【摘要】： 紅霉素對肺氣腫大鼠α-平滑肌肌動蛋白及轉(zhuǎn)化生長因子-β1表達(dá)的影響 前言 慢性阻塞性肺疾病是以不完全可逆氣流受限為特征并呈進(jìn)行性發(fā)展的肺部非特異性炎癥性疾病。氣道重構(gòu)是COPD主要病理特點之一，在氣道炎癥與肺功能之間扮演著“橋接”作用，在氣流受限中有重要的角色。氣道平滑肌細(xì)胞作為結(jié)構(gòu)細(xì)胞，以往一直被認(rèn)為是炎癥過程的被動靶細(xì)胞，近年的研究證實，ASMC也是主動參與炎癥過程的效應(yīng)細(xì)胞。α-平滑肌肌動蛋白是平滑肌細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞的主要標(biāo)志物，可反映平滑肌增殖及其表型改變。轉(zhuǎn)化生長因子β1是刺激成纖維細(xì)胞增生和分泌膠原的主要生長因子，主要來源于氣道上皮細(xì)胞、抗原激活的T細(xì)胞、脂多糖激活的單核細(xì)胞、B細(xì)胞、血小板等。大環(huán)內(nèi)酯類藥物紅霉素除抗生素作用外，還具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)，抗纖維化等作用，且對氣道慢性炎癥彌漫性泛細(xì)支氣管炎具有肯定的療效。本實驗通過應(yīng)用吸煙加脂多糖氣道內(nèi)滴入復(fù)制大鼠慢性阻塞性肺疾病模型，觀察紅霉素對小氣道α-平滑肌肌動蛋白和TGF-β1表達(dá)的影響，了解其治療作用和可能的機(jī)制。 材料與方法 1、動物模型 Wistar大鼠，雄性36只，12周齡，體重220±20g，隨機(jī)分為三組。正常對照組(A組)6只：標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)4周，不做任何干預(yù)；模型組(B組)15只：每天在0.25L有機(jī)玻璃艙內(nèi)熏藍(lán)翎牌香煙1h(10支)，共熏煙4周，并在第1、14天氣管內(nèi)注入脂多糖0.2ml(濃度200μg／200μl)；紅霉素干預(yù)組(C組)15只：大鼠于氣管內(nèi)注入LPS前3天開始用紅霉素灌胃治療(50mg／kg·d)，直至實驗結(jié)束，余同B組。 2、實驗方法 造模完成后處死各組動物，肺組織病理標(biāo)本行HE染色觀察，Verhoeff彈性纖維染色和Masson染色，形態(tài)學(xué)計量測定，α-平滑肌肌動蛋白及轉(zhuǎn)化生長因子β1的免疫組織化學(xué)染色檢測，指標(biāo)以SPSS13.0行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果 1、病理觀察 A組大鼠小氣道和肺組織結(jié)構(gòu)正常，B組大鼠鏡下可見小氣道炎癥及肺氣腫，C組炎癥和肺氣腫減輕。 2、形態(tài)計量指標(biāo) B組大鼠平均內(nèi)襯間隔(44.93±4.7)μm，平均肺泡數(shù)(154.5±43.7)個／mm~2與A組(28.52±3.78)μm、(361.8±72.2)個／mm~2相比均有明顯差異(P＜0.05)，C組平均肺泡數(shù)(239.6±63.9)個／mm~2與A組也有顯著性差異(P＜0.05)；B組細(xì)支氣管中膜肌層增厚，中膜肌層面積占管壁總面積(9.67±1.63)％與A組(6.42±1.43)％比較有顯著差異(P＜0.05)；C組管壁增厚不明顯，MT％、MA％分別為(7.75±1.31)％、(14.7±4.1)％，與B組(9.67±1.63)％、(19.6±3.9)％比較均有明顯差異(P＜0.05)。 3、免疫組化 各組大鼠小氣道上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)均可見TGF-β1表達(dá)，此外B組、C組氣道平滑肌細(xì)胞、肺泡巨嗜細(xì)胞都有強(qiáng)度偏低表達(dá)。A組大鼠表達(dá)TGF-β1較弱，B組(0.369±0.071)和C組(0.314±0.058)小氣道上皮細(xì)胞陽性表達(dá)增強(qiáng)，與A組(0.174±0.023)比較差異有顯著意義(P＜0.05)；B組、C組大鼠氣道α-SMA表達(dá)相對含量(0.434±0.043)、(0.353±0.035)較A組(0.261±0.024)有明顯增強(qiáng)，C組與B組比較α-SMA表達(dá)有明顯下降(P＜0.05)。 4、相關(guān)分析 α-SMA在氣道平滑肌中的表達(dá)與氣道上皮細(xì)胞中TGF-β1表達(dá)成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.631；氣道管壁厚度與氣管外徑比值(MT％)與上皮細(xì)胞TGF-β1表達(dá)成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.477；氣道管壁厚度與氣管外徑比值(MT％)與平滑肌細(xì)胞α-SMA表達(dá)成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.781，P均＜0.01。 結(jié)論 COPD大鼠氣道上皮細(xì)胞TGF-β1和平滑肌細(xì)胞α-SMA表達(dá)水平增加并呈正相關(guān)，提示TGF-β1參與氣道平滑肌細(xì)胞增殖。紅霉素能使氣道炎癥減輕，下調(diào)上皮細(xì)胞TGF-β1和平滑肌細(xì)胞α-SMA的表達(dá)，改善氣道重構(gòu)。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R563.3
【圖文】：

圖IB，模型組氣道重度炎癥，炎性浸潤明顯HEx200

圖IA，空白對照組正常肺泡HEx100

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 馬楠,崔德健,梁延杰,佟欣,李玲,楊建發(fā);氣管內(nèi)注入脂多糖法建立大鼠慢性支氣管炎模型[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1999年06期

2 鐘小寧,白晶,施煥中,吳聰,梁國容,馮震博;慢性支氣管炎與肺氣腫大鼠氣道炎癥與重塑的實驗研究[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2003年12期

本文編號：2715333