【摘要】：目的 觀察槐杞黃顆粒和孟魯特鈉(montelukast, MK)十預哮喘模型大鼠對氣道炎癥、氣道重塑以及白三烯D4(leukotriene D4, LTD4)和白介素17A(Interleukin-17A,簡稱IL-17)表達的影響；探討槐杞黃輔助孟魯司特鈉治療哮喘的作用機制。 方法 1.取4-6周齡雄性SD大鼠(體重120±10g)40只,隨機分為5組：對照組(Control)、模型組(Model)、孟魯司特鈉組(MK)、槐杞黃組(H)、.孟魯司特鈉+槐杞黃組(MK+H),每組8只。 2.除對照組外,其他各組分別于第1天、第8天腹腔注射0.1%卵清蛋白(ovalbumin, OVA)混合液1 m1(含OVA1mg、氫氧化鋁100mg及滅活百日咳桿菌苗5×109個作為免疫佐劑)致敏,第15天開始以1%OVA霧化液8m1隔日1次霧化激發(fā),20分鐘／次,連續(xù)激發(fā)4周建立哮喘模型。對照組致敏激發(fā)均以生理鹽水代替。從第15天開始各干預組每天分別予以孟魯司特鈉(1mg/100g/d)、槐杞黃(0.4g/100g/d)、孟魯司特鈉(1mg/100g/d)+槐杞黃(0.4g/100g/d)灌胃處理。 3.各組大鼠于末次激發(fā)后24小時處死,取血漿、支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids. BALF)及右肺上葉組織。右肺上葉組織制作石蠟切片,行HE染色、Masson染色和AB-PAS染色行病理學檢查,分析氣道炎癥和氣道重塑情況；免疫組化方法測定肺組織IL-17表達；計數(shù)BALF細胞總數(shù)和細胞分類；ELISA方法測定血漿及BALF上清液中LTD4和IL-17的濃度 結(jié)果 1.臨床表現(xiàn)：與對照組相比,在激發(fā)過程中,模型組大鼠逐漸出現(xiàn)煩燥不安、撓鼻、呼吸急促、呈點狀呼吸、發(fā)紺、活動進食減少或俯臥不動、出現(xiàn)豎毛、毛發(fā)失去光澤甚至脫毛、反應不敏捷等哮喘樣表現(xiàn)。其它干預組大鼠癥狀較模型組不同程度減輕,以孟魯司特鈉組及孟魯司特鈉+槐杞黃組改善明顯。 2.氣道病理學改變： 1)支氣管周圍炎性細胞浸潤程度：模型組支氣管周圍炎性細胞浸潤程度較對照組明顯加重(P0.05),與模型組比較,各干預組支氣管周圍炎性細胞浸潤程度按H組、MK組、MK+H組順序依次減輕(P0.05)。 2)杯狀細胞占上皮細胞百分比：模型組杯狀細胞占上皮細胞百分比較對照組明顯升高(P0.05)；各干預組均較模型組明顯降低(P0.05)；MK組、MK+H組之間比較無顯著性差異,均較H組明顯降低(P0.05)。 3)膠原沉積面積：模型組膠原沉積面積較對照組明顯增加(P0.05)；MK組、MK+H組之間比較無顯著性差異,均較模型組明顯降低(P0.05)；H組與模型組比較無顯著性差異。 4)平滑肌增生面積：模型組平滑肌增生面積較對照組明顯增加(P0.05)；各干預組較模型組明顯減少(P0.05)：MK+H組減輕最明顯(P0.05)；MK組與(?)組比較無統(tǒng)計學差異。 5)免疫組化：模型組IL-17蛋白表達量較對照組明顯升高(P0.05);各干預組IL-17蛋白表達量按H組、MK組、MK+H組順序較模型組依次下降(P0.05)。 3.BALF細胞總數(shù)和細胞分類計數(shù)：與對照組比較,模型組BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞(eosinophils, EOS)及中性粒細胞(neutrophils,NEU)占細胞總數(shù)百分比均明顯升高(P0.05)；與模型組比較,各干預組BALF中細胞總數(shù)、EOS及NEU占細胞總數(shù)百分比按H組、MK組、MK+H組順序依次下降,但H組中性粒細胞占細胞總數(shù)百分比與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義;與MK組比較,MK+H組EOS及NEU占細胞總數(shù)百分比下降無統(tǒng)計學意義。 4.血漿和BALF LTD4、IL-17濃度： 1)血漿和BALF中LTD4濃度：模型組血漿和BALF中LTD4濃度均高于正常對照組(P0.05)；與模型組比較,各干預組血漿和BALF中LTD4濃度按H組、MK組、MK+H組順序依次下降,但MK+H組與MK組之間比較無顯著差異,H組血漿LTD4濃度與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義。 2)血漿和BALF中IL-17濃度：模型組血漿和BALF中IL-17濃度均高于正常對照組(P0.05)；與模型組比較,各干預組血漿和BALF中IL-17濃度按H組、MK組、MK+H組順序依次下降,但H組與模型組比較下降無統(tǒng)計學意義。 5.血漿與BALF中IL-17濃度及肺組織IL-17表達量呈正相關(P0.05)；肺組織IL-17表達量與BALF中EOS占細胞總數(shù)百分比及NEU占細胞總數(shù)百分比呈正相關(P0.05)。 結(jié)論 1.哮喘大鼠血漿及BALF中LTD4濃度明顯增高。 2.哮喘大鼠血漿及BALF中IL-17濃度明顯增高,在小支氣管柱狀上皮及炎癥細胞上IL-17蛋白表達量明顯增高。 3.血漿IL-17濃度與BALF中IL-17濃度及肺組織IL-17蛋白表達量呈良好的相關性與一致性,提示血液檢測IL-17可以簡便準確地反映氣道IL-17水平。 4.孟魯司特鈉能降低哮喘大鼠血漿及BALF中LTD4、IL-17濃度,下調(diào)肺組織IL-17蛋白的表達量,抑制氣道炎癥,減緩氣道重塑；與槐杞黃顆粒聯(lián)合干預后能進一步改善上述指標,其抗炎作用可能是通過下調(diào)LTD4、IL-17來實現(xiàn)。
【圖文】：

