【摘要】： 前言 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種具有氣流受限特征的疾病，氣流受限不完全可逆、呈進行性發(fā)展，與肺部對有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應有關，其特點是肺泡數(shù)量減少，不能為豐富的氣體交換提供足夠的表面面積。維生素A是一種人體必須的低分子有機化合物，對機體物質代謝和生長發(fā)育的調控作用受到人們的重視，其代謝活性物質維A酸(RA)對實驗性肺氣腫的逆轉作用已經(jīng)被Massaro等人所報告。為明確維生素A及RA對實驗性肺氣腫的早期干預作用，我們通過彈性蛋白酶氣管內滴的方法復制大鼠肺氣腫模型，觀察RA及維生素A早期干預對大鼠肺氣腫形成的影響。 材料與方法 一、實驗動物與分組 Wistar雄性大鼠28只，體重(274±23)g，隨機分為四組：對照組，模型組，RA組，維生素A組。模型組，RA組，維生素A組用彈性蛋白酶氣管內滴復制肺氣腫模型：麻醉大鼠，暴露氣管，用1ml注射器取彈性蛋白酶生理鹽水溶液(5000u／ml)，針頭刺入氣管滴入藥液，2.0u／kg，注入空氣保證藥液進入，豎起鼠板搖動使藥液分布均勻，縫合皮膚，，消毒。對照組手術方法相同，氣管內滴入等量生理鹽水。第二天開始RA組給RA蓖麻油溶液(500βg／kg體重)日一次腹腔注射，維生素A組給維生素A(50000u／kg體重)日 一次灌胃，共25天。 二、病理標本制備及免疫組織化學染色 麻醉大鼠，打開胸腔，將一頂端膨大的大號針頭插人氣管結扎 固定，接自制灌注裝置，保持＊96kPa水柱壓力，10％中性福爾馬 林灌注肺臟30 min，結扎氣管，浸人10％中性福爾馬林固定24／J’ 時以上。每只大鼠左肺最大橫徑處肺組織常規(guī)石蠟包埋切片，HE 染色，部分石蠟切片行增殖細胞核抗原（PCNA）免疫組織化學染 色，陽性反應為胞核棕褐色顆粒狀。 三、形態(tài)學定量分析 應用 MetaMonilfDP10／BX51系統(tǒng)的 Meta MOrth Imager System V4石軟件進行分析，每只大鼠觀測兩張切片，每張隨機選擇八個 視野，避開支氣管及大、中血管。觀察平均肺泡面積（MAAX計數(shù) 每個視野肺泡數(shù)（NaX測出每個視野面積TA，HE染色陽性區(qū)面 積PA，以 MAA＝（TA－PA）／Na計算每個視野平均肺泡面積；平 均內村間隔（MLI人以每個視野正中為中心劃“十”字線，計數(shù)經(jīng) 此線的肺泡間隔數(shù)（NS人測出十字線總長度（L＊以 MLI＝L／NS 得到平均內襯間隔。 四JCNA指數(shù)：指計數(shù) 1000個細胞中 PCNA染色陽性的細胞 的數(shù)量。計數(shù)每幅圖像中的正常藍染的細胞核的數(shù)量＊，手工計 數(shù)PCNA染色陽性的細胞核的數(shù)量NZ，每幅圖像的PCNA指數(shù)一 NZ八NI＋NZ廠求均值得出每張切片的 PCNA指數(shù)。 五、統(tǒng)計學處理：采用 Microsoft Excel 2000對數(shù)據(jù)進行雙樣本 異方差假設t檢驗。 結 果 一、病理改變 大體觀察：模型組肺體積明顯增大，顏色蒼白，表面見多個大 ·二· 小不等的過度充氣肺泡，肺彈性減弱，剖胸后不萎縮。RA組大鼠 肺改變不明顯，維生素A組有類似改變但不如模型組顯著。 光鏡觀察：模型組肺泡大小不等，結構紊亂，肺泡管、肺泡囊和 肺泡明顯擴張，壁變薄，有不同程度的斷裂，部分融合成肺大泡。 RA組肺泡大小不均情況輕微，有較多小肺泡出現(xiàn)，肺泡壁斷裂和 氣腔擴張情況很輕。維生素A組界于模型組和RA組之間。 二、形態(tài)學定量分析 模型組平均肺泡面積p745 L 679）pmz，與對照組O t 344…mz比增長 90％以上，平均內襯間隔為陽5．03．23）pm， 較對照組（42．02 t 5．98）卜m變大；RA組平均肺泡面積為江626 t 230）pmz，較對照組增長33％左右，平均內村間隔為K6．35。3， 38）卜m；維生素 A組平均肺泡面積為婦428士 322）pm＼平均內襯 間隔為K8．98。3．80）pm，與模型組比較無顯著性差異。 三、PCNA指數(shù)分析 對照組PCNA指數(shù)為20。4，模型組PCNA指數(shù)上升為57 t 6 汀＜o．01人RA組利＊A指數(shù)顯著升高，與對照組及模型組比較 差異顯著神值分別＜O．00且和0對門，維生素A組K＊A指數(shù)與 對照組比較有升高，但與模型組比較差異不顯著河＞0．05人 討 論 1997年，Massaro等報告 RA治療能減輕彈性蛋白酶5！起的大 鼠肺氣腫。以后，PaLila等重復了Massaro的研究并通過計算機輔 助圖像分析系統(tǒng)對肺泡面積和密度進行了分析，證實RA治療可 以逆轉實驗性肺氣腫 50％的損害。Tepper等報告 ATRA可以顯 著減少肺氣腫模型的肺總量和殘氣量變化，而肺活量沒有顯著減 少。關于實驗性肺氣腫的早期藥物干預和預防目前缺乏足夠研 究。本研究中RA組平均肺泡面積與模型組相比差異顯著證實 ·3· M早期干預確實能減輕實驗性肺氣腫的發(fā)生。 維生素A與肺的
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R563.3

【參考文獻】

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1 安立,張洪玉,龐寶森,牛淑潔,馬力,辛萍,翁心植;維A酸對大鼠實驗性阻塞性肺氣腫的預防作用及其機制探討[J];中華結核和呼吸雜志;2002年06期

本文編號：2676032