發(fā)布時(shí)間：2020-05-24 00:04

【摘要】： 目的：急性肺損傷(ALI)是嚴(yán)重創(chuàng)傷和感染后最早出現(xiàn)、發(fā)病率最高的并發(fā)癥之一，此癥起病急驟，發(fā)展迅速，病死率高。在致ALI的各種原因中，革蘭陰性菌感染是最常見的病因。本實(shí)驗(yàn)用一次性靜脈注射內(nèi)毒素方法復(fù)制兔ALI模型，通過對(duì)模型動(dòng)物的生理、生化及病理學(xué)指標(biāo)的觀察、測(cè)定，深入探討環(huán)氧化酶-2(COX-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPAR-γ)、氧化應(yīng)激、白介素-19(IL-19)、心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)以及凝血活性和微循環(huán)障礙等因素在ALI發(fā)病機(jī)理中的可能機(jī)制，同時(shí)予美洛昔康進(jìn)行干預(yù)，旨在臨床防治ALI提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：24只大耳白兔隨機(jī)分為3組：對(duì)照組(A組)、致傷組(B組)和干預(yù)組(C組)，每組8只。致傷組將內(nèi)毒素按700μg／kg經(jīng)頸靜脈一次注射完畢。對(duì)照組注射等液體量的生理鹽水。干預(yù)組將美洛昔康按2.5mg／kg經(jīng)頸靜脈注射，10min后再注入內(nèi)毒素(使用劑量與方法如致傷組)。各組均于實(shí)驗(yàn)各時(shí)點(diǎn)觀察呼吸頻率、心率、血壓變化，并分別采集動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治�。于�?shí)驗(yàn)后4h點(diǎn)處死動(dòng)物，檢測(cè)肺組織中COX-2mRNA、MMP-2mRNA、PPAR-γmRNA、PPAR-γ蛋白的表達(dá)。測(cè)定肺組織中超氧化物歧化酶(SOD)的活性與丙二醛(MDA)含量，肺組織中IL-19的含量。測(cè)定肺組織中血栓烷B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α))和內(nèi)皮素-1(ET-1)的含量，心肌組織中TXB2、6-keto-PGF1_α，H-FABP含量。光鏡下觀察肺組織和心組織病理學(xué)改變。 結(jié)果：靜注內(nèi)毒素0.5h后，B組動(dòng)物呼吸顯著加快，血壓、PaO_2／FiO_2(均數(shù)為265.4)顯著下降，較A組有顯著差異(p＜0.01)。而C組動(dòng)物呼吸稍加快，血壓、PaO_2／FiO_2下降，但與A組無顯著差異。A組肺組織COX-2mRNA、MMP-2mRNA表達(dá)較低，B組COX-2mRNA、MMP-2mRNA表達(dá)顯著高于A組(P＜0.01)，C組COX-2mRNA、MMP-2mRNA表達(dá)顯著低于B組(P＜0.01)但明顯高于A組(P＜0.01)。A組肺組織PPAR-γmRNA、PPAR-γ蛋白表達(dá)較高，B組PPAR-γmRNA、PPAR-γ蛋白表達(dá)顯著低于A組(P＜0.01)，C組PPAR-γmRNA、PPAR-γ蛋白表達(dá)顯著高于B組(P＜0.01)而低于A組(P＜0.01)。B組肺組織MDA含量明顯高于A組與C組，B組肺組織SOD活性明顯低于A組與C組，，但A組、C組間MDA與SOD無差別。B組肺組織IL-19含量顯著高于A組(P＜0.01)，C組表達(dá)顯著低于B組(P＜0.01)，但高于與A組(P＜0.05)。B組肺組織TXB_2／6-keto-PGF_(1α)、ET-1均高于對(duì)照組(P＜0.01)。C組肺組織TXB_2／6-keto-PGF_(1α)、ET-1均低于致傷組(P＜0.01)。B組心組織TXB_2／6-keto-PGF_(1α)比值高于A組(p＜0.05)，H-FABP明顯低于A組(p＜0.01)。C組心肌TXB_2／6-keto-PGF_(1α)比值介于A組、B組兩者之間，而H-FABP高于B組(p＜0.05)但與A組無差別(P＞0.05)。病理檢查示B組動(dòng)物肺組織可見ALI典型的病理損害。C組動(dòng)物肺組織損傷程度明顯輕于B組，結(jié)構(gòu)類似于A組。B組心組織出現(xiàn)心肌細(xì)胞明顯腫脹，染色不均，有灶性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，心內(nèi)膜下出血。C組心肌病理檢查示損傷輕于B組。 結(jié)論：1、靜脈一次性注射內(nèi)毒素可以復(fù)制兔ALI模型。2、環(huán)氧化酶-2活性和表達(dá)的增高在ALI發(fā)病過程中起了一定作用。3、MMP-2是MMPs中的一種，能降解基底膜中主要成分Ⅳ型膠原，這在ALI時(shí)肺毛細(xì)血管通透性增加，肺間質(zhì)和肺泡水腫形成，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)中可能起重要的作用。4、PPAR-γ是核激素受體超家族的成員，活化后能與特異性配體結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控下游靶基因表達(dá)，參與體內(nèi)外抗炎反應(yīng)。PPAR-γ表達(dá)下調(diào)可能在ALI發(fā)病過程中起了一定作用5、氧化損傷和抗氧化相對(duì)不足是ALI發(fā)病機(jī)理之一。6、IL-19在ALI的發(fā)病機(jī)理中可能起重要作用。7、微循環(huán)障礙是ALI肺組織受損的表現(xiàn)之一。8、內(nèi)毒素所致肺損傷時(shí)心肌組織中H-FABP含量降低可判定出現(xiàn)心肌受損。9、美洛昔康對(duì)內(nèi)毒素所致ALI有一定的保護(hù)作用。主要保護(hù)機(jī)制包括：抑制COX-2mRNA、MMP-2mRNA表達(dá)，上調(diào)PPAR-γmRNA、PPAR-γ蛋白表達(dá)，下調(diào)IL-19的表達(dá)，降低肺組織中MDA含量，上調(diào)肺組織中SOD活性，維持肺組織TXB_2／6-keto-PGF_(1α)平衡和降低ET-1含量，維持心肌中TXB_2／6-keto-PGF_(1α)的相對(duì)平衡及維持H-FABP接近正常水平等。
【圖文】：

