【摘要】： 目的觀察香煙暴露和戒煙大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)及外周血中調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞的表達(dá)與探討其意義。 方法將50只健康清潔級(jí)雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為五組:12周正常對(duì)照組(A組)、24周正常對(duì)照組(B組)、12周吸煙組(C組)、戒煙組(D組)、24周吸煙組(E組)。用煙熏法復(fù)制大鼠氣道炎癥的動(dòng)物模型。12周后,A組、C組處置取材;D組實(shí)行戒煙12周;E組繼續(xù)煙熏12周。再次滿12周后B組、D組和E組均處置取材。行病理學(xué)檢查,HE染色下觀察小氣道病理改變,進(jìn)行氣道評(píng)分;收集BALF進(jìn)行細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)和分類;用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法測(cè)出BALF中4種細(xì)胞因子的濃度: Th1/Th2型細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、促炎因子IL-8、TNF-α;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組大鼠BALF及外周血中Foxp3+ Treg細(xì)胞的數(shù)量,用RT-PCR檢測(cè)各組大鼠BALF及外周血中Foxp3 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果(1)與正常對(duì)照組比較,12周吸煙組、戒煙組、24周吸煙組氣道炎癥評(píng)分明顯增高(P均0.01)。與12周吸煙組相比,戒煙組、24周吸煙組兩組氣道炎癥評(píng)分均增高(P均0.01),24周吸煙組升高最明顯(P均0.01)。(2)與正常對(duì)照組相比,12周吸煙組、戒煙組、24周吸煙組BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8增高,IL-4減少(P均0.01)。與12周吸煙組相比,戒煙組IFN-γ、TNF-α無明顯變化(P0.05),24周吸煙組增高最明顯(P0.01)(3)與正常對(duì)照組相比,12周吸煙組、戒煙組、24周吸煙組BALF中Foxp3+ Treg細(xì)胞比例上升(P0.01),后三組之間BALF中Foxp3+ Treg細(xì)胞比例無明顯差別(P均0.05)。各組外周血中Foxp3+ Treg細(xì)胞比例無明顯差別(P均0.05)(4)與正常對(duì)照組相比,12周吸煙組、戒煙組、24周吸煙組BALF中Foxp3 mRNA表達(dá)升高(P0.01)。后三者之間BALF中Foxp3 mRNA表達(dá)無明顯差別(P均0.05)。各組外周血中Foxp3 mRNA表達(dá)無明顯差別(P均0.05)。 結(jié)論(1)香煙暴露致大鼠氣道Th1/Tc1介導(dǎo)的炎癥伴BALF中Treg細(xì)胞表達(dá)增高。(2)戒煙后大鼠氣道炎癥仍存在,但較持續(xù)香煙暴露大鼠減輕,BALF中Treg細(xì)胞表達(dá)未見下降。(3)氣道內(nèi)Treg細(xì)胞高表達(dá)可能與抑制氣道炎癥有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R563.9
【圖文】：

圖 1.實(shí)驗(yàn)分組及對(duì)應(yīng)干預(yù)2.4 動(dòng)物處置及標(biāo)本采集⑴ 10%水合氯醛溶液 0.3ml/100g 腹腔麻醉。⑵ 裝血的 EP 管用肝素濕潤(rùn)管壁。將 2 瓶 100ml 生理鹽水置于 37℃預(yù)熱。⑶ 將麻醉好的大鼠固定于解剖固定板。⑷ 解剖大鼠暴露股靜脈，注射 1ml 肝素使其肝素化。暴露分離氣管下穿過手術(shù)線備用。⑸ 股靜脈采血 5ml，0.5ml 置于 1ml EP 管用于流式檢測(cè)，3ml 置于 管用于 RT-PCR 檢測(cè)。放置血液前將潤(rùn)管的肝素甩凈。采血后 4℃保存⑹ 打開腹腔，另取 10ml 注射器行下腔靜脈采血，盡可能將血放盡

圖 2 A 圖為 12 周對(duì)照組（A 組），C 圖為 12 周吸煙組（C 組）。與 12 周對(duì)照組相比，可周吸煙組氣管黏膜上皮纖毛倒伏，杯狀細(xì)胞增多，小氣道壁周圍均有不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞為主，可見淋巴細(xì)胞聚集成團(tuán)。（HE×40）圖 3 B 圖為 24 周對(duì)照組（B 組），D 圖為戒煙組（D 組），E 圖為 24 周吸煙組（E 組）。和 對(duì)照組相比，戒煙組及 24 吸煙周組氣管黏膜上皮纖毛倒伏，甚至脫落，杯狀細(xì)胞增多，小氣道圍均有不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以淋巴細(xì)胞為主，部分可見淋巴濾泡的形成及少量的巨噬細(xì)中性粒細(xì)胞，在炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯的地方可以看到管壁平滑肌肌束斷裂，排列紊亂。（HE×40）

圖 3 B 圖為 24 周對(duì)照組（B 組），D 圖為戒煙組（D 組），E 圖為 24 周吸煙組（E 組）。和 24 周對(duì)照組相比，戒煙組及 24 吸煙周組氣管黏膜上皮纖毛倒伏，甚至脫落，杯狀細(xì)胞增多，小氣道壁周圍均有不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以淋巴細(xì)胞為主，部分可見淋巴濾泡的形成及少量的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，在炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯的地方可以看到管壁平滑肌肌束斷裂，排列紊亂。（HE×40）圖 3 C 圖為 12 周吸煙組（C 組）D 圖為戒煙組（D 組）E 圖為 24 周吸煙組（E 組）。12 周吸煙組、戒煙組、24 周吸煙組氣道炎癥比較（×40）。C 可見氣道旁有炎細(xì)胞浸潤(rùn)并聚集成團(tuán)。D 可見氣道周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn)較 C 加重，有淋巴濾泡形成，杯狀細(xì)胞增多。E 較 C、D 除炎癥改變更為嚴(yán)重外，還可見管壁平滑肌肌束斷裂，排列紊亂（HE×40）。

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王昌明;蔣明;劉曉黎;梁榮感;;NF-κB抑制劑對(duì)COPD繼發(fā)的肺動(dòng)脈高壓各階段的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年08期

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本文編號(hào)：2755773