發(fā)布時間：2017-03-28 03:09

  本文關(guān)鍵詞：香煙煙霧上調(diào)大鼠肺組織和RLE-6TN細(xì)胞D4-GDI表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】檢測D4-GDI在被動吸煙大鼠肺組織以及CSE處理的RLE-6TN細(xì)胞的表達(dá)水平變化，從而初步探索D4-GDI是否參與了吸煙相關(guān)性COPD的發(fā)病機(jī)制。 【方法】 1.動物實(shí)驗(yàn)部分：取40只雄性SD大鼠，按隨機(jī)原則分成4組，每組10只，按照本實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng)方法復(fù)制被動吸煙大鼠模型，檢測肺功能，收集對照組、被動吸煙2個月組、被動吸煙4個月組、被動吸煙4個月戒煙1個月組(戒煙組)大鼠的肺組織標(biāo)本，HE染色觀察肺組織結(jié)構(gòu)，用免疫組織化學(xué)、反轉(zhuǎn)錄-PCR（RT-PCR）、Western blot方法檢測D4-GDI的表達(dá)水平。 2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分：用香煙提取物處理RLE-6TN(大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞)0h、3h、6h、12h、24h，用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)、反轉(zhuǎn)錄-PCR（RT-PCR）、Western blot方法檢測D4-GDI的表達(dá)水平。 【結(jié)果】 1.動物實(shí)驗(yàn)部分：HE染色示對照組肺組織結(jié)構(gòu)無明顯破壞，吸煙2個月組肺泡壁完整性受損，吸煙4個月組肺組織結(jié)構(gòu)破壞最明顯，戒煙組肺組織結(jié)構(gòu)破壞稍有好轉(zhuǎn)，但較吸煙4個月組無明顯變化。RT-PCR結(jié)果顯示D4-GDI表達(dá)最弱的為對照組(1.21±0.06)，接下來是吸煙2個月組（2.09±0.07），吸煙4個月組D4-GDI表達(dá)最強(qiáng)（2.45±0.12），戒煙組(1.84±0.05)較吸煙2個月組、吸煙4個月組表達(dá)減少但仍強(qiáng)于對照組，各組間兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P均0.05。Western blot趨勢同RT-PCR結(jié)果，從弱到強(qiáng)分別為（0.30±0.06、0.79±0.15、1.03±0.06、1.46±0.11），各組間兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P均0.05。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示D4-GDI廣泛表達(dá)于除支氣管上皮細(xì)胞以外的各種肺組織細(xì)胞，4組間的表達(dá)強(qiáng)度變化趨勢為表達(dá)最弱的為對照組，其次是吸煙2個月組，吸煙4個月組D4-GDI表達(dá)最強(qiáng)，戒煙組較吸煙2個月組、吸煙4個月組表達(dá)減少但仍強(qiáng)于對照組，變化趨勢同Western blot結(jié)果一致。 2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分：RT-PCR結(jié)果顯示10%CSE處理不同時間，隨著CSE處理時間的延長，D4-GDI的mRNA表達(dá)在0h組、3h組為（0.31±0.01、0.40±0.02），在12h組（0.69±0.05）最高，24h組（0.60±0.03）低于12h組但仍高于6h組（0.52±0.04），不同時間點(diǎn)組之間兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P均0.05，Western blot結(jié)果顯示10%CSE處理不同時間，隨著CSE處理時間的延長，D4-GDI的表達(dá)逐漸增高，分別為（0.44±0.06、0.78±0.08、1.11±0.12、1.37±0.07、1.65±0.13），在24h組最高，不同時間點(diǎn)組之間兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P均0.05，免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色檢測結(jié)果與Western blot結(jié)果一致。 【結(jié)論】 吸煙導(dǎo)致D4-GDI在肺組織和RLE-6TN中表達(dá)增高，D4-GDI可能參與了吸煙相關(guān)性COPD的發(fā)病機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：香煙煙霧提取物 D4-鳥苷酸解離抑制因子 Rho 細(xì)胞增殖 慢性阻塞性肺疾病
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563
【目錄】：

• 主要縮略詞4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-18
• 結(jié)果18-21
• 討論21-24
• 結(jié)論24-25
• 參考文獻(xiàn)25-28
• 附圖28-32
• 綜述；D4-鳥苷酸解離抑制因子在肺癌發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展32-42
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 碩士期間撰寫論文42-43
• 致謝43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 歐陽卿;胡瑞成;戴愛國;譚雙香;肖志強(qiáng);湯參娥;;吸煙對肺組織D4-GDI表達(dá)的影響及其與慢性阻塞性肺疾病相關(guān)性的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2010年11期

2 陳玉霞;刁飛;;Rho GTP酶參與腫瘤調(diào)控的下游效應(yīng)蛋白[J];生命的化學(xué);2006年03期

3 曹文楓;孫保存;;Rho蛋白與細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)的細(xì)胞運(yùn)動[J];中國腫瘤臨床;2009年14期

  本文關(guān)鍵詞：香煙煙霧上調(diào)大鼠肺組織和RLE-6TN細(xì)胞D4-GDI表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：271578