【摘要】： 研究目的： 通過(guò)建立大鼠缺鋅哮喘模型來(lái)觀察飲食鋅和地塞米松處理哮喘大鼠后肺組織和外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的影響；檢測(cè)正常對(duì)照嬰兒及哮喘嬰兒外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)的變化,初步探討哮喘疾病中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的變化。研究方法： 一、20只wistar大鼠(年齡3-4周)隨機(jī)分為4組：低鋅哮喘組、哮喘組、對(duì)照組和地塞米松處理組。低鋅組飼喂缺鋅飼料,其他組飼喂正常飼料；按文獻(xiàn)所提供方法獲得大鼠哮喘模型；每?jī)商煊涗浺淮未笫蟮捏w重、攝食量。五周之后處死動(dòng)物,檢測(cè)肺組織和血清鋅含量,RT-PCR方法檢測(cè)肺組織和外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA的表達(dá)。 二、臨床收集9例正常對(duì)照嬰兒以及9例哮喘嬰兒血常規(guī)數(shù)據(jù)、ELISA檢測(cè)血液中IgE含量、原子吸收分光光度計(jì)檢測(cè)血清鋅含量,通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)。 結(jié)果： 一、低鋅哮喘組大鼠攝食量較其他組有明顯的下降,而對(duì)照組、哮喘組以及地塞米松處理組之間沒(méi)有明顯的差別。同樣在低鋅哮喘組,大鼠體重明顯低于其他各組,而對(duì)照組、哮喘組和地塞米松組則沒(méi)有明顯的區(qū)別；低鋅哮喘組大鼠肺組織鋅含量顯著低于其他各組,而對(duì)照組、哮喘組以及地塞米松組之間肺組織鋅含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；與對(duì)照組相比低鋅哮喘組大鼠肺組織ZnT-1mRNA表達(dá)下降了45%,哮喘組中ZnT-1mRNA表達(dá)上升了67%,地塞米松干預(yù)組ZnT-1mRNA表達(dá)上升了45%；ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA在對(duì)照組中的表達(dá)明顯低于缺鋅哮喘組、哮喘組以及地塞米松干預(yù)組；與哮喘組相比,低鋅哮喘組中ZnT-1mRNA顯著下降了67%, ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)升高,地塞米松干預(yù)組中ZnT-1mRNA、ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)均沒(méi)有明顯的改變。 二、哮喘嬰兒血清鋅含量顯著低于對(duì)照組嬰兒(P0.01)；哮喘患兒外周血免疫球蛋白E含量明顯高于正常對(duì)照組嬰兒；哮喘組嬰兒和對(duì)照組嬰兒外周血白細(xì)胞中ZnT-1, ZnT-3,ZnT-5, ZIP-1 mRNA表達(dá)沒(méi)有顯著的差異；哮喘患兒組外周血白細(xì)胞中ZIP-2mRNA表達(dá)明顯高于對(duì)照組嬰兒(P0.01)。 結(jié)論： 低鋅干預(yù)后,低鋅哮喘組大鼠肺組織ZnT-1mRNA的表達(dá)降低,ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)升高；哮喘模型大鼠肺組織ZnT-1mRNA、ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)增加,地塞米松干預(yù)后,鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)無(wú)明顯改變；哮喘兒童外周血白細(xì)胞中,ZIP-2mRNA表達(dá)明顯升高。 意義： 鋅是生物體必需的微量元素,六大功能性蛋白家族中超過(guò)300種金屬酶需要鋅作為其關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)組分或者是輔助因子,廣泛參與生物體代謝,還涉及到細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化。兩個(gè)大的基因家族參與了哺乳動(dòng)物鋅的代謝調(diào)節(jié)：ZnT和ZIP。ZnT蛋白能夠促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)鋅的外流以及使鋅在各細(xì)胞器內(nèi)區(qū)室化,從而降低細(xì)胞漿鋅的含量；ZIP則能夠增加鋅的內(nèi)流攝取或者促進(jìn)細(xì)胞器內(nèi)鋅的釋放,來(lái)增加胞漿中鋅的含量。在哺乳動(dòng)物中,飲食中鋅水平不足會(huì)導(dǎo)致皮膚病病變,生長(zhǎng)遲緩,精神障礙,并損害免疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。在動(dòng)物中,鋅平衡的保持主要是通過(guò)調(diào)節(jié)腸吸收率,過(guò)量鋅的排除,腎重吸收和分配到細(xì)胞中,包括細(xì)胞內(nèi)存儲(chǔ)。很多文獻(xiàn)中提到急性和慢性炎性疾病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中鋅的代謝發(fā)生改變,病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn),鋅攝入量低的人遺傳過(guò)敏癥,哮喘和過(guò)敏性反應(yīng)型的癥狀相結(jié)合的風(fēng)險(xiǎn)是鋅攝入量高的人的4到5倍,哮喘病人血清鋅含量要低于健康對(duì)照患者。哮喘和鋅缺乏都被認(rèn)為是有利于Th2細(xì)胞炎性因子產(chǎn)生,系統(tǒng)性鋅缺乏的哮喘病人有可能進(jìn)一步增加Th2細(xì)胞促炎性因子的產(chǎn)生。哮喘是許多慢性炎癥疾病中的一種,是世界公認(rèn)的醫(yī)學(xué)難題,被世界衛(wèi)生組織列為疾病中四大頑癥之一。據(jù)調(diào)查,在我國(guó)至少有2000萬(wàn)以上哮喘患者,哮喘的發(fā)病機(jī)制和發(fā)病原因非常復(fù)雜,因此探討哮喘疾病中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)以及鋅對(duì)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的影響很有必要。 本課題檢測(cè)了哮喘嬰幼兒外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)情況,在兒童哮喘的鋅研究領(lǐng)域還是首次；同時(shí),使用鋅和地塞米松處理哮喘模型大鼠,觀察部分鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)情況,為哮喘的發(fā)生,發(fā)展機(jī)制研究尋找新的突破。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R562.25

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本文編號(hào)：2789398