91,P0.01)。 結(jié)論:①ALI患者血清可使ATⅡ細胞Cx43及其mRNA的表達減少;②CBP治療可增加ALI患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43及其mRNA的表達;③CBP治療有效清除血清TNF-α可能是其增加ALI患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細胞Cx43及其mRNA表達的重要機制之一。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R563;R459.5
【部分圖文】：

附圖 1-1 A549 細胞經(jīng)血清誘導(dǎo)培養(yǎng) 48 h 時的形態(tài)(×100，a：健康對照組，b：患者組)Figure 1-1 A549 cells induced by serum for 48 h(×100，a：healthy control，b：ALI patients)

附圖 1-1 A549 細胞經(jīng)血清誘導(dǎo)培養(yǎng) 48 h 時的形態(tài)(×100，a：健康對照組，b：患者組)Figure 1-1 A549 cells induced by serum for 48 h(×100，a：healthy control，b：ALI patients)a b

附圖2-1 A549細胞經(jīng)血清誘導(dǎo)培養(yǎng)48 h時的形態(tài)(×100，a：治療前組，b：治療 6 h 組，c：治療 20 h 組)Figure 2-1 A549 cells induced by serum for 48 h(×100，a：pre-CBP，b：6-hour-CBP，c：20-hour-CBP)
【參考文獻】

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本文編號：2842234