H組與模型組比較無顯著性差異:各干預組平滑肌增生面積較模型組明顯降低(尸<0.05)，MK組與H組比較無顯著性差異，M膠+H組較MK組及H組明顯降低(尸<0.05)(見表2、圖2、附圖2一1至2一5、附圖3一1至3一5)。表2各組氣道重塑的比較(X士s)(氣道數(shù)=20)例數(shù)氣道杯狀細胞占上皮細膠原沉積面積組別(只)胞百分比(%)例a評bm-.卿2/四) 82.13士1.02 537.75士l，6#一一____*棄匕25.6勺士j.(，4 8343妊1.35▲*# 8261叭171+*#4，93士0.5322.5腳.00#15.13士1.27*春 21.05士l，60▲#16.42均.76+*#平滑肌增生面積(war可pbm，四今卿)17刀9士 C.673544土144#32.07土 1.51*#33.05土l，15*#30.25士l，33+▲*#勸el

H組、MK+H組IL一17表達較模型組減少，有顯著意義(P<0.05)，MK組表達低于H組(尸<住05)，MX十H組較MK組及H組表達減少(尸<0.05)(見表3、圖3、附圖4一l至4一5)。表3肺組織壓17表達童免疾組化瀏定(X士s，陽性面積百分比表示)組別例數(shù)(只)IL一17表達量 Control87.21土1.19M誠 1522.攤1.81#袱 513叫土1.51*# H519.93士100▲*#瓜 +H511.6肚1.55+▲*#一注:一#與6h任61組比較戶<百.0反*與兩6d己1組比較戶夏在6瓦石與麗K姐正已較幣而…厲廠.一+與H組比較P<0刀5淚耀崛卜11曰工 ControlModelMK+H圖3肺組織IL一17表達量免疫組化測定(X士s，，陽性面積表示)注:器與Control組比較P<005，*與Model組比較P<o乃5，么與MK組比較P<0.05，+與H組比較P<0D5
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R562.25

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 劉仁杰;萬毅新;王曉平;石軍年;段天林;李景釗;;慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-17、IL-23水平及臨床意義[J];重慶醫(yī)科大學學報;2011年08期

2 楊正生;彭振輝;李曉莉;宋健文;任建文;;姜黃素對IL-17誘導的人角質(zhì)形成細胞NO合成以及iNOS表達的影響[J];細胞與分子免疫學雜志;2011年09期

3 宋會穎;;消化性潰瘍病人血清中IL-17和IL-25的水平變化及意義[J];醫(yī)學信息(中旬刊);2011年07期

4 郭昕;陳廷玉;盧北燕;;子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者血清中IL-17、IL-6及TNF-α檢測的意義[J];中國醫(yī)藥指南;2011年16期

5 溫玉婷;劉偉;楊愛軍;王晨昱;李敏;王金穗;;IL-17和STAT3在結(jié)直腸癌組織中的表達及臨床意義[J];第三軍醫(yī)大學學報;2011年17期

6 蔡安季;戴勇;沈化清;蔣莉;蘇卓娃;;甲氨蝶呤對脂多糖誘導大鼠滑膜細胞株RSC-364分泌IL-17和IL-18的影響[J];放射免疫學雜志;2011年04期

