目的:分析新疆地區(qū)維吾爾族、漢族人群中ADAM33基因F+1、T1位點(diǎn)多態(tài)性及其連鎖不平衡關(guān)系,探討其構(gòu)成的單體型與支氣管哮喘(簡(jiǎn)稱哮喘)易感性之間的關(guān)系。方法:對(duì)69例維吾爾族、63例漢族哮喘患者和64名維族、70名漢族健康對(duì)照者采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法測(cè)定ADAM33基因T1、F+1位點(diǎn)多態(tài)性。設(shè)立統(tǒng)一的調(diào)查表,對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行哮喘危險(xiǎn)因素調(diào)查、血清變應(yīng)原T-IgE檢測(cè),嗜酸粒細(xì)胞測(cè)定,肺功能測(cè)定。結(jié)果:1.維、漢哮喘組的哮喘患者血清T-IgE水平、EOS明顯高于本民族對(duì)照組(P0.01)。2.新疆維吾爾族、漢族ADAM33基因F+1位點(diǎn)的基因型分布及等位基因分布頻率在病例組與對(duì)照組間無差異。3 T1位多態(tài)性哮喘組基因型分布及等位基因分布頻率與對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,C等位基因明顯高于正常人組。4.ADAM33基因T1位點(diǎn)基因多態(tài)性與哮喘的關(guān)系,相對(duì)TT基因型而言,TC雜合型與TC+CC基因型,均能顯著增加哮喘發(fā)生的危險(xiǎn)性(P0.05)。5. F+1位點(diǎn)、T1位點(diǎn)SNP與血漿IgE水平無關(guān)聯(lián)性6 Tl位點(diǎn)SNP三種基因型間第一秒用力呼氣量(FEV1)實(shí)測(cè)值/預(yù)測(cè)值%水平有差異,TT基因型與TC、CC基因型比較差異有顯著性意義(P0.05);而TC基因型與TT基因型、CC基因型比較無顯著性意義(P0.05)。7連鎖不平衡分析及單體型構(gòu)建結(jié)果:F+1位點(diǎn)、T1位點(diǎn)SNP存在較弱連鎖不平衡(D′=0. 256)。構(gòu)建了4種單體型,存在單體型頻率分布在病例組和對(duì)照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩位點(diǎn)所構(gòu)成4種單體型頻率分布在兩民族病例組和正常對(duì)照組的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:F+1位點(diǎn)的SNP與支氣管哮喘的發(fā)生無相關(guān)性。T1位點(diǎn)的SNP多態(tài)性與支氣管哮喘的發(fā)生有相關(guān)性, T等位基因可能是哮喘病的保護(hù)基因,C等位基因可能是哮喘病的易患基因。ADAM33基因F+1位點(diǎn)、T1位點(diǎn)存在較弱的連鎖不平衡關(guān)系,A-C;G-C與哮喘易感性相關(guān)性�；騿误w型頻率在新疆兩民族人群中的分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【學(xué)位單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R562.25
【部分圖文】：

圖 1 ADAM33 基因結(jié)構(gòu)及研究熱點(diǎn) SNPs 位點(diǎn)示意圖資料和方法1．研究對(duì)象與診斷標(biāo)準(zhǔn)病例組來自2007年8月至2008年7月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸科經(jīng)臨床檢查（病史、生化、肺功能等）確診，相互無血緣關(guān)系的未與其他民族通婚者并且近期未用糖皮質(zhì)激素的132名支氣管哮喘病人。其中維族69名：男31名，女38名，平均年齡19~69（39.77±11.79）；漢族63名：男27名，女36名，平均年齡18~69（41.14±13.37）。對(duì)照組為在該醫(yī)院體檢的健康人共134名，其中維族64名：男30名，女34名，平均年齡20~69（39.63±11.28）；漢族70名：男34名，女36名，平均年齡19~67（45.09±13.36）。近期無感染史、無個(gè)人及家族過敏性疾病史，親屬中無哮喘患者，排除肺、肝、腎等疾病。

