【摘要】： [目的]慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病是多基因遺傳、環(huán)境等因素共同作用的結(jié)果。腫瘤壞死因子-α(TNF-Q)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)是近年研究認(rèn)為可能與COPD發(fā)病相關(guān)的細(xì)胞因子。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性法(PCR-RFLP)對(duì)TNF-a基因啟動(dòng)子+489位點(diǎn)及IL-6基因啟動(dòng)子-572位點(diǎn)進(jìn)行研究,探討這兩種基因各位點(diǎn)的基因多態(tài)性是否與山西省汾陽(yáng)地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān)。 [材料與方法]選用病例-對(duì)照的研究方法,收集來(lái)自山西省汾陽(yáng)地區(qū)漢族人群的60例COPD患者和62例健康對(duì)照者的外周靜脈血3ml,用全血基因組DNA提取試劑盒提取DNA,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對(duì)兩組研究對(duì)象的TNF-a基因啟動(dòng)子+489位點(diǎn)及IL-6基因啟動(dòng)子-572位點(diǎn)的特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增,再應(yīng)用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性法對(duì)擴(kuò)增的特異性片段用Tai I內(nèi)切酶、Mbi I內(nèi)切酶分別進(jìn)行酶切,酶切產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳的方法進(jìn)行檢測(cè),分析其基因型及等位基因頻率的分布。采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,年齡、肺功能比較采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),性別、吸煙史及吸煙指數(shù)構(gòu)成比、基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法,相對(duì)危險(xiǎn)度用比值比(OR值)和95%可信區(qū)間(95%CI)表示,用相加模型判斷吸煙和各基因多態(tài)性之間的交互作用。 [結(jié)果] 1.兩組研究對(duì)象的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),FEV1／Pre%、FEV1／FVC差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在性別、年齡方面匹配。 2.兩組研究對(duì)象的吸煙史構(gòu)成、吸煙指數(shù)構(gòu)成比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且隨吸煙指數(shù)增大,OR值增大。 3.TNF-a+489位點(diǎn)PCR擴(kuò)增后目的片段的長(zhǎng)度為551bp,酶切后有3種基因型,G／G基因型(111bp、159bp、28lbp 3條帶),G／A基因型(111bp、159bp、28lbp、392bp 4條帶),A／A基因型(159bp、392bp 2條帶)。IL-6-572位點(diǎn)PCR擴(kuò)增后目的片段的長(zhǎng)度為163bp,酶切有3種基因型,C／C基因型(163bp 1條帶),C／G基因型(163bp、101bp、62bp3條帶),G／G基因型(101bp、62bp 2條帶)。 4.兩組研究對(duì)象各基因型頻率分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律,研究對(duì)象具有代表性。 5.兩組研究對(duì)象TNF-a基因+489位點(diǎn)基因型頻率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(乃0.05),但G／G基因型與非G／G基因型及等位基因頻率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),相對(duì)危險(xiǎn)度比較提示,與非A等位基因攜帶者相比,A等位基因攜帶者患病的危險(xiǎn)性增大(OR=2.280,95%CI=1.019-5.101)。兩組研究對(duì)象IL-6基因-572位點(diǎn)基因型頻率、等位基因頻率及C／C基因型與非C／C基因型頻率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(乃0.05)。 6.對(duì)照組IL-6基因-572位點(diǎn)基因型頻率及等位基因頻率與國(guó)內(nèi)的其他研究、日本相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與西班牙、美國(guó)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 7.病例組中按照吸煙情況分析,吸煙組與非吸煙組的TNF-a+489A等位基因頻率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 8.病例組中按照肺功能分為4級(jí),不同肺功能人群的TNF-α+489基因型頻率和等位基因頻率比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(乃0.05)。 9.與不吸煙且G／G基因型者相比,吸煙且非G／G基因型者患病的危險(xiǎn)性明顯增大,(OR=6.500,95%CI=1.467-28.804),交互作用指數(shù)S1,吸煙和TNF-a+489基因多態(tài)性對(duì)COPD的發(fā)生存在相加模型的正交互作用。 [結(jié)論] 1.TNF-a基因啟動(dòng)子+489位點(diǎn)基因多態(tài)性可能與山西省汾陽(yáng)地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān),A等位基因可能是COPD的易感基因。 2.吸煙和TNF-a基因啟動(dòng)子+489位點(diǎn)基因多態(tài)性對(duì)COPD的發(fā)生可能存在正交互作用。 3.IL-6基因啟動(dòng)子-572位點(diǎn)基因多態(tài)性在不同的種群中存在差異,其基因型及等位基因頻率分布在亞洲和歐美國(guó)家的人群中可能各具相似性。 4.IL-6基因啟動(dòng)子-572位點(diǎn)基因多態(tài)性可能與山西省汾陽(yáng)地區(qū)漢族人群的COPD易感性無(wú)明顯相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R563.9
【圖文】：

基因組DNA電泳圖

圖2TN卜a+489位點(diǎn)pcR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖Marker條帶自下而上依次為:100、250、500、750、zODO、Z00的片段55lbp點(diǎn)PcR擴(kuò)增結(jié)果

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王海龍;孫麗蓉;;IL-6基因多態(tài)性與COPD肺動(dòng)脈高壓研究進(jìn)展[J];臨床肺科雜志;2011年12期

2 姚志剛;王浩彥;賈楠;;TNF-α+308、TNF-α+489基因態(tài)性與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2012年22期

本文編號(hào)：2717732