【摘要】： 第一部分慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌的改變 目的觀察慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌的改變。方法清潔級(jí)Wistar大鼠18只隨機(jī)分為2組:正常對(duì)照組(NS組)6只和慢性支氣管炎組(LPS組)12只。通過(guò)檢測(cè)LPS組大鼠氣管注入脂多糖(LPS)200μg/200μl后支氣管肺泡灌洗液(BALF)炎癥細(xì)胞總數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),采用ELISA檢測(cè)BALF中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平,用阿爾辛藍(lán)-過(guò)碘酸雪夫(AB-PAS)染色氣道杯狀細(xì)胞,免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺組織中粘蛋白5ac(Muc5ac)的表達(dá)及熒光定量RT-PCR檢測(cè)Muc5ac mRNA在肺內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果慢性支氣管炎組大鼠BALF中的炎癥細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞分類,TNF-α水平,AB-PAS陽(yáng)染面積,氣道Muc5ac蛋白和mRNA表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組大鼠(P＜0.01或P＜0.05)。結(jié)論慢性支氣管炎大鼠出現(xiàn)以中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主的慢性氣道炎癥,并出現(xiàn)氣道粘液高分泌改變,且與氣道炎癥關(guān)系密切。 第二部分TLR4在慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干預(yù)的影響 目的觀察TLR4在慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干預(yù)的影響,并探討其可能的機(jī)制。方法清潔級(jí)Wistar大鼠42只隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(NS組)6只,慢性支氣管炎組(LPS組)12只,多粘菌素B干預(yù)組(LPS+PMB組)10只,多粘菌素B自身對(duì)照組(PMB組)8只,地塞米松干預(yù)組(LPS+DEX組)6只。測(cè)定BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),TNF-α含量,AB-PAS對(duì)氣道杯狀細(xì)胞進(jìn)行染色,用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)氣道Muc5ac和肺組織TLR2、TLR4蛋白的表達(dá)及熒光定量RT-PCR檢測(cè)Muc5ac mRNA、TLR4 mRNA在肺內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果LPS組在BALF細(xì)胞總計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞、TNF-α含量,及AB-PAS陽(yáng)染面積、粘蛋白Muc5ac、TLR2蛋白、TLR4蛋白及Muc5ac mRNA、TLR4 mRNA表達(dá)與LPS+PMB組、LPS+DEX組比較差異有顯著性(P＜0.01或P＜0.05),NS組和PMB組在上述指標(biāo)則組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論TLR4可能介導(dǎo)慢性支氣管炎大鼠的慢性氣道炎癥反應(yīng)和導(dǎo)致氣道粘蛋白基因Muc5ac mRNA的高表達(dá)和粘蛋白Muc5ac的高分泌。多粘菌素B可能通過(guò)抑制肺組織TLR4 mRNA及其蛋白的表達(dá)而抑制氣道炎癥和氣道粘液高分泌。
【圖文】：

滑肌束斷裂，排列紊亂，管腔狹窄(見(jiàn)附圖2，3)。3.大鼠BALF細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類兩組大鼠BALF細(xì)胞總數(shù)和白細(xì)胞分類結(jié)果(見(jiàn)表1，圖1)顯示:NS組大鼠BALF中主要以巨噬細(xì)胞為主。LPS組BALF細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞均較NS組明顯增多(P均<0.01)，尤其以中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增多較明顯。LPS組肺泡巨噬細(xì)胞所占構(gòu)成比較NS組顯著降低。

圖2兩組大鼠BALF中TNF一Q變化5.氣道AB.PAS染色AB一PAS染色結(jié)果顯示(見(jiàn)表3，圖3):NS組大鼠支氣管見(jiàn)到極少量杯狀細(xì)胞存在，即使是氣管也只是少量見(jiàn)到(見(jiàn)附圖7)。LPS組大鼠氣道可見(jiàn)到大量杯狀細(xì)胞增生，并可見(jiàn)到粘液分泌(被染成藍(lán)色)，LPS組氣道粘液物質(zhì)相對(duì)著色面積較NS組明顯增高(六0.0一)，(見(jiàn)附圖8)。表3兩組大鼠氣道AB一隊(duì)S陽(yáng)性著色面積的變化(x士:)組別氣道AB一隊(duì)S陽(yáng)性相對(duì)著色面積(%)NS組 1.54士0.12LPS組28.20士1.22*注:與NS組比較，，*P<0.ol。盅圈3530252015l0502習(xí)狽主性國(guó)翻島吵己l視獷里粘液物質(zhì)注:與NS組比較，一尸<0.0，圖3兩組大鼠氣道AB一PAS陽(yáng)性著色面積的變化
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R562.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉劍波,張珍祥,徐永健,邢麗華,張惠蘭;白細(xì)胞介素-13對(duì)小鼠肺組織粘蛋白基因Muc5ac及EGFR表達(dá)的作用[J];中國(guó)醫(yī)師雜志;2005年02期

2 胡承香,楊清武,呂鳳林,徐祥;CD14與TLR4相互作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年10期

3 呂根法,衛(wèi)國(guó),郭毅斌,肖光夏,鄭江,羅高興;多粘菌素B拮抗內(nèi)毒素的體外作用研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年14期

4 何鳳蓮;張妍蓓;;Toll樣受體的研究進(jìn)展[J];國(guó)際呼吸雜志;2006年09期

5 呂根法,王良喜 ,郭毅斌,衛(wèi)國(guó),肖光夏 ,鄭江;多粘菌素B對(duì)LPS刺激巨噬細(xì)胞Toll_4 TNF-α IL-6 mRNA表達(dá)的影響[J];解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào);2004年03期

6 郭毅斌;陳莉萍;曹紅衛(wèi);王寧;鄭江;肖光夏;;Polymyxin B antagonizing biological activity of lipopolysaccharide[J];Chinese Journal of Traumatology;2007年03期

7 郭毅斌;曹紅衛(wèi);王寧;呂根法;鄭江;肖光夏;;多黏菌素B拮抗內(nèi)毒素活性的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華創(chuàng)傷雜志;2006年01期

8 馬楠,崔德健,梁延杰,佟欣,李玲,楊建發(fā);氣管內(nèi)注入脂多糖法建立大鼠慢性支氣管炎模型[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1999年06期

9 李莉,馮玉麟,文富強(qiáng);核因子κB介導(dǎo)丙烯醛刺激大鼠氣道黏蛋白高表達(dá)[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2005年11期

10 鄧敏,陳曉飛;Toll樣受體與常見(jiàn)病原菌感染之間關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2005年05期

本文編號(hào)：2703198