【摘要】： [目的]慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病是多基因遺傳、環(huán)境等因素共同作用的結(jié)果。腫瘤壞死因子-α(TNF-Q)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)是近年研究認(rèn)為可能與COPD發(fā)病相關(guān)的細(xì)胞因子。本實驗應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性法(PCR-RFLP)對TNF-a基因啟動子+489位點及IL-6基因啟動子-572位點進(jìn)行研究,探討這兩種基因各位點的基因多態(tài)性是否與山西省汾陽地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān)。 [材料與方法]選用病例-對照的研究方法,收集來自山西省汾陽地區(qū)漢族人群的60例COPD患者和62例健康對照者的外周靜脈血3ml,用全血基因組DNA提取試劑盒提取DNA,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對兩組研究對象的TNF-a基因啟動子+489位點及IL-6基因啟動子-572位點的特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增,再應(yīng)用限制性片段長度多態(tài)性法對擴(kuò)增的特異性片段用Tai I內(nèi)切酶、Mbi I內(nèi)切酶分別進(jìn)行酶切,酶切產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳的方法進(jìn)行檢測,分析其基因型及等位基因頻率的分布。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,年齡、肺功能比較采用兩組獨立樣本t檢驗,性別、吸煙史及吸煙指數(shù)構(gòu)成比、基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法,相對危險度用比值比(OR值)和95%可信區(qū)間(95%CI)表示,用相加模型判斷吸煙和各基因多態(tài)性之間的交互作用。 [結(jié)果] 1.兩組研究對象的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),FEV1／Pre%、FEV1／FVC差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在性別、年齡方面匹配。 2.兩組研究對象的吸煙史構(gòu)成、吸煙指數(shù)構(gòu)成比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且隨吸煙指數(shù)增大,OR值增大。 3.TNF-a+489位點PCR擴(kuò)增后目的片段的長度為551bp,酶切后有3種基因型,G／G基因型(111bp、159bp、28lbp 3條帶),G／A基因型(111bp、159bp、28lbp、392bp 4條帶),A／A基因型(159bp、392bp 2條帶)。IL-6-572位點PCR擴(kuò)增后目的片段的長度為163bp,酶切有3種基因型,C／C基因型(163bp 1條帶),C／G基因型(163bp、101bp、62bp3條帶),G／G基因型(101bp、62bp 2條帶)。 4.兩組研究對象各基因型頻率分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律,研究對象具有代表性。 5.兩組研究對象TNF-a基因+489位點基因型頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(乃0.05),但G／G基因型與非G／G基因型及等位基因頻率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),相對危險度比較提示,與非A等位基因攜帶者相比,A等位基因攜帶者患病的危險性增大(OR=2.280,95%CI=1.019-5.101)。兩組研究對象IL-6基因-572位點基因型頻率、等位基因頻率及C／C基因型與非C／C基因型頻率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(乃0.05)。 6.對照組IL-6基因-572位點基因型頻率及等位基因頻率與國內(nèi)的其他研究、日本相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與西班牙、美國相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 7.病例組中按照吸煙情況分析,吸煙組與非吸煙組的TNF-a+489A等位基因頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 8.病例組中按照肺功能分為4級,不同肺功能人群的TNF-α+489基因型頻率和等位基因頻率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(乃0.05)。 9.與不吸煙且G／G基因型者相比,吸煙且非G／G基因型者患病的危險性明顯增大,(OR=6.500,95%CI=1.467-28.804),交互作用指數(shù)S1,吸煙和TNF-a+489基因多態(tài)性對COPD的發(fā)生存在相加模型的正交互作用。 [結(jié)論] 1.TNF-a基因啟動子+489位點基因多態(tài)性可能與山西省汾陽地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān),A等位基因可能是COPD的易感基因。 2.吸煙和TNF-a基因啟動子+489位點基因多態(tài)性對COPD的發(fā)生可能存在正交互作用。 3.IL-6基因啟動子-572位點基因多態(tài)性在不同的種群中存在差異,其基因型及等位基因頻率分布在亞洲和歐美國家的人群中可能各具相似性。 4.IL-6基因啟動子-572位點基因多態(tài)性可能與山西省汾陽地區(qū)漢族人群的COPD易感性無明顯相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R563.9
【圖文】：

基因組DNA電泳圖

圖2TN卜a+489位點pcR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖Marker條帶自下而上依次為:100、250、500、750、zODO、Z00的片段55lbp點PcR擴(kuò)增結(jié)果

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王海龍;孫麗蓉;;IL-6基因多態(tài)性與COPD肺動脈高壓研究進(jìn)展[J];臨床肺科雜志;2011年12期

2 姚志剛;王浩彥;賈楠;;TNF-α+308、TNF-α+489基因態(tài)性與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2012年22期

本文編號：2717732