【摘要】： 第一部分呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷大鼠動(dòng)物模型的建立 目的建立呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷(VILI)大鼠動(dòng)物模型,研究不同潮氣量機(jī)械通氣對(duì)肺損傷的影響。 方法清潔級(jí)Wistar大鼠30只,雄雌不拘,體重200～250g,隨機(jī)分為三組,n=10,實(shí)驗(yàn)前12h禁食,自由飲水。A組對(duì)照組,僅作氣管切開插管,不行機(jī)械通氣;余兩組氣管切開插管后接小動(dòng)物呼吸機(jī)控制呼吸,B組調(diào)節(jié)潮氣量(V_T)7ml/kg,呼吸頻率(RR)40次/min,吸呼比1:2,空氣吸入,持續(xù)通氣4h;C組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,余參數(shù)同B組。A組氣管插管后即刻,余兩組在機(jī)械通氣4h后,立即剖胸,鉗夾左側(cè)主支氣管,收集左側(cè)肺組織,稱濕重。4%多聚甲醛1ml經(jīng)氣管灌入固定右側(cè)肺組織。右肺HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化;左肺置烤箱80℃干燥至恒重,測(cè)定肺濕/干重(W/D)。 結(jié)果A組肺組織無(wú)明顯病理學(xué)變化,B組大鼠肺組織大體標(biāo)本表面無(wú)出血點(diǎn),光學(xué)顯微鏡下肺泡壁完整,肺泡腔無(wú)出血、充血,無(wú)明顯炎細(xì)胞浸潤(rùn)。C組肺組織表面有明顯充血和出血,肺水腫明顯,光鏡下肺組織失去正常的結(jié)構(gòu),肺泡過(guò)度擴(kuò)張,肺泡壁斷裂,肺泡壁和肺泡腔內(nèi)大量出血;肺泡腔,血管壁大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。與A、B組比較,C組肺組織W/D明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P＜0.05)。 結(jié)論大潮氣量機(jī)械通氣導(dǎo)致大鼠肺組織嚴(yán)重?fù)p傷,通過(guò)肺組織病理學(xué)變化及肺組織濕/干重表明本實(shí)驗(yàn)設(shè)定大潮氣量(40ml/kg)可建立呼吸機(jī)相關(guān)肺損傷大鼠動(dòng)物模型。 第二部分機(jī)械通氣對(duì)大鼠不同組織中CC10蛋白表達(dá)的影響 目的探討機(jī)械通氣對(duì)大鼠肺組織、支氣管肺泡灌洗液(BALF)和血清中CC10蛋白表達(dá)的影響。 方法清潔級(jí)Wistar大鼠40只,雄雌不拘,體重200～250g,隨機(jī)分為五組,n=8。實(shí)驗(yàn)前12h禁食,自由飲水。Ⅰ組對(duì)照組,僅作氣管切開插管,不行機(jī)械通氣;余各組氣管切開插管后接小動(dòng)物呼吸機(jī)控制呼吸,調(diào)節(jié)RR40次/min,吸呼比1:2,空氣吸入,Ⅱ組調(diào)節(jié)潮氣量(V_T)7ml/kg,持續(xù)通氣2 h;Ⅲ組調(diào)節(jié)V_T7ml/kg,持續(xù)通氣4 h;Ⅳ組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,持續(xù)通氣2 h;Ⅴ組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,持續(xù)通氣4 h,建立呼吸機(jī)相關(guān)肺損傷大鼠動(dòng)物模型。Ⅰ組在氣管插管后即刻,余各組在機(jī)械通氣結(jié)束后相應(yīng)時(shí)點(diǎn),立即剖胸,取大鼠肺組織,收集BALF和血清。采用western blot法測(cè)定各組織中CC10表達(dá)、免疫組化計(jì)算細(xì)支氣管Clara細(xì)胞比率和HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化。 結(jié)果(1)與Ⅰ組比較,Ⅳ、Ⅴ組肺組織和BALF中CC10降低(P＜0.05),血清中CC10表達(dá)增加(P＜0.05);Ⅳ、Ⅴ組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(2)血清中CC10與各組肺組織病理評(píng)分正相關(guān),(r=0.855,P＜0.01),BALF中CC10與各組肺組織病理評(píng)分負(fù)相關(guān),(r=-0.477,P＜0.05)。(3)Ⅴ組Clara細(xì)胞計(jì)數(shù)較其它各組降低(P＜0.05)。 結(jié)論機(jī)械通氣導(dǎo)致大鼠肺組織上皮通透性增加,致肺組織中CC10蛋白大量漏入血液中,其在血清中濃度與肺組織病理評(píng)分正相關(guān),可作為評(píng)價(jià)VILI的指標(biāo)。(2)大潮氣量,長(zhǎng)時(shí)間機(jī)械通氣引起嚴(yán)重肺損傷,肺組織中抗炎因子CC10表達(dá)減少,導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加重,可能是VILI的發(fā)生機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R563.8
【圖文】：

HE染色示各組大鼠肺組織病理變化(x4OO)

各組BALF中CC10蛋白的表達(dá)

圖2各組大鼠肺組織Clara細(xì)胞免疫組化染色(又400)I組:個(gè)示細(xì)支氣管上皮Clara細(xì)胞V組:t示細(xì)支氣管腔內(nèi)脫落的Clara細(xì)胞COrr6lationSbotW66nSGrumCC10andALISCO陽(yáng)8Corr6lationsb6加陽(yáng)6nBALFCC10andALI污CO陽(yáng)$2oo姍門“l(fā)O。.80。.708OOOODOOU。.印OO0。.幻O護(hù)00OOorOOO8OOOOO100oo0.40OO。.30OO0OU0.20O刀2.04乃6刀8001688乃10刀12D0.02刀4刀6刀8.010刀，2.0SC0r.S圖3.1血清CC10與肺組織病理評(píng)分正相關(guān)圖3.2BALFCCro與肺組織病理評(píng)分負(fù)相關(guān)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 胡國(guó)棟,蔡紹曦,陳英華,高楓;不同潮氣量機(jī)械通氣對(duì)大鼠支氣管和肺組織細(xì)胞凋亡的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年05期

2 王月蘭;姚尚龍;;機(jī)械通氣對(duì)大鼠肺組織早期生長(zhǎng)因子-1、C-jun和白介素-1β表達(dá)的影響[J];中華麻醉學(xué)雜志;2005年11期

3 武慶平,姚尚龍,袁世熒;呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎動(dòng)物模型的建立[J];中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué);2005年08期

本文編號(hào)：2783931