7 樓曜憲;鄒強;靳津;王憲政;張一幟;王賓;;IL-17作為分子佐劑增強蛋白疫苗細胞免疫應答的研究[J];中國生物工程雜志;2011年07期

8 湯新逸;王勝軍;;IL-17~+ γδT細胞[J];細胞與分子免疫學雜志;2011年07期

9 陸紅;陳永安;尹秋芳;;平潰方治療潰瘍性結(jié)腸炎療效觀察及對相關因子水平影響[J];福建中醫(yī)藥;2011年02期

10 張勝男;孫超;胡媛;夏麗坤;;IL-17在單純皰疹性角膜基質(zhì)炎小鼠中表達的變化[J];國際眼科雜志;2011年09期

相關會議論文 前10條

1 趙莎;單保恩;艾軍;張超;;IL-17基因轉(zhuǎn)染小鼠乳腺癌細胞株的建立及其抗腫瘤機制研究[A];河北省免疫學會第六次免疫學大會資料匯編[C];2010年

2 徐西琳;邵冰;熊維寧;熊盛道;;表達IL-17的正義質(zhì)粒對小鼠銅綠假單胞菌肺部感染防御機制的研究[A];中華醫(yī)學會第七屆全國呼吸道感染學術(shù)大會暨第一屆多學科抗感染治療學術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

3 徐西琳;邵冰;熊維寧;熊盛道;;表達IL-17的正義質(zhì)粒對小鼠銅綠假單胞菌肺部感染防御機制的研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

4 夏婧;張湘燕;許梅;韓婧;;IL-17、MMP-9在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清中的變化及意義[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

5 謝華;何韶衡;孫麗;陳萍;;哮喘患者血漿IL-17及IL-10水平的測定與臨床意義[A];中華醫(yī)學會第二次全國變態(tài)反應學術(shù)會議論文匯編[C];2004年

6 蘇斌濤;劉文琪;;日本血吸蟲感染小鼠體內(nèi)IL-17的動態(tài)變化研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

7 于化鵬;易麗;;活菌卡介苗對支氣管哮喘小鼠IL-17的影響及其調(diào)節(jié)機制[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

8 趙靈芝;盧美萍;鮑興兒;陳蓮香;唐蘭芳;祝國紅;陳志敏;;反復喘息兒童支氣管肺泡灌洗液IL-17及相關細胞因子水平的變化[A];2011年浙江省醫(yī)學會兒科學分會學術(shù)年會暨兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級學習班論文匯編[C];2011年

9 溫赤君;;舌下粉塵螨滴劑治療兒童支氣管哮喘伴變應性鼻炎的臨床療效和血IL-17的變化[A];中華醫(yī)學會2011年全國變態(tài)反應學術(shù)會議論文集[C];2011年

10 盧娜;許愛娥;;IL-17和TGF-b在白癜風發(fā)病中的作用[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

相關博士學位論文 前10條

1 徐西琳;表達IL-17的正義質(zhì)粒對小鼠銅綠假單胞菌肺部感染防御機制的研究[D];華中科技大學;2011年

2 劉歆春;IL-17在大鼠肝移植急性排斥反應模型中的表達及作用研究[D];中南大學;2011年

3 陳博;IL-17在腎移植急性排斥反應中表達的變化及意義[D];吉林大學;2010年

4 何宋兵;CD4~+IL-17~+細胞在胰腺癌腫瘤微環(huán)境中的分布、表型特征、分化募集機制及臨床意義的實驗研究[D];蘇州大學;2012年

5 馬翔宇;白細胞介素-17（IL-17）正向調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細胞IL-6正反饋表達及其調(diào)控機理的研究[D];山東大學;2010年

6 董昭興;Th17細胞及IL-17在博來霉素致肺纖維化中的作用機制[D];昆明醫(yī)科大學;2012年

7 崔壯;Th17細胞及IL-17與糖尿病腎病的關系[D];天津醫(yī)科大學;2011年

8 劉毅;β-抑制蛋白2對哮喘小鼠CD4~+T細胞表達和產(chǎn)生IL-17的影響及其機制研究[D];中南大學;2011年

9 許麗梅;宣肺化痰活血法治療支氣管哮喘的療效觀察及其對LTD4、NGF的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學;2012年

10 格日勒圖;雞柔嫩艾美爾球蟲（E.tenella）MZ5-7基因免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫保護性試驗[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 王濤;槐杞黃聯(lián)合孟魯司特鈉干預對哮喘大鼠氣道炎癥及LTD4、IL-17表達的影響[D];中南大學;2010年

2 陳穎;原發(fā)性膽汁性肝硬化患者Th17細胞及IL-17表達的初步研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2010年

3 劉仁杰;慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-17、IL-23檢測及意義[D];蘭州大學;2011年

4 田鵬;IL-17在腰椎間盤突出癥患者突出椎間盤組織中的表達[D];天津醫(yī)科大學;2010年

5 孫s

本文編號：2684163