【摘要】：目的:肺臟的功能主要是通氣功能與換氣功能,通氣功能是肺與外界空氣的吸入與呼出功能,換氣功能主要是在肺組織內(nèi)部肺泡與血液之間的氣體交換。在成人肺中,有超過40種細(xì)胞,肺上皮細(xì)胞覆蓋于呼吸道表面,不同部位的呼吸道有不同類型的上皮細(xì)胞。其中1型肺泡上皮細(xì)胞(Alveolar type 1,AT1)和2型肺泡上皮細(xì)胞(Alveolar type 2,AT2)分布在肺泡區(qū)域。AT2細(xì)胞具有多種功能。首先AT2細(xì)胞能夠分泌多種肺泡表面活性物質(zhì),這些肺泡表面活性物質(zhì)可以降低肺泡表面張力,增加肺順應(yīng)性功能,還具有抗氧化和抗菌作用。另外,在肺組織更新及修復(fù)過程中,AT2細(xì)胞可以再生生成新的AT2細(xì)胞,也可以分化為AT1,因此被看做是肺泡上皮黏膜的干細(xì)胞。在特發(fā)性肺纖維化(Iidopathic pulmonary fibrosis,IPF)中,肺組織損傷是典型的病理學(xué)特征,但是病理學(xué)機制未完全被揭示。本研究利用博萊霉素(Bleomycin,BLM)誘導(dǎo)的IPF小鼠模型發(fā)現(xiàn),損傷后的肺泡產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),小鼠肺泡灌洗液中過氧化氫濃度顯著升高。利用干細(xì)胞體外培養(yǎng)模型研究發(fā)現(xiàn),過氧化氫抑制AT2細(xì)胞的增殖與分化,揭示了IPF患者肺泡上皮黏膜損傷的機制。目前對氧化應(yīng)激反應(yīng)在肺泡干細(xì)胞功能的調(diào)控沒有相關(guān)報道,我們利用疾病動物模型和細(xì)胞生物學(xué)等手段,本研究的初步結(jié)果,為特發(fā)性肺纖維化疾病的治療提供新的思路。方法:1、建立BLM誘導(dǎo)的小鼠纖維化模型,HE染色和masson染色觀察小鼠肺纖維化病理改變;2、測定BLM造模后小鼠肺泡灌洗液中過氧化氫含量;3、利用流式細(xì)胞技術(shù)提取AT2細(xì)胞,3D培養(yǎng)觀察AT2細(xì)胞的增殖分化功能;4、體外3D培養(yǎng)2型肺泡上皮細(xì)胞,對照組只加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基,實驗組加入1mM H_2O_2,分析AT2細(xì)胞與增殖分化功能。提取細(xì)胞RNA,應(yīng)用實時定量PCR方法(qRT-PCR)測定相關(guān)基因表達(dá)量。結(jié)果:1、BLM誘導(dǎo)的小鼠纖維化模型中,肺泡上皮受損,AT2細(xì)胞增殖能力明顯下降。2、BLM誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化中,小鼠肺泡灌洗液中過氧化氫濃度明顯升高。3、過氧化氫刺激AT2細(xì)胞,導(dǎo)致AT2細(xì)胞的增殖與分化功能下降。結(jié)論:BLM誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化中,氧化應(yīng)激反應(yīng)抑制了AT2細(xì)胞的增殖分化能力,從再生醫(yī)學(xué)角度揭示了IPF患者肺泡上皮損傷的病理學(xué)機制。
【圖文】：

H&E染色2)在Bleomycin誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型中，與對照組（注射PBS組）相比，BLM處理組中肺泡區(qū)域Masson染色明顯，表明膠原大量分泌

圖 1-1：H&E 染色in 誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型中，，與對照組（注射泡區(qū)域 Masson 染色明顯，表明膠原大量分泌可以得出 BLM 誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型成功
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R563

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 尹薈菁;鄧炯;;肺干細(xì)胞和肺癌干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國肺癌雜志;2015年10期

本文編號：2708949