【摘要】：目的: 通過建立急性肺損傷大鼠模型和體外肺泡巨噬細胞培養(yǎng)體系，觀察急性肺損傷中，肺泡巨噬細胞在沐舒坦干預(yù)前后細胞因子表達的情況，探討沐舒坦可能的肺損傷保護機制。 方法： 1、體內(nèi)實驗：大鼠24只，，隨機分成3組，每組8只：（1）正常對照組；（2）急性肺損傷組：采用腹腔注射酵母懸液方法復(fù)制大鼠急性肺損傷模型；（3）沐舒坦治療組：建立ALI大鼠模型后用沐舒坦干預(yù)。觀察指標主要有： 肺部病理學(xué)改變、測量大鼠肺系數(shù)、血氧分壓，肺泡巨噬細胞TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA的表達則采用通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)檢測。 2、體外實驗：收集肺泡巨噬細胞后分3組：（1）正常對照組：肺泡巨噬細胞中加無菌生理鹽水；（2）LPS組：予LPS10mg/L刺激肺泡巨噬細胞；（3）LPS+沐舒坦組：予LPS10mg/L和沐舒坦180μmol/L刺激肺泡巨噬細胞。分別于刺激前（0小時），刺激后（6、12、24小時）留取細胞，-80℃凍存?zhèn)溆�；每個時點和實驗組取6個復(fù)孔。通過RT-PCR技術(shù)檢測肺泡巨噬細胞TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA的表達變化。 結(jié)果： 1、體內(nèi)實驗：（1）急性肺損傷組大鼠兩肺呈現(xiàn)充血、水腫、體積增大，可見廣泛點狀、片狀出血灶，切面疏松、腫脹；沐舒坦治療組大鼠病變與急性肺損傷組類似，但肺部出血灶明顯減少。光鏡觀察，急性肺損傷組大鼠肺泡間隔明顯增寬，肺泡壁完整性破壞，肺間質(zhì)見紅細胞及單核巨噬細胞、中性粒細胞浸潤。沐舒坦治療組病變輕于急性肺損傷組，出血、細胞浸潤有所減輕。（2）急性肺損傷組大鼠肺系數(shù)明顯升高，動脈血氧分壓明顯降低，與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；給予沐舒坦干預(yù)治療后，肺系數(shù)均明顯下降，與急性肺損傷比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），動脈血氧分壓有所升高，但仍低于正常對照組水平。（3）正常對照組大鼠肺泡巨噬細胞未檢測到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達；與正常對照組比較，急性肺損傷組TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達水平有顯著升高；給予沐舒坦干預(yù)治 WP=5 療后，TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達水平均明顯下降，與急性肺損傷組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），但仍高于正常對照組。 2、體外實驗：正常對照組未檢測到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達；LPS組和LPS+沐舒坦組在刺激前未檢測到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達；LPS組6h時TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達增高，隨后維持在較高水平；LPS+沐舒坦組6h時起出現(xiàn)TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達，但各時點TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表達水平明顯低于LPS組，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1、腹腔注射酵母懸液可復(fù)制急性肺損傷大鼠模型； 2、肺泡巨噬細胞可在急性肺損傷發(fā)病過程中激活，并觀察到TNF-α、IL-10、IL-24mRNA表達水平增高； 3、，沐舒坦可抑制急性肺損傷或LPS刺激的肺泡巨噬細胞TNF-α、IL-10、IL-24細胞因子mRNA的表達水平。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R563

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本文編號：2667591