【摘要】： 第一部分呼吸機相關(guān)性肺損傷大鼠動物模型的建立 目的建立呼吸機相關(guān)性肺損傷(VILI)大鼠動物模型,研究不同潮氣量機械通氣對肺損傷的影響。 方法清潔級Wistar大鼠30只,雄雌不拘,體重200～250g,隨機分為三組,n=10,實驗前12h禁食,自由飲水。A組對照組,僅作氣管切開插管,不行機械通氣;余兩組氣管切開插管后接小動物呼吸機控制呼吸,B組調(diào)節(jié)潮氣量(V_T)7ml/kg,呼吸頻率(RR)40次/min,吸呼比1:2,空氣吸入,持續(xù)通氣4h;C組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,余參數(shù)同B組。A組氣管插管后即刻,余兩組在機械通氣4h后,立即剖胸,鉗夾左側(cè)主支氣管,收集左側(cè)肺組織,稱濕重。4%多聚甲醛1ml經(jīng)氣管灌入固定右側(cè)肺組織。右肺HE染色觀察肺組織病理學變化;左肺置烤箱80℃干燥至恒重,測定肺濕/干重(W/D)。 結(jié)果A組肺組織無明顯病理學變化,B組大鼠肺組織大體標本表面無出血點,光學顯微鏡下肺泡壁完整,肺泡腔無出血、充血,無明顯炎細胞浸潤。C組肺組織表面有明顯充血和出血,肺水腫明顯,光鏡下肺組織失去正常的結(jié)構(gòu),肺泡過度擴張,肺泡壁斷裂,肺泡壁和肺泡腔內(nèi)大量出血;肺泡腔,血管壁大量炎細胞浸潤。與A、B組比較,C組肺組織W/D明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義((P＜0.05)。 結(jié)論大潮氣量機械通氣導致大鼠肺組織嚴重損傷,通過肺組織病理學變化及肺組織濕/干重表明本實驗設(shè)定大潮氣量(40ml/kg)可建立呼吸機相關(guān)肺損傷大鼠動物模型。 第二部分機械通氣對大鼠不同組織中CC10蛋白表達的影響 目的探討機械通氣對大鼠肺組織、支氣管肺泡灌洗液(BALF)和血清中CC10蛋白表達的影響。 方法清潔級Wistar大鼠40只,雄雌不拘,體重200～250g,隨機分為五組,n=8。實驗前12h禁食,自由飲水。Ⅰ組對照組,僅作氣管切開插管,不行機械通氣;余各組氣管切開插管后接小動物呼吸機控制呼吸,調(diào)節(jié)RR40次/min,吸呼比1:2,空氣吸入,Ⅱ組調(diào)節(jié)潮氣量(V_T)7ml/kg,持續(xù)通氣2 h;Ⅲ組調(diào)節(jié)V_T7ml/kg,持續(xù)通氣4 h;Ⅳ組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,持續(xù)通氣2 h;Ⅴ組調(diào)節(jié)V_T40ml/kg,持續(xù)通氣4 h,建立呼吸機相關(guān)肺損傷大鼠動物模型。Ⅰ組在氣管插管后即刻,余各組在機械通氣結(jié)束后相應(yīng)時點,立即剖胸,取大鼠肺組織,收集BALF和血清。采用western blot法測定各組織中CC10表達、免疫組化計算細支氣管Clara細胞比率和HE染色觀察肺組織病理學變化。 結(jié)果(1)與Ⅰ組比較,Ⅳ、Ⅴ組肺組織和BALF中CC10降低(P＜0.05),血清中CC10表達增加(P＜0.05);Ⅳ、Ⅴ組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。(2)血清中CC10與各組肺組織病理評分正相關(guān),(r=0.855,P＜0.01),BALF中CC10與各組肺組織病理評分負相關(guān),(r=-0.477,P＜0.05)。(3)Ⅴ組Clara細胞計數(shù)較其它各組降低(P＜0.05)。 結(jié)論機械通氣導致大鼠肺組織上皮通透性增加,致肺組織中CC10蛋白大量漏入血液中,其在血清中濃度與肺組織病理評分正相關(guān),可作為評價VILI的指標。(2)大潮氣量,長時間機械通氣引起嚴重肺損傷,肺組織中抗炎因子CC10表達減少,導致炎癥反應(yīng)加重,可能是VILI的發(fā)生機制之一。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R563.8
【圖文】：

HE染色示各組大鼠肺組織病理變化(x4OO)

各組BALF中CC10蛋白的表達

圖2各組大鼠肺組織Clara細胞免疫組化染色(又400)I組:個示細支氣管上皮Clara細胞V組:t示細支氣管腔內(nèi)脫落的Clara細胞COrr6lationSbotW66nSGrumCC10andALISCO陽8Corr6lationsb6加陽6nBALFCC10andALI污CO陽$2oo姍門“l(fā)O。.80。.708OOOODOOU。.印OO0。.幻O護00OOorOOO8OOOOO100oo0.40OO。.30OO0OU0.20O刀2.04乃6刀8001688乃10刀12D0.02刀4刀6刀8.010刀，2.0SC0r.S圖3.1血清CC10與肺組織病理評分正相關(guān)圖3.2BALFCCro與肺組織病理評分負相關(guān)

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 胡國棟,蔡紹曦,陳英華,高楓;不同潮氣量機械通氣對大鼠支氣管和肺組織細胞凋亡的影響[J];第一軍醫(yī)大學學報;2005年05期

2 王月蘭;姚尚龍;;機械通氣對大鼠肺組織早期生長因子-1、C-jun和白介素-1β表達的影響[J];中華麻醉學雜志;2005年11期

3 武慶平,姚尚龍,袁世熒;呼吸機相關(guān)性肺炎動物模型的建立[J];中國危重病急救醫(yī)學;2005年08期

本文編號：2783931