▲P<0.01vs緲upA;*p<0.01vs緲upB圖6三組兔肺組織肺水含量Fig6ThelungwatereontentinthreegrouPsofrabbi四、組織病理學(xué)觀察(一)肺組織大體標(biāo)本觀察(見附圖1，2，3)肉眼見A組肺無出血點(diǎn)和癖斑，無水腫，切面無滲液。B組見肺臟體積增大，紅色淤血和出血灶，切面有較多血性滲液。C組動(dòng)物肺輕度水，表面散在有點(diǎn)狀出血，切面滲液明顯少于B組。(二)肺組織光學(xué)顯微鏡下觀察A組動(dòng)物肺組織病理切片顯示:肺泡結(jié)構(gòu)基本正常，肺泡腔滲出，肺泡間隔無明顯水腫、增寬，肺間質(zhì)血管結(jié)構(gòu)基本正

五、RT一PCR法檢測(cè)COX一2，MMP一2，PPAR一g~結(jié)果RT一PCR后，用 1.5%瓊脂糖凝膠電泳，分別在282bp、33lbp、758bp處顯示COX一2、MMP一2、PPAR一Y陽性電泳帶(圖8、9、10)。從表7，圖11可見:COX一ZmRNA、MMP一 2mRNA、PPAR一 YmRNA與GAPDHmRNA的IOD比值之間比較:A組COX一ZmRNA、枷P一 2mRNA表達(dá)較低，B組COX一ZmRNA、MMP一 2mRNA表達(dá)顯著高于A組(P(0.01)，C組COX一ZmRNA、咖P一 2mRNA表達(dá)顯著低于B組(P(0.01)但明顯高于A組(P(0.01)。A組PPAR一 YmRNA表達(dá)較高，B組PPAR一 YmRNA表達(dá)顯著低于A組 (P<0.01)，C組PPAR一YmRNA表達(dá)顯著高于B組(P<0.01)而低于A組(P(0.01)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R563

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馮英凱,徐劍鋮,楊慶華,錢桂生;內(nèi)毒素肺損傷大鼠Th1/Th2細(xì)胞漂移的變化及其作用探討[J];重慶醫(yī)學(xué);2004年07期

2 明媚,孟祥志;早期心肌缺血心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白的免疫組織化學(xué)觀察[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2004年01期

3 江宏,汪建新,薛慶亮;兔內(nèi)毒素性急性肺損傷中磷脂酶A_2致傷機(jī)制及氯喹保護(hù)作用的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2004年11期

4 臧秀賢;董均樹;李秀江;;氧自由基在急性期多器官功能障礙綜合征心肌損傷中的變化[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

5 薛慶亮,汪建新,江宏;內(nèi)毒素致兔急性肺損傷及1,6-二磷酸果糖保護(hù)性作用的研究[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2005年01期

6 王平,顧振綸;新型非甾體抗炎藥——美洛昔康[J];中國(guó)新藥與臨床雜志;2000年06期

7 趙業(yè)婷;姚三巧;趙金垣;;內(nèi)皮素與急性呼吸窘迫綜合征[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2005年06期

8 張定宇,姚尚龍;機(jī)械通氣致肺損傷大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)[J];中華麻醉學(xué)雜志;2005年07期

9 王金生,陳正堂,廖偉;急性肺損傷環(huán)氧合酶同工酶mRNA表達(dá)的變化及地塞米松的影響[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2000年05期

10 左騎;內(nèi)毒素所致急性肺損傷的免疫治療策略[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2003年08期

本文編號(hào)：2678158