為 OD260×稀釋倍數(shù)（250）×50ug/ml。實(shí)際濃度，用 TE 將基因組 DNA 進(jìn)一步稀釋成 100ng/μl 的 1%的含 EB 的瓊脂糖凝膠，采用 1×TBE 緩沖液，加入 4ul /cm，入膠后 8V/cm 的電壓進(jìn)行電泳，1h 后，紫外燈下觀亮度及純度。組 DNA 檢測(cè) DNA 提取液 lul，PRC 擴(kuò)增 β-Actin，有擴(kuò)增產(chǎn)物者 DNA 。 β-Actin 擴(kuò) 增 引 物 為 ： 5’-GCCCTCTGCTAACTAAAAAGAAAATCGCCAATC-3’ 。 將 引 物 用 滅 菌 dd 工 作 液 。 PCR 反 應(yīng) 體 系 為 :10×PCR Buffer2μL ， MP1μL，上下游引物各 0.5μL，10U/μl TaqDNA 聚合酶 0.1UL.總反應(yīng)體系為 20μL 循環(huán)程序: 預(yù)變性 94℃ 4min，反應(yīng)循8℃ 30s、延伸 72 ℃ 60s，循環(huán) 30 次；最后 72℃延伸 8min，μL 在 l%的瓊脂糖凝膠上電泳檢測(cè)，PCR 產(chǎn)物大小為 350b

凝膠厚度在 3-5mm 之間，瓊脂糖凝膠濃度為 2%。放置 30 分鐘，凝膠完全凝固后，小心移去梳子。沒過膠面約 lmm 的 1×TBE 電泳緩沖液。PCR 產(chǎn)物 10μl 與 6×溴酚蘭加樣緩沖液 2μl 混合后上樣至點(diǎn)樣孔中子量 DL2000Marker 對(duì)照，以確定反應(yīng)條帶。電泳槽，100V 進(jìn)膠，80V 電泳 30 分鐘。凝膠成像儀成像，鑒定 PCR 產(chǎn)物。F+1 位點(diǎn)的擴(kuò)增產(chǎn)物為 154bp;為 999bp（見圖 3-4）。

【共引文獻(xiàn)】

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1 張玉娥,林方,童明宏;呼吸道肺炎支原體感染95例臨床分析[J];臨床兒科雜志;2002年08期

2 徐桂芳,費(fèi)德瓊,李敏;兒童呼吸道支原體感染的發(fā)病趨勢(shì)及其臨床特點(diǎn)[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2003年08期

3 劉良飛;肺炎支原體感染致咳嗽變異性哮喘22例[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2005年04期

4 張新高,李素英,黎聯(lián),鄧治平;重癥哮喘21例救治體會(huì)[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2003年03期

5 馬艷良,何權(quán)瀛;從哮喘的流行病學(xué)調(diào)查看我國(guó)哮喘診斷不足問題[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2004年01期

6 孔靈菲,王魯寧,王琳,康健,侯顯明,于潤(rùn)江;沈陽(yáng)市城市老年人哮喘流行病學(xué)調(diào)查分析[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

7 張守貞,席強(qiáng),孔維順,李子洪,孔祥太,孔令宇,錢愛華,李家?guī)X;山東省棗莊市支氣管哮喘患病情況調(diào)查及相關(guān)因素分析[J];中華流行病學(xué)雜志;2005年04期

8 崔德健;加強(qiáng)對(duì)老年支氣管哮喘的診斷和治療[J];中華內(nèi)科雜志;2001年10期

9 朱忠政,叢文銘,劉淑芳,董輝,朱冠山,吳孟超;p53基因第72密碼子多態(tài)與中國(guó)人群肝細(xì)胞癌遺傳易感性的研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年02期

10 張偉麗,張紅葉,孫凱,惠汝太;利用多個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)判斷病例對(duì)照關(guān)聯(lián)研究中的人群層化[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年17期

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3 周水珍;兩個(gè)特發(fā)性癲癇綜合征家系的臨床與分子遺傳學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

4 張麗萍;新疆哈薩克族和維吾爾族人群原發(fā)性高血壓與αENaC和β_2-AR基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2007年

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2 齊栩;新型KATP開放劑—鹽酸依普卡林對(duì)哮喘豚鼠氣道高反應(yīng)性及氣道重構(gòu)的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2003年

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4 叢衍群;殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體基因多態(tài)性與慢性乙型肝炎的遺傳易感性研究[D];山東大學(xué);2005年

5 陳健剛;β_2腎上腺素能受體基因多態(tài)性與新疆兩個(gè)民族高血壓病的關(guān)聯(lián)分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2006年

6 余正江;白芥子化學(xué)成分及鎮(zhèn)咳活性研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2005年

7 寧宇;GPRA基因多態(tài)性與兒童支氣管哮喘的關(guān)系[D];吉林大學(xué);2007年

8 劉麗莎;對(duì)肺癌樣本雜合性缺失數(shù)據(jù)（LOH）的雙聚類分析[D];吉林大